1、尿理学及湿化学检验,医学检验系,尿液pH测定,原理 PH试纸是多种指示剂适当配合的试带，显色范围为棕红至深黑 器材 洁净试管或尿杯。 试剂 pH广泛试纸1套(包括试带和标准色板)。 标本 新鲜尿液。,操作,将手洗净擦干或配戴手套，取试纸1条，将其一端浸入尿液约0.5s取出自然光线下与标准色板比色读取尿液pH。,注意事项,1试带应密封、避光、干燥保存，远离酸性和碱性物质以防失效。 2在规定时间内比色，1min内。 3标本应新鲜，放置过久会因细菌繁殖或丧失挥发性酸而使pH增高。,尿比密测定（折射仪法）,目的 熟悉折射仪的工作原理、使用及校正方法。 原理 折射率与媒质的密度有关，密度越高，折射率越大
2、；其次也与光的波长及温度有关。经过大批量尿标本的研究，已经建立了折射率、比密和总固体量的经验公式，并将数字列成线图刻在目镜系列的适当位置中，测量时直接读数即可。,器材 临床折射计，尿杯、吸水纸、滴管、镊子。 标本 新鲜尿液。,操作,零点校准 每次测试前必须用纯净水进行零点校准：向标本室中加入足够的蒸馏水，轻微调节旋转螺丝使边界线重合在1.000刻线上。标本测定程序 拭干标本室和标本盖上的蒸馏水，在标本室内滴入足够的尿液，通过接目镜读取数值或查表得出结果。,注意事项,1用过的滤纸、棉球等应及时焚毁，以免污染环境。 2尿酸盐所致的浑浊可影响结果，需要加温溶解后再测定，切不可弃去。 3细胞等有形成分
3、增多时，应离心后测定上清液，测试完毕后用纯净蒸馏水擦拭干净。,尿蛋白测定（磺基水杨酸法）,目的 掌握尿蛋白定性的磺基水杨酸法原理及操作 原理 在酸性条件下，磺基水杨酸的磺酸根离子与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不容性的蛋白盐沉淀，沉淀的程度可反映蛋白质含量。,器材 小试管、滴管、吸管 试剂 200g/l磺基水杨酸溶液 标本 人工蛋白尿,操作,1加尿液 取小试管2支，各加清晰尿液lml。 2加试剂 于第1支试管内滴加磺基水杨酸溶液2滴，轻轻混匀；另1支试管不加试剂作空白对照，1min内观察结果。 3判断结果 按P70表2-2判断阳性程度及蛋白质的含量,注意事项,1该法灵敏，极轻微反应无意义。判断结
4、果应及时，否则会使阳性增高。 2尿液偏碱时(pH9)，磺基水杨酸法可呈假阴性；尿液偏酸(pH3)也会引起蛋白定性假阴性。应先将尿液PH值调到56。 3含碘造影剂、大剂量青霉素等也可使反应呈假阳性，但其反应与蛋白尿不同，应仔细观察并结合用药情况综合分析。 4尽量指导患者采集中段尿，或离心后测定。,原理：根据葡萄糖氧化酶法反应原理，葡萄糖氧化酶特异性氧化葡萄糖，生成葡萄糖醛酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，使指示剂氧化而呈现颜色变化。 标本：新鲜尿 器材：一次性尿杯、尿糖试纸,尿葡萄糖定性检查,（一）尿糖试纸法,操作,、将试纸的试垫区浸入样本中约秒钟，并将其取出 、让试纸的边缘沿着样本容
5、器口轻轻撩拭，以去除残余的尿液 、横握试纸，在秒内与瓶签上的比色图谱比较，记录结果。试纸与标准色版相同颜色即为尿样的尿糖值，如反应颜色在两个标准色版颜色之间，则该尿样的尿糖值也介于两者之间。,注意事项,、用清洁干燥的容器收集新鲜尿液并尽快检测，尿样在室温下的放置时间不可超过小时，否则应将尿样保存在冰箱中并在小时内检测，不要在尿样中加防腐剂，尿样不可离心，测试前要将尿样混匀。,注意事项,、温度越低，反应所需要的时间要相应延长 、尿糖浓度时通过试纸由蓝色棕色的颜色变化来指示，蓝色为无尿糖，棕色越深，尿糖越高。,（二）班氏法（讲解） 目的 掌握班氏法原理方法 原理 葡萄糖或其他还原性的糖的醛基在热硷
6、性溶液中，能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为黄色的氢氧化铜，进而形成红色氧化亚铜沉淀 器材 试管架、中试管、滴管、试管夹、酒精灯 试剂 班氏试剂,操作,1鉴定班氏试剂质量 取中号试管1支，加入班氏试剂2.0ml，摇动试管徐徐加热至沸腾，观察试剂有无颜色及性状变化，若试剂仍为透明蓝色，可进行以下实验。 2加尿液 向班氏试剂中加离心后的尿液0.2ml(约4滴)，混匀。 3加热煮沸 继续煮沸12min，或置沸水浴5min，自然冷却。 4判断结果,注意事项,1试剂与尿液的比例为10：1。2煮沸时应不时摇动试管以防爆沸喷出，也可在沸水浴中实验。3检验糖尿病患者尿液中葡萄糖，应空腹或餐后2h留取尿标本。,目的
7、 掌握改良Rothera法尿酮体定性的方法。原理 亚硝基铁氢化钠Na2Fe(CN)52H2O遇尿分解为Na4Fe(CN)6、NaNO2、Fe(OH)3和Fe(CN)53- 如尿中存在可检出量的酮体(丙酮、乙酰乙酸)，在碱性环境中即与试剂作用生成异硝基(HOON=)或异硝基胺(NH2OON=)，后者与Fe(CN)53-生成紫红色化合物。 器材 试管或载玻片、药匙、滴管。试剂 Rothera试剂。标本 新鲜尿液。,尿酮体测定（改良Fe(CN)53-法）,操作 1加入酮体粉 于载玻片上(或试管内)，加入1小勺酮体粉。 2加尿液 滴加尿液于酮体粉上，至完全将酮体粉浸湿。 3观察结果 观察酮体粉的颜色变化，5min内出现紫色者为阳性。 4判断结果 判断结果的标准见P76表2-5。,尿酮体测定（改良Fe(CN)53-法）,作业,1.列表比较湿化学法与试带法的不同 2.列表说明4个实验的影响因素,
