1、陈传红 制作 2007 / 5,第十二章 (1) 马铃薯的组织培养,陈传红 制作 2007 / 5,本章内容提要与要求: 掌握马铃薯的生物学习性 掌握马铃薯脱毒培养的大致过程 了解马铃薯脱毒苗的鉴定方法 熟悉微型薯的生产过程,陈传红 制作 2007 / 5,一、马铃薯生物学特性1、形态特性根：根系由出生根和匍匐根两部分组成。茎：地上部分茎和地下茎，地下茎分匍匐茎和块茎。叶：初生叶，全缘，心形；后期叶奇数、羽状全裂单叶花：单生，为聚伞花序果实：为球形或椭圆形浆果。种子：小，扁平肾形；可用来繁殖，但后代性状分离大。,陈传红 制作 2007 / 5,陈传红 制作 2007 / 5,2、 生物学习性
2、原产于拉丁美洲，为全球性的重要经济作物之一，适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输。 马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻，解除休眠的块茎4下发芽，发芽适温为1218。 块茎形成要求昼温1424，夜温1214，土温1618。 结薯期要求12h左右的短日照和疏松、湿润、肥沃以及通气良好的土壤条件。,陈传红 制作 2007 / 5,现象与问题： 马铃薯生产中普遍存在有种性退化问题，表现为植株长势衰弱，株形矮化，分枝变少，薯块变小，产量逐降低，造成品种退化。 经检测证明这是由于病毒引起的退化现象。 危害马铃薯的病毒有17种之多，如X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。 由于多年
3、的无性繁殖，病毒逐代积累，日益严重，引起严重退化。马铃薯病毒可使块茎产量减少50% 80%。,陈传红 制作 2007 / 5,解决办法：法国Morel和他的同事们，1955年从患病马铃薯植株中选取到了无病植株 马铃薯脱毒技术，为治疗作物病毒开辟了新途径。,陈传红 制作 2007 / 5,二、马铃薯脱毒技术 马铃薯在营养繁殖时易受病毒的浸染，当条件适合时，病毒就会在植株内增殖，转运和积累，随着世代传递，病毒危害逐年加重。 通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、PVG、PVM、PSW等病毒，得到一定良种繁殖体系，生产优质种薯，是保证马铃薯高产、稳产的一项有效措施
4、马铃薯脱毒技术。 我国已有许多科研、推广单位开展了研究生产，已形成了脱毒草种薯生产体系。,陈传红 制作 2007 / 5,1.马铃薯脱毒技术市场前景: 我国单产为13.60吨/公顷，是世界单产的1/4。最主要因素是种薯差，品种布局不合理。 全国现有播种面积300多万公顷，且有逐步增加趋势，年需合格种薯45亿公斤，脱毒原种4亿公斤，脱毒小薯或微型薯45亿粒。因此，脱毒马铃薯推广具有广阔的市场前景。 采用脱毒快繁技术，种用脱毒种薯，一般可增产30-50%，甚至成倍增产，提高马铃薯生产能力。如果我国现有马铃薯播种面积的1/3用脱毒种薯，就可年增产粮食100多亿公斤。,陈传红 制作 2007 / 5,
5、2.脱毒种薯生产程序： 采用微茎尖组织培养的方法，诱导出苗，采用联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定马铃薯病毒和类病毒，经鉴定后，无主要病毒及类病毒的试管苗可定为脱毒试管基础苗。, 试管苗采用固体、液体培养基相结合的方法，进行扩繁基础苗，在防虫网室栽植或封闭温室扦插，生产出原原种（或称脱毒小薯）。用原原种在一定隔离条件下产生原种1代，以后逐级称为原种2代、良种1代、良种2代。,陈传红 制作 2007 / 5,3茎尖培养脱毒,（1）初代培养 预处理：多采用在室内发芽，芽经热处理（38 ）2周。 表面消毒：取顶芽或侧芽茎尖（1cm） 自来水下冲洗 70的酒精浸润（15-20s）2次氯酸钠溶液浸泡（4
6、5min） 无菌水冲洗3次。,陈传红 制作 2007 / 5, 接种：把消毒好的芽放在解剖镜下仔细剥离，逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，可以留1-2个叶原基，0.20.3毫米，随即接种于培养基中。 培养基：MS NAA 0.1 GA3 0.2 BA 0.5 2%蔗糖 （液体，pH5.8）, 培养条件：2125、20003000lx、12h/d。 生长情况: 23周愈伤，4-5周绿点，36月长成23厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。,陈传红 制作 2007 / 5,（2）继代和生根 培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒）鉴定后（检测:1次/3月，4次/年）鉴定后，采用固体、液体培养基相
7、结合方法扩繁。 取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培养基上培养，长成510cm高，继续切段繁殖，每月可繁殖58倍；试管苗也可采用浅层静止液体培养。, 培养基：MS + NAA0.20.5 + D-泛酸钙10 + 3%蔗糖 培养条件：20-25度，3000-4000LX，14-16小时光照，每3周继代一次，单芽茎段约1厘米，可插也可平放，原则试管苗用2年3年。,陈传红 制作 2007 / 5,陈传红 制作 2007 / 5,(3) 驯化与移栽 为增强试管苗对温室内环境条件的适应能力，移植前对试管苗要进行光、温锻炼。 炼苗期温度：白天2327，夜间不低于14。 方法：移植前7d左右，将长有35片
8、叶、高23cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养室移至温室排好。 为防止强光、高温灼伤试管苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。,陈传红 制作 2007 / 5,4、微型薯生产 网室内，铺6厘米蛭石，3%撒可富稀释一倍，喷潮湿即可。插前浇水湿润，插后浇透。覆膜一周（但不要压紧），湿度80%以上，期间喷水2次。 揭膜后喷营养液撒可富3%，喷水冲洗（每周2次），每周喷一次0.5%硫酸铜（叶面），中后期喷药防病，防早疫、晚疫病，连续喷2-3-4次。喷辛硫磷防害虫。 苗高68厘米培蛭石防绿薯，1-2厘米厚，约35-40天出现气生薯，不断盖蛭石。,陈传红 制作 2007 / 5,微型薯,陈传红 制作 20
9、07 / 5,四、马铃薯无病毒苗的鉴定材料1、指示植物鉴定在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常用的方法，病毒、病毒和纺锤块状病毒很容易通过汁液来接种。 2、鉴定寄主的准备 马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫网室中培养。,陈传红 制作 2007 / 5,陈传红 制作 2007 / 5,五、无病毒株的繁殖通过茎尖培养只能得到很少的无病毒植株，而生产上需要数以万计的健康种薯。同时无病毒植株并没有对该病毒获得免疫能力，仍会在繁殖中再次侵染。如何防止病毒再侵染，有主要几种方法：,（） 直接块茎繁殖（） 扦插繁殖（） 组织培养切段繁殖A：继代培养B：低温保存,陈传红 制作 2007 / 5,复习思考题1、 对马铃薯脱毒苗的培养大致分几个阶段？各阶段是怎样操作的？2、 马铃薯的生物学习性有哪些？,
