1、本科学生综合性实验报告学号 104120167 姓名 杨开增 学院 生命科学学院 专业、班级 10级 实验课程名称 诱变物质的微核试验和小鼠骨髓细胞染色体标本制备与观察 教师及职称 李云海（副教授） 开课学期 2012 至 2013 学年 第一 学期填报时间 2012 年 11 月 20 日云南师范大学教务处编印一实验设计方案实验序号 实验 12 实验名称诱变物质的微核试验和小鼠骨髓细胞染色体标本制备与观察实验时间 2012 年 11月 2 日至 9日实验室 生科院 224 试验室1实验目的（1）诱变物质的微核试验的实验目的a 了解微核发生的机制； b 掌握微核实验的一般程序和实践意义； c
2、掌握对实验动物进行药物处理的一般程序； d 掌握进行实验设计的一般程序和规则，并锻炼实践能力。 (2)小鼠骨髓细胞染色体标本制备与观察a 学习并掌握小鼠骨髓细胞染色体的制备方法。b 观察小鼠染色体的形态特征,统计细胞的染色体数目。 2 实验原理、实验流程或装置示意图(1)实验原理（a） ，微核 （Micronucleus）：染色单体或染色体的无着丝点断片，或因纺锤体受损而丢失的整个染色体，在细胞分裂后期，仍然遗留在细胞质中。末期之后，单独形成一个或几个规则的次核，被包含在子细胞的胞质内，因比主核小，故称为微核。凡能使染色体发生断裂或使染色体和纺锤体联结损伤的化学物，都可用微核试验来检测。各种类
3、型的骨髓细胞都可形成微核，但有核细胞的胞质少，微核与正常核叶及核的突起难以鉴别。嗜多染红细胞是分裂后期的红细胞由幼年发展为成熟红细胞的一个阶段，此时红细胞的主核已排出，因胞质内含有核糖体，姬姆萨染色呈灰蓝色，成熟红细胞的核糖体已消失，被染成淡桔红色。骨髓中嗜多染红细胞数量充足，微核容易辨认，而且微核自发率低，因此，骨髓中嗜多染红细胞成为微核试验的首选细胞群。（b）骨髓细胞具有高度的分裂增殖能力。因此可以直接得到中期细胞而不必象血淋巴细胞或组织那样要经过体外培养。经秋水仙素处理后，分裂增殖中的骨髓细胞由于纺缍体的形成受到抑制，染色体不能正常趋向两极而使之停留于中期，同时染色体缩短，轮廓清晰，把收
4、获的细胞进行低渗，固定处理，使细胞处于膨胀状态，再将细胞悬液滴在载片上，使细胞破裂，染色体散开，染色后即可观察到染色体。(2)实验流程3实验设备及材料（1）诱变物质的微核试验仪器和器械：生物显微镜、解剖剪、镊子、注射器、载玻片、盖玻片、塑料吸瓶、吸水纸等。试剂及配制：（a）小牛血清（灭活）将滤菌的小牛血清置于 56恒温水浴保温 30min 灭活。灭活的小牛血清通常保存于冰箱冷冻室里。（b） 姬姆萨（Giemsa）染液成分：Giemsa 染料 3.8g、 甲醇 375mL、甘油 125mL。配制：将染料和少量甲醇于乳钵里仔细研磨，再加入甲醇至 375mL 和甘油，混合均匀，放置 37恒温箱中保温
5、 48h。保温期间，振摇数次，促使染料的充分溶解，取出过滤，两周后用。(c）0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH6.8）成分：磷酸氢二钠（Na2HPO412H2O） 71.64g/L磷酸二氢钠（NaH2PO4 2H2PO4） 31.21g/L分别加蒸馏水 1000mL 配成 A、B 液；取 A 液 51ml,B 液 49ml 混合，再加入100ml 蒸馏水混匀，即为 pH6.8 的 0.1mol/L 磷酸缓冲液。（d）Giemsa 应用液取 2ml Giemsa 染液与 40ml 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液混合而成。临用现配。 实验材料小鼠是微核试验的常规动物。体重为 25g 35g。也可
6、选用成年大鼠，体重为 150g 200g。剂量分组一般取受试物一般至少设 3 个剂量。每个剂量组 5 只动物。另外，还应设溶剂对照和阳性物对照组。常用环磷酰胺作为阳性物对照，剂量可为 40mg/kg体重。（2） 小鼠骨髓细胞染色体标本制备与观察a.器具：注射器（1ml，5ml 各一支） 、托盘、解剖剪、镊子、吸管、离心管、离心机、载片、滤纸、白纱布小块等。b 药品： 0.15mg/ml 秋水仙素， 1%柠檬酸三钠，固定液（3 份甲醇，1 份冰乙酸，临用时现配） ，Giemsa 染液，2.2%柠檬酸钠，0.01M 磷酸缓冲液（PBS）pH6.8。 小鼠（体重 30 克最佳；尽量雌雄各半）溶液配制
7、：2.2%柠檬酸三钠：称 11g 柠檬酸三钠到 500ml 蒸馏水中，充分溶解；1%柠檬酸三钠：取 5g 柠檬酸三钠溶解到 500ml 蒸馏水中，充分溶解；PBS（pH6.8): A 液：取 Na2HPO4 12g 溶于 500ml 蒸水中，充分溶解；B 液：取 KH2PO4 4.55g 溶于 500ml 蒸水中，充分溶解；使用时 A、B 液等体积混合，即为 pH6.8 的 PBS；0.15mg/ml 秋水仙素：取秋水仙素 15mg 溶于 100ml 0.85%生理盐水 中，混匀；75%酒精：取 375ml 95%乙醇，加入 125ml 馏蒸水；4实验方法步骤及注意事项(一) 诱变物质的微核试
8、验的实验步骤（1）骨髓的制取用断颈法处死小鼠。用剪刀剪开腿部的皮肤，用镊子夹住小鼠的股骨，剪去股骨周围的肌肉，将小鼠的两股骨取出，擦净股骨上的肌肉。去股骨的髋面，将吸有 0.85% Nacl 生理等渗液小注射器的针头插入，反复几次吹出骨髓细胞。反复吹打使其混合均匀，制成细胞悬液。 将细胞悬液在 1000 转/分离心 5 分钟，弃除上清液。（2） 涂片在离心管中加入少量的小牛血清（约 0.3ml)混匀后，按血常规涂片法涂片，长度约 2cm 3cm (涂片时一次涂成） 。在空气中晾干。（3） 固定将干燥的涂片放入甲醇液中固定 5min。即使当日不染色，也应固定后保存。（4） 染色将固定过的涂片放入
9、 Giemsa 应用液中，染色 20min 30min，然后立即用0.1mol/L 磷酸盐缓冲液冲洗。（5） 封片用滤纸及时擦干染片背面的水滴，再用双层滤纸轻轻按压染片，以吸附染片上残留的水分，再在空气中晃动数次，以促其尽快晾干，然后放入二甲苯中透明 5min，取出滴上适量光学树脂胶，盖上盖玻片，写好标签。（6）观察与计数先用低倍镜，后用高倍镜粗略检查，选择细胞分布均匀，细胞无损，着色适当的区域，再在油浸镜下计数。虽然不计数含微核的有核细胞，但需用有核细胞形态染色完好做好判断制片优劣的标准。数据处理利用统计学软件 SPSS 的单因素方差分析或 t 检验等方法，进行数据处理，分析实验结果（如后表
10、） 。 （二）小鼠骨髓细胞染色体标本制备与观察（1） 、处理：用 1.5mg/kg 秋水仙素腹腔注射处理小鼠（注射量为0.1ml/10g 体重） 。即用以上配制的秋水仙溶液按每 10g 体重注射 0.1ml。注射后 24 小时，可以取骨髓。（2） 、 处死：断颈法处死小鼠。剪刀剪开腿部的皮肤，用镊子夹住小鼠的股骨，剪去股骨周围的肌肉，将小鼠的两股骨取出，擦净股骨上的肌肉。去股骨的髋面，将吸有 2.2%柠檬酸三钠溶液的小注射器的针头插入，反复几次吹出骨髓细胞，反复吹打直至股骨呈白色，制成细胞悬液。（3） 、低渗：将细胞悬液在 1000rpm/min 离心 5min，弃除上清液，留 0.5ml 摇
11、匀。向细胞液中再加入 1%的柠檬酸三钠溶液 5ml 用吸管轻吹打均匀，在室温低渗 30min。低渗期间，配制固定液，即甲醇：冰醋酸为 3:1（v/v)，置4 冰箱中备用。（4 ）预固定(1 次)：低渗处理后的细胞悬液离心 5 分钟，留 1ml 原液，摇匀。加入新配制的固定液至 6ml，吹打均匀，固定 5 分钟，再在 1000rpm/min 离心 3-5min，去掉上清液。（5） 固定（2 次）：沿离心管壁慢慢加入新配制的固定液 6ml， 用吸管轻轻吹打均匀，室温下固定 5min，1000rpm/min 3min，弃去上清；如此 反复固定两次（共固定 3 次） 。（6） 根据管底细胞量的多少，加
12、入新配制的固定液 0.3 0.8ml，用吸管打均匀，使其形成细胞悬液。（7） 滴片：将预冷的载玻片（0冰浴） ，水平或倾斜 45 角放置，用吸管吸取细胞悬液，从约 0.5 -1m 高处滴 12 滴到片子上，用口将其吹干，静置使其干燥。（8） 染色：将干燥的玻片放入 2ml 吉姆萨原液加入 40ml 磷酸缓冲液（pH6.8）配成的染液中染色 20min，用磷酸缓冲液（pH6.8）冲洗，晾干后镜检。（三）注意事项（1）诱变物质的微核试验的实验中：选择细胞完整、分散均匀，着色适当的区域，在油镜下观察。以有核细胞形态完好作为判断制片优劣的标准。 本法系观察嗜多染红细胞的微核。用 Giemsa 染色法，
13、嗜多染红细胞呈灰蓝色，成熟红细胞呈粉红色。典型的微核多为单个的、圆形、边缘光滑整齐，嗜色性与核质一致，呈紫红色或蓝紫色，直径通常为红细胞的 1/201/5。每只动物计数 1000个嗜多染红细胞，观察含有微核的嗜多染红细胞数，微核率以千分率表示。涂片时推片与载玻片之间角度应小于 45 度。匀速推向一端。太快会将细胞推向末端且片子较薄。太慢会使片子太厚，细胞分散不均匀影响计数。（2）小鼠骨髓细胞染色体标本制备与观察的实验中：购买小鼠时候体重 30 克最佳；尽量雌雄各半。获得足够量的细胞是实验成功的条件之一。每次操作要细心。放弃上清时，避免将细胞带走。滴片时注意 3 个要点：首先要保持一定高度（1
14、尺左右） ，其次要准确滴在玻片上且不要重叠，最后要用嘴向同一个方向吹气（避免用力，否则细胞会被吹到一端） 。自来水冲洗要掌握好时间，避免标本褪色。5实验数据处理方法（1）诱变物质的微核试验的实验中数据处理：利用统计学软件 SPSS 的单因素方差分析或 t 检验等方法，进行数据处理，分析实验结果。微核试验数据统计总表 1各受试小鼠 1000 个受检细胞中含微核细胞数受试物 剂量mg/Kg组别 1 2 3 4 5 6 7 8120 1 38 33 35 37 34 35 36 3080 2 28 31 30 32 29 28 33 27对苯二酚40 3 20 25 21 23 28 26 24 2
15、23 1 36 33 32 34 35 31 31 371.5 2 29 25 23 26 24 27 25 24秋水仙素1 3 24 21 23 20 19 25 22 193 1 22 25 20 26 21 23 22 182 2 16 22 21 19 20 18 17 15氯化汞1 3 13 17 15 16 14 15 17 13阴性对照蒸馏3 2 1 4 3 5 3 9水阳性对照环磷酰胺40mg/kg 体重38 44 45 40 36 41 43 39表 2 对苯二酚对动物骨髓嗜多染红细胞微核发生率组 别 剂量 动物数 受检细胞数 含微核细胞数 微核率 P 值(g/kg 体重)
16、(只) (个) (个) ()受试物 120 8 800080 8 8000对苯二酚 40 8 8000溶剂对照（蒸馏水） 8 8000阳性物对照 环磷酰胺(mg/kg 体重) 406参考文献诱变物质的微核试验的实验中参阅的文献： 1孟紫强，阮爱东，桑楠等.SO2 污染对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的诱发作用.环境科学，2002，23（4）123-125. 2孟紫强，桑楠，张波等.二氧化硫体内衍生物诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的效应.环境科学学报，2000，20（2）239-243. 3耿德贵，王秀琴，刘士旺等.除草剂使它隆对黄鳝细胞的致突变作用研究.环境与健康杂志，2000，17（2）103-10
17、5.4周晓蓉，李百祥，邱向红等.小鼠骨髓及肝血中嗜多染红细胞微核率的比较.卫生毒理学杂志，1999，13（1）66-67. 5 曹佳.微核实验在中国的应用、发展与展望.遗传，2003，25（1）73-76. 二实验报告1实验现象与结果（1）诱变物质的微核试验的实验中：a,实验现象：先用低倍镜，后用高倍镜粗略检查，选择细胞分布均匀，细胞无损，着色适当的区域，再在油浸镜下计数。虽然不计数含微核的有核细胞，但需用有核细胞形态染色完好做好判断制片优劣的标准。选择细胞完整、分散均匀，着色适当的区域，在油镜下观察。以有核细胞形态完好作为判断制片优劣的标准。本法系观察嗜多染红细胞的微核。用 Giemsa 染
18、色法，嗜多染红细胞呈灰蓝色，成熟红细胞呈粉红色。典型的微核多为单个的、圆形、边缘光滑整齐，嗜色性与核质一致，呈紫红色或蓝紫色，直径通常为红细胞的 1/201/5。在1000 个受检细胞中，数含有微核的细胞，并计数。b,实验结果：所计的数据在上表中可见。（2）小鼠骨髓细胞染色体标本制备与观察的实验中：a,实验现象：低倍镜寻找中期分裂相，然后用高倍镜和油镜观察染色体形态，统计染色体数目。b,实验结果：可见小鼠的 40 条染色体呈紫红色。并且知道小鼠染色体的形态特征。2对实验现象、实验结果的分析及其结论（1）诱变物质的微核试验的实验中：将统计的数据利用统计学软件 SPSS 的单因素方差分析或 t 检
19、验等方法，进行数据处理，分析实验结果（如后表） 。方差齐性检验微核率()Levene 统计量 df1 df2 显著性.311 9 70 .969多重比较因变量:微核率()95% 置信区间(I) 受试物 (J) 受试物均值差 (I-J) 标准误 显著性 下限 上限对苯二酚80mg/Kg 5.000* 1.148 .000 2.71 7.29对苯二酚40mg/Kg 11.125* 1.148 .000 8.84 13.41秋水仙素3mg/Kg 1.125 1.148 .330 -1.16 3.41LSD 对苯二酚120mg/Kg秋水仙素1.5mg/Kg 9.375* 1.148 .000 7.09
20、 11.66秋水仙素1mg/Kg 12.750* 1.148 .000 10.46 15.04氯化汞3mg/Kg 12.625* 1.148 .000 10.34 14.91氯化汞2mg/kg 16.250* 1.148 .000 13.96 18.54氯化汞1mg/Kg 19.750* 1.148 .000 17.46 22.04阴性对照 31.000* 1.148 .000 28.71 33.29对苯二酚120mg/Kg -5.000* 1.148 .000 -7.29 -2.71对苯二酚40mg/Kg 6.125* 1.148 .000 3.84 8.41秋水仙素3mg/Kg -3.87
21、5* 1.148 .001 -6.16 -1.59秋水仙素1.5mg/Kg 4.375* 1.148 .000 2.09 6.66秋水仙素1mg/Kg 7.750* 1.148 .000 5.46 10.04氯化汞3mg/Kg 7.625* 1.148 .000 5.34 9.91氯化汞2mg/kg 11.250* 1.148 .000 8.96 13.54氯化汞1mg/Kg 14.750* 1.148 .000 12.46 17.04对苯二酚80mg/Kg阴性对照 26.000* 1.148 .000 23.71 28.29对苯二酚120mg/Kg -11.125* 1.148 .000 -
22、13.41 -8.84对苯二酚80mg/Kg -6.125* 1.148 .000 -8.41 -3.84秋水仙素3mg/Kg -10.000* 1.148 .000 -12.29 -7.71秋水仙素1.5mg/Kg -1.750 1.148 .132 -4.04 .54秋水仙素1mg/Kg 1.625 1.148 .161 -.66 3.91氯化汞3mg/Kg 1.500 1.148 .196 -.79 3.79氯化汞2mg/kg 5.125* 1.148 .000 2.84 7.41氯化汞1mg/Kg 8.625* 1.148 .000 6.34 10.91对苯二酚40mg/Kg阴性对照
23、19.875* 1.148 .000 17.59 22.16对苯二酚120mg/Kg -1.125 1.148 .330 -3.41 1.16对苯二酚80mg/Kg 3.875* 1.148 .001 1.59 6.16对苯二酚40mg/Kg 10.000* 1.148 .000 7.71 12.29秋水仙素1.5mg/Kg 8.250* 1.148 .000 5.96 10.54秋水仙素1mg/Kg 11.625* 1.148 .000 9.34 13.91氯化汞3mg/Kg 11.500* 1.148 .000 9.21 13.79氯化汞2mg/kg 15.125* 1.148 .000
24、12.84 17.41氯化汞1mg/Kg 18.625* 1.148 .000 16.34 20.91秋水仙素3mg/Kg阴性对照 29.875* 1.148 .000 27.59 32.16对苯二酚120mg/Kg -9.375* 1.148 .000 -11.66 -7.09对苯二酚80mg/Kg -4.375* 1.148 .000 -6.66 -2.09对苯二酚40mg/Kg 1.750 1.148 .132 -.54 4.04秋水仙素1.5mg/Kg秋水仙素3mg/Kg -8.250* 1.148 .000 -10.54 -5.96秋水仙素1mg/Kg 3.375* 1.148 .0
25、04 1.09 5.66氯化汞3mg/Kg 3.250* 1.148 .006 .96 5.54氯化汞2mg/kg 6.875* 1.148 .000 4.59 9.16氯化汞1mg/Kg 10.375* 1.148 .000 8.09 12.66阴性对照 21.625* 1.148 .000 19.34 23.91对苯二酚120mg/Kg -12.750* 1.148 .000 -15.04 -10.46对苯二酚80mg/Kg -7.750* 1.148 .000 -10.04 -5.46对苯二酚40mg/Kg -1.625 1.148 .161 -3.91 .66秋水仙素3mg/Kg -1
26、1.625* 1.148 .000 -13.91 -9.34秋水仙素1.5mg/Kg -3.375* 1.148 .004 -5.66 -1.09氯化汞3mg/Kg -.125 1.148 .914 -2.41 2.16氯化汞2mg/kg 3.500* 1.148 .003 1.21 5.79氯化汞1mg/Kg 7.000* 1.148 .000 4.71 9.29秋水仙素1mg/Kg阴性对照 18.250* 1.148 .000 15.96 20.54对苯二酚120mg/Kg -12.625* 1.148 .000 -14.91 -10.34对苯二酚80mg/Kg -7.625* 1.148
27、 .000 -9.91 -5.34对苯二酚40mg/Kg -1.500 1.148 .196 -3.79 .79秋水仙素3mg/Kg -11.500* 1.148 .000 -13.79 -9.21秋水仙素1.5mg/Kg -3.250* 1.148 .006 -5.54 -.96秋水仙素1mg/Kg .125 1.148 .914 -2.16 2.41氯化汞2mg/kg 3.625* 1.148 .002 1.34 5.91氯化汞1mg/Kg 7.125* 1.148 .000 4.84 9.41氯化汞3mg/Kg阴性对照 18.375* 1.148 .000 16.09 20.66对苯二酚
28、120mg/Kg -16.250* 1.148 .000 -18.54 -13.96对苯二酚80mg/Kg -11.250* 1.148 .000 -13.54 -8.96对苯二酚40mg/Kg -5.125* 1.148 .000 -7.41 -2.84秋水仙素3mg/Kg -15.125* 1.148 .000 -17.41 -12.84秋水仙素1.5mg/Kg -6.875* 1.148 .000 -9.16 -4.59秋水仙素1mg/Kg -3.500* 1.148 .003 -5.79 -1.21氯化汞3mg/Kg -3.625* 1.148 .002 -5.91 -1.34氯化汞1
29、mg/Kg 3.500* 1.148 .003 1.21 5.79氯化汞2mg/kg阴性对照 14.750* 1.148 .000 12.46 17.04对苯二酚120mg/Kg -19.750* 1.148 .000 -22.04 -17.46对苯二酚80mg/Kg -14.750* 1.148 .000 -17.04 -12.46对苯二酚40mg/Kg -8.625* 1.148 .000 -10.91 -6.34氯化汞1mg/Kg秋水仙素3mg/Kg -18.625* 1.148 .000 -20.91 -16.34秋水仙素1.5mg/Kg -10.375* 1.148 .000 -12
30、.66 -8.09秋水仙素1mg/Kg -7.000* 1.148 .000 -9.29 -4.71氯化汞3mg/Kg -7.125* 1.148 .000 -9.41 -4.84氯化汞2mg/kg -3.500* 1.148 .003 -5.79 -1.21阴性对照 11.250* 1.148 .000 8.96 13.54对苯二酚120mg/Kg -31.000* 1.148 .000 -33.29 -28.71对苯二酚80mg/Kg -26.000* 1.148 .000 -28.29 -23.71对苯二酚40mg/Kg -19.875* 1.148 .000 -22.16 -17.59
31、秋水仙素3mg/Kg -29.875* 1.148 .000 -32.16 -27.59秋水仙素1.5mg/Kg -21.625* 1.148 .000 -23.91 -19.34秋水仙素1mg/Kg -18.250* 1.148 .000 -20.54 -15.96氯化汞3mg/Kg -18.375* 1.148 .000 -20.66 -16.09氯化汞2mg/kg -14.750* 1.148 .000 -17.04 -12.46阴性对照氯化汞1mg/Kg -11.250* 1.148 .000 -13.54 -8.96*. 均值差的显著性水平为 0.05。微核率()alpha = 0.
32、05 的子集受试物 N 1 2 3 4 5 6 7阴性对照 8 3.75氯化汞1mg/Kg8 15.00氯化汞2mg/kg8 18.50秋水仙素1mg/Kg8 22.00氯化汞3mg/Kg8 22.13对苯二酚40mg/Kg8 23.63秋水仙素1.5mg/Kg8 25.38对苯二酚80mg/Kg8 29.75Student-Newman-Keulsa秋水仙素3mg/Kg8 33.63对苯二酚120mg/Kg8 34.75显著性 1.000 1.0001.000.339 .132 1.000 .330阴性对照 8 3.75氯化汞1mg/Kg8 15.00氯化汞2mg/kg8 18.50秋水仙素
33、1mg/Kg8 22.00氯化汞3mg/Kg8 22.13对苯二酚40mg/Kg8 23.6323.63秋水仙素1.5mg/Kg8 25.38对苯二酚80mg/Kg8 29.75秋水仙素3mg/Kg8 33.63对苯二酚120mg/Kg8 34.75Duncana显著性 1.000 1.0001.000.187 .132 1.000 .330将显示同类子集中的组均值。a. 将使用调和均值样本大小 = 8.000。结果分析：小鼠骨髓嗜多染红细胞呈蓝灰色，成熟红细胞呈橘红色。微核呈圆形及椭圆形，边缘光滑整齐，嗜碱性与核质一致，呈紫红色或蓝紫色。每只动物计数 1000 个嗜多染红细胞，观察含有微核的
34、嗜多染红细胞，一个嗜多染红细胞中出现两个或更多个微核仍然以一个细胞计数。正常小鼠嗜多染红细胞自发微核频率为 2.6%左右。阳性对照组小鼠（0.15mg/g体重腹腔注射环磷酰胺）微核频率为 30.4%左右。（2）小鼠骨髓细胞染色体标本制备与观察结果分析：在低倍镜下寻找背景清晰、分散良好、收缩长短适宜的中期分裂相，油镜下观察并计数。小鼠染色体 2n=40,均为端着丝粒。性染色体难以在镜下直接加以区分。3实验总结（1）诱变物质的微核试验总结：通过该实验了解了微核发生的机制，当染色体受到损伤以后，在有丝分裂中、后期细胞中观察到丧失着丝粒的染色单体或染色体断片，游离于子细胞质中形成次核。在间期细胞中，常常见到比普通细胞核小很多的一个或几个圆形结构，其直径大约相当于细胞直径的 1/20 至 1/5,故称微核。也掌握了微核实验的一般程序和实践意义，掌握了对实验动物进行药物处理的一般程序，掌握了进行实验设计的一般程序和规则，并锻炼实践能力。 （2）小鼠骨髓细胞染色体标本制备与观察实验总结：通过该实验学习并掌握了小鼠骨髓细胞染色体的制备方法。观察小鼠染色体的形态特征,统计细胞的染色体数目，知道小鼠染色体 2n=40，均为端着丝粒。3 教师评语及评分：签名： 年 月 日
