1、广东实验中学附属天河学校 高三生物欧阳主星 1 课本实验A 认识显微镜的结构,学会使用显微镜【比较归纳】一、光学显微镜的结构1、光学部分:目镜、镜筒、物镜、遮光器(有大小光圈) 、反光镜(平面镜和凹面镜)2、机械部分:镜座、倾斜关节、镜臂、载物台(上有通光孔、压片夹) 、镜头转换器、粗准焦螺旋、细准焦螺旋。二、显微镜的使用:置镜(装镜头)对光置片调焦观察收镜1、安放。显微镜放置在桌前略偏左,装好物镜和目镜2、对光。选低倍镜选较大的光圈选反光镜(左眼)转动转换器,使低倍镜对准通光孔,选取较大光圈对准通光孔。左眼注视目镜,同时把反光镜转向光源,直至视野光亮均匀适度。调节视野亮度只可用遮光器和反光镜
2、,光线过强,改用较小光圈或用平面反光镜;光线过弱,改用较大光圈或用凹面反光镜。3、低倍镜观察:侧面观察降镜筒左眼观察找物像细准焦螺旋调清晰(1)把所要观察的玻片标本放在载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。(2)转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(此时实验者的眼睛应当看物镜头与标本之间,以免物镜与标本相撞) 。(3)左眼看目镜内,同时反向缓缓转动粗准焦螺旋,使镜筒上升,直到看到物像为止,再稍稍转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。4、高倍镜观察:移装片转动镜头转换器调反光镜或光圈调细准焦螺旋(1)移动装片,在低倍镜下使需要放大观察的部分移动至视野中央。(2)转动
3、转换器,移走低倍物镜,换上高倍物镜。(3)缓缓调节细准焦螺旋,使物像清晰。(4)调节光圈和反光镜,使视野亮度适宜。注:换高倍物镜时只能移动转换器,换镜后,只准 调节细准焦和反光 镜(或光圈)。5、完毕工作。使用完毕后,取下装片,转动镜头转换器,逆时针旋出物镜,旋进镜头盒;取出目镜,插进镜头盒,盖上。把显微镜放正。三、显微镜操作细节说明1、呈像原理:倒立放大的虚像2、放大倍数目镜物镜3、镜头长度与放大倍数的关系物镜镜头长度与放大倍数成正比;目镜镜头长度与放大倍数成反比。目镜无旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越小;物镜有旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越大。4、视野大小与放大倍数成反比。 (视野:镜下指一
4、次所能观察到的被检标本的范围)放大倍数越小,视野范围越大,看到的细胞数目越多,工作距离越长;放大倍数越大,视野范围越小,看到的细胞数目越少,工作距离越短。5、视野中物像移动与标本移动的关系视野中某观察对象位于左前方如要移到中央,应将装片或切片向左前方移动。也就是同向移动。原因是视野中物像移动的方向与装片或切片移动的方向相反。广东实验中学附属天河学校 高三生物欧阳主星 2 6、镜像亮度镜像亮度是指视野里所看到的像的亮暗程度。它与放大倍数成反比,即在光源一定的情况下,放大倍数越大,视野越暗。在用高倍镜或物镜观察标本时,根椐实际情况可使凹面反光镜、大光圈来增强光源,以改善视野亮度而使物像明亮清晰。7
5、、显微镜使用时的异常现象与原因有气泡:制作装片不规范;材料厚薄不均匀;水太少同一视野一部分清晰另一部分不清晰:材料厚薄不均匀视野太亮:光线太强;光圈太小;反射太强8、污点判断:污点随载玻片的移动而移动,则位于载玻片上;污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜;换物镜后消失,则位于物镜;污点位于反光镜上,则不能在视野中看见,只能显示视野的明暗程度。【当堂训练】1、使用显微镜观察标本时,正确的操作顺序应是( )把装片放在载物台上,使标本位于低倍镜的正下方眼睛从侧面注视物镜,转动粗准焦螺旋使镜筒下降至离标本 0.5cm 处转动转换器,使低倍物镜对准通光孔调节反光镜,左眼注视目镜,使视野明亮用左眼
6、注视目镜,同时转动粗准焦螺旋使镜筒上升,直到看见物像;再用细准焦螺旋调节,使视野中的物像清晰转动转换器使高倍物镜对准通光孔转动细调节器,直到物像清晰将要观察的物像移动到视野中央A B C D2、生物学实验中常用普通光学显微镜,试回答:在光照明亮的实验室里,在显微镜视野中能清晰看到细胞壁,但看不清楚细胞是否发生质壁分离。为便于判明,此时应( )A改用凹面反光镜、放大光圈 B 改用凹面反光镜、缩小光圈C改用平面反光镜、放大光圈 D 改用平面反光镜、缩小光圈3、某学生用显微镜观察装片时,在低倍物镜下发现一异物,当移动装片时,异物不动,然后转换高倍物镜后,异物仍存在。则异物可能在( )A反光镜上 B物
7、镜上 C目镜上 D装片上4、用显微镜观察标本时,第一次使用的是 5目镜、10物镜,第二次使用的是 10、40物镜,那么第二次观察到的情况与第一次相比 ( )A细胞较小,细胞数目较多 B细胞较小,细胞数目较少 C细胞较大,细胞数目较多 D细胞较大,细胞数目较少5、下列关于高倍镜的使用的叙述中,正确的是( )A因为藓类的叶片大,在高倍镜下容易找到,所以可以直接使用高倍镜观察B在低倍镜下找到叶片细胞,即可换高倍镜观察C换用高倍物镜后,必须先用粗准焦螺旋调焦,再用细准焦螺旋调至物像最清晰D为了使高倍镜下的视野亮一些,可使用最大的光圈或凹面反光镜答案:1B 2D 3C 4D 5D广东实验中学附属天河学校
8、 高三生物欧阳主星 3 B 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二、实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。还原性糖 淀粉 蛋白质 脂肪试剂现象三、思考1为什么苹果或梨组织液必须临时制备?因苹果多酚氧化酶含量高,组织 液很易被氧化成褐色,将 产 生的颜色掩盖。2实验中应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂,为什么?斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的 Cu ( OH ) 2 在 7090下分解,常温下也可以被空气缓慢氧化变黑。3检测时为什么要先加双缩脲试
9、剂 A 液后加 B 液,而不能同时加入?先加 NaOH 溶液,为 Cu2+与蛋白 质反应提供一个碱性的环境。A、B 液同时加入,会 导致Cu2+变成 Cu ( OH ) 2 沉淀,而失效。4检测时向试管内加双缩脲试剂 B 液 4 滴,为什么 CuSO4 溶液不能多加?因为多加 CuSO4 溶液,Cu ( OH ) 2 的蓝色会遮盖反应的真实颜色。四、当堂训练1、下列实验中所用试剂错误的是( )A在观察植物细胞有丝分裂实验中,使用醋酸洋红溶液使染色体着色B在提取叶绿体色素实验中,使用丙酮提取色素C在 DNA 的粗提取与鉴定实验中,使用氯化钠溶液析出 DNAD在蛋白质的鉴定实验中,使用苏丹 染液鉴
10、定蛋白质2、生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中,以下操作错误的是( )A可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀B只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用3、下列关于实验的描述,正确的是( )A将在蔗糖溶液中已发生质壁分离的洋葱表皮细胞转到更高浓度的蔗糖溶液中,则发生质壁分离复原B将斐林试剂加入到蔗糖溶液中,加热后出现砖红色沉淀C将肝脏研磨液煮沸冷却后,加入到过氧化氢溶液中立即出现大量气泡D将双缩脲试剂加入到蛋清稀释液中,溶液变成紫色4、 (多选)在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实
11、验材料的选择叙述中,正确的是( )A甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多的糖且近于白色,因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定;B花生种子含脂肪多且子叶肥厚,是用于脂肪鉴定的理想材料;C大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料;D鸡蛋清含蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动物材料; 5、 (多选)下列物质鉴定的实验中,都不需要加热处理的是( )广东实验中学附属天河学校 高三生物欧阳主星 4 A斐林试剂鉴定还原糖 B二苯胺鉴定 DNA C苏丹鉴定脂肪 D双缩脲试剂鉴定蛋白质 答案:1D 2A 3D 4BCD 5CDC 用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动一、实验目的使用高倍镜观察叶绿体
12、的形态和分布,理解细胞质的流动是一种生命现象。二、实验原理叶绿体的辨认依据:叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据:线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。细胞质流动标志:叶绿体的运动三、实验材料观察叶绿体时选用:藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是:叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片,所以作为实验的首选材料。若用菠菜叶作实验材料,要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。观察细胞质的流动,理想的实验材料是黑藻。实验前,如果发现细胞质不流动,或者流动很慢,应立即采取措施,加速其细胞质的流动。方法有三种,可以任选一种:一是进行光照,即在阳光或
13、灯光下放置 1520 min;二是提高盛放黑藻的水温,可加入热水将水温调至 25 左右,再将黑藻放入其中培养;三是切伤一小部分叶片。四、讨论1、细胞质基质中的叶绿体,是不是静止不动的?为什么?不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运 动, 这 种运动能随时改变椭球体的方向,使叶绿体既能接受较多光照,又不至于被强光灼伤。2、叶绿体的形态和分布,与叶绿体的功能有什么关系?叶绿体的形态和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细 胞中的叶绿体比下面的多, 这 可以接受更多的光照。五、当堂训练1、小明用光学显微镜观察到了叶片细胞的细胞核和细胞壁。他
14、还可能看到的构造是( )A线粒体、高尔基体、核糖体 B叶绿体、线粒体、高尔基体C只有叶绿体 D上述细胞器均不能看到2、下图为显微镜下黑藻细胞的细胞质环流示意图,视野中的叶绿体位于液泡右方,细胞质环流的方向为逆时针,则实际上,黑藻细胞中叶绿体的位置和细胞质环流的方向分别为( )A叶绿体位于液泡的右方,细胞质环流的方向为顺时针B叶绿体位于液泡的左方,细胞质环流的方向为逆时针C叶绿体位于液泡的右方,细胞质环流的方向为逆时针D叶绿体位于液泡的左方,细胞质环流的方向为顺时针3、下列关于生物学实验的描述正确的是( )A观察叶绿体时,换用高倍镜后视野会变暗,这时应该使用较小光圈或换平面镜采光B观察洋葱根尖细
15、胞有丝分裂时,在高倍镜的视野中可以看到一个细胞从分裂前期到中期的变化叶绿体广东实验中学附属天河学校 高三生物欧阳主星 5 C观察低温诱导染色体数目的变化时,最好选择均处于分裂中期的正常细胞和变异细胞进行观察比较D取人口腔上皮细胞,用吡罗红或甲基绿染色并制成临时装片,在高倍镜下可观察到蓝绿色的线粒体答案:1C 2D 3CD 观察植物细胞的有丝分裂一、实验目的1制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片2观察植物细胞有丝分裂的过程,识别有丝分裂的不同时期,比较细胞周期不同时期的时间长短。3绘制植物细胞有丝分裂简图。二、实验原理1在高等植物体内,有丝分裂常见于根尖、芽尖等 细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的,因
16、此在同一 中可以看到处于不同分裂时期的细胞。2染色体容易被 (如龙胆紫溶液)着色,通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体(或染色质)的存在状态,就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期,进而认识有丝分裂的完整过程。三、实验材料、用具: 洋葱(可用葱、蒜代替) ;显微镜;龙胆紫溶液,盐酸等。四、实验步骤:根尖的培养装片的制作(解离漂洗染色制片)观察绘图五、思考1解离的目的是什么?解离后的细胞是否还活着?溶解细胞间质,使组织中的细 胞相互分离开来;细胞已被盐 酸杀死。2漂洗的目的是什么?洗去解离液,便于染色;也为解离液不 进一步破坏细胞结构。3制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么?(1)剪取洋
17、葱根尖材料时,应该 在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活 跃的时间;(2)解离时,要将根尖细胞杀死,细胞间质被溶解,使细胞容易分离;(3)压片时,用力的大小要适当,要使根尖被压平,细胞分散开。4如何比较细胞周期不同时期的时间长短?比较细胞周期不同时期的细胞数量, 细胞数量多的时期所 历时间长。六、当堂训练1、下列实验中所用试剂不正确的是( )A在观察植物细胞有丝分裂实验中,使用醋酸洋红溶液使染色体着色B在提取叶绿体色素实验中,使用无水乙醇提取色素C在用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体实验中,使用健那绿染液染色口腔上皮细胞D在探究植物细胞吸水和失水实验中,为观察液泡的变化,用龙胆紫对其进行染色。2、以下哪
18、一组实验材料必须自始至终保持在生活状态下( )观察植物细胞有丝分裂 观察植物细胞的质壁分离和复原 用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体 叶绿体中色素的提取和分离 探究酵母菌细胞呼吸的方式 A B C D3、 ( 多 选 ) 取 生 长 健 壮 的 小 麦 根 尖 , 经 过 解 离 、 漂 洗 、 染 色 、 制 片 过 程 , 制 成 临 时 装 片 , 放在 显 微 镜 下 观 察 。 欲 观 察 到 细 胞 有 丝 分 裂 的 前 、 中 、 后 、 末 几 个 时 期 , 下 列 说 法不正确的 是 ( )A应该选一个处于间期的细胞,持续观察它从间期到末期的全过程广东实验中学附属天河学校 高
19、三生物欧阳主星 6 B如果在低倍镜下看不到细胞,可改用高倍物镜继续观察C如果在一个视野中不能看全各个时期,可移动装片从周围细胞中寻找D如果视野过暗,可以转动细准焦螺旋增加视野的亮度答案:1D 2C 3ABDE 比较 H2O2酶和 Fe3+的催化效率(酶的高效性)一、实验原理鲜肝提取液中含有 H2O2 酶,H 2O2 酶和 Fe3+都能催化 H2O2 分解放出 O2。经计算,质量分数为 3.5%的 FeCl3 溶液和质量分数为 20%的肝脏研磨液相比,每滴 FeCl3 溶液中的Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中 H2O2 酶分子数的 25 万倍。二、方法步骤1取 4 支洁净试管,编号,分别加入
20、2mL H2O2 溶液2将 2 号试管放在 90左右的水浴中加热,观察气泡冒出情况,与 1 号对照3向 3 号、4 号试管内分别滴入 2 滴 FeCl3 溶液和 2 滴肝脏研磨液,观察气泡产生情况42-3min 后,将点燃的卫生香分别放入 3 号和 4 号试管内液面的上方,观察复燃情况三、思考1、向 3、4 号试管内分别滴入 FeCl3 溶液和肝脏研磨液时,为什么不可用同一支滴管?由于酶具有高效性,若滴入的 FeCl3 溶液中混有少量的 H2O2酶,会影响实验准确性。2、肝脏研磨液为什么必须是新鲜的?因为过氧化氢酶是蛋白质,放置 过久,可受 细菌作用而分解,使肝脏组织中酶分子数减少,活性降低。
21、3、肝脏为什么要制成研磨液?研磨可破坏肝细胞结构,使细 胞内的酶释放出来,增加 酶与底物的接触面 积。F 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用(酶的专一性)一、实验目的(1)初步学会探索酶催化特定化学反应的方法。(2)探索淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。二、实验原理淀粉和蔗糖都没有还原性,也就是都不能使斐林试剂还原,所以都不能与斐林试剂发生反应。唾液淀粉酶将淀粉水解成的麦芽糖则具有还原性,能够使斐林试剂还原,生成砖红色的沉淀。蔗糖水解产生的葡萄糖和果糖都具有还原性,但唾液淀粉酶不能将蔗糖水解。试验中可以用菊糖代替蔗糖。这是因为菊糖是由多个果糖分子缩合而成的,与淀粉同属于多糖,用菊糖与淀粉进行对比实验
22、,更具有说服力。三、实验材料、试剂与仪器质量分数分别为 3%的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液;质量分数为 2%的新鲜淀粉酶(化学试剂商店有售)溶液。斐林试剂(也可以用班氏试剂)试管、大烧杯、量筒、滴管、温度计、试管夹、三脚架、石棉网、酒精灯、火柴。广东实验中学附属天河学校 高三生物欧阳主星 7 四、实验方法与步骤(1)取两支洁净的试管,编上号,然后向 1 号注入 2mL 可溶性淀粉溶液和 2mL 新鲜淀粉酶溶液。向 2 号注入 2mL 蔗糖溶液和 2mL 新鲜淀粉酶溶液。(2)轻轻振荡这两支试管,使试管内的液体混合均匀,然后将试管的下半部浸到 60左右的热水中,保温 5min。(3)取出试管,各加入
23、 2mL 斐林试剂(边加入斐林试剂,边轻轻振荡这两支试管,以便使试管内的物质混合均匀) 。(4)将两支试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中,用酒精灯加热,煮沸并保持1min。(5)观察并记录两支试管内的变化。五、注意事项做好本实验的关键是蔗糖的纯度和新鲜程度。这是因为蔗糖是非还原性糖,如果其中混有少量的葡萄糖或果糖,或蔗糖放置久了受细菌作用部分分解成单糖,则与斐林试剂共热时能生成砖红色沉淀,使人产生错觉。为了确保实验的成功,实验之前应检验一下纯度。普通的细粒蔗糖往往是由于部分水解而具有一些还原糖。可用市售大块冰糖,水洗去其表面葡萄糖得到纯净的蔗糖。实验中要将试管的下半部浸到 37的温水中,因为淀
24、粉酶在适宜的温度条件下催化能力最强。在实验中,质量分数为 3%的蔗糖溶液要现配现用(以免被细菌污染变质) ,取唾液时一定要用清水漱口,以免食物残渣进入唾液中。制备的可溶性淀粉溶液,一定要完全冷却后才能使用,因为温度过高会使酶活性降低,甚至失去催化能力。实验中如果 2 号试管也产生了砖红色沉淀,可能的原因是:蔗糖溶液放置的时间过长,蔗糖被溶液中的微生物分解成还原性的糖,从而影响实验效果。这时应临时配制蔗糖溶液。另一个可能的原因是试管不干净,所以实验之前应将试管用清水再清洗一次,试管编号要醒目。实验步骤一定要按要求的程序进行,不可随意改变。如果实验中,自己的实验结果与结论上的预期结果不一致,应再设
25、计实验,进行进一步的验证或找出问题所在。G 温度对酶活性的影响(酶的催化需要适宜的条件)一、实验目的1探究不同温度对酶活性的影响; 2培养实验设计能力。二、实验原理1淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖,麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注:市售 -淀粉酶的最适温度约 60三、方法步骤1、取 3 支试管,编上号(A 、B、C) ,然后分别注入 2mL 可溶性淀粉溶液;2、另取 3 支试管,编上号(a、b、c) ,然后分别注入 1mL 新鲜淀粉酶溶液;3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成 3 组,分别放入热水(约 60) 、沸水和冰块中,维持各自的温度 5min;
26、4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度广东实验中学附属天河学校 高三生物欧阳主星 8 5min;5、在 3 支试管中各滴入 1-2 滴碘液,摇匀后观察这 3 支试管中溶液颜色变化并记录。四、思考1、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液,这是为什么?防止混合时,由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发 生变化,反 应温度不是操作者所要控制的温度,影响实验结 果。2、在试管 A、B、C 中分别能观察到什么现象?试管 A、B、C 的现象分别是:不变蓝、 变蓝、变蓝。3、通过上述实验,你能得出什么结论?温度会影响酶的活性。4、在上述实验中,自变量是什么?无关变量是什么?自
27、变量是不同的温度;无关变量是可溶性淀粉溶液、新 鲜淀粉 酶溶液、碘液的量。五、当堂训练1、 (多选)在证明酶的催化作用受温度影响的实验时,有学生取两支试管分别将淀粉溶液与唾液混合后,分别将试管放在冰水、沸水中 5min 后,待试管冷却后分别加入 3 滴碘液,结果两支试管都变蓝,证明酶的催化作用需要适宜的温度。此实验的不足之处是( )A酶与淀粉不能在设置各自温度之前接触 B缺少温度为 37的对照实验C这两支试管都不应变蓝 D不能用碘液检验是否存在淀粉2、比较 H2O2 酶和 Fe3+的催化效率实验中,滴入 H2O2 酶的试管内( ) A产生的气泡多,燃烧得不猛烈 B产生的气泡多,燃烧得猛烈C产生
28、的气泡少,燃烧得不猛烈 D产生的气泡少,燃烧得猛烈3、探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用的实验中,加入淀粉酶后一定要在 60的温度下保温 5min,原因是( )A试管温度太低,加入物质不溶解 B淀粉酶催化需适宜的温度C杀死试管内的微生物 D加速化学反应的进程4、在探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用的实验中,选择淀粉和蔗糖为实验药品,是因为淀粉和蔗糖都是 糖,加入斐林试剂不能生成 。它们在酶的催化作用下,都能水解成 糖,与斐林试剂反应,能生成 。用淀粉酶分别催化淀粉和蔗糖的水解反应,能被淀粉酶水解的是 ,不能被淀粉酶水解的是 ,可用斐林试剂辨别,从而也验证了酶的 特性。答案:1AB 2B 3B 4
29、非还原性 砖红色沉淀 还原性 砖红色沉淀 淀粉 蔗糖 专一性H 叶绿体中色素的提取和分离一、实验目的1尝试用 方法提取叶绿体中的色素和用 法分离提取到的色素。2分析实验结果,探究叶绿体中有几种色素,以及各自所呈现的颜色。二、实验原理1叶绿体中的色素是有机物,不溶于水,易溶于丙酮等有机溶剂中,所以用丙酮、乙醇等能提取色素。2层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液中的溶解度不同,分子量小的溶解度高,随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用层析法来分离四种色素。 (如右图)胡萝卜素(橙黄色)叶黄素(黄色)叶绿素 a(蓝绿色)叶绿素 b(黄绿色)广东实验中学附
30、属天河学校 高三生物欧阳主星 9 三、实验材料:幼嫩、鲜绿的菠菜叶四、实验步骤提取色素收集滤液制备滤纸条划滤液细线纸层析法分离色素观察实验结果五、实验讨论1 滤 纸 条 上 的 滤 液 细 线 , 为 什 么 不 能 触 及 层 析 液 ?滤 纸 条 上 的 滤 液 细 线 如 触 及 层 析 液 ,滤 纸 上 的 叶 绿 体 色 素 就 会 溶 解 在 层 析 液 中 ,实 验 就 会失 败 。2 提 取 和 分 离 叶 绿 体 色 素 的 关 键 是 什 么 ?提 取 叶 绿 体 色 素 的 关 键 是 :叶 片 要 新 鲜 、浓 绿 ;研 磨 要 迅 速 、充 分 ;滤 液 收 集 后
31、,要 及时 用 棉 塞 将 试 管 口 塞 紧 ,以 免 滤 液 挥 发 。分 离 叶 绿 体 色 素 的 关 键 是 :一 是 滤 液 细 线 要 细 且 直 ,而 且 要 重 复 划 几 次 ;二 是 层 析 液 不 能 没 及 滤 液 线 。3叶绿体色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。4为什么选用幼嫩、鲜绿的菠菜叶作为实验材料?细胞中富含有叶绿体、色素。5加 SiO2、加 CaCO3 的目的是什么?加 SiO2为了研磨得更充分;加 CaCO3 防 止 研 磨 时 叶 绿 素 受 到 破 坏 。6将 干 燥 的 滤 纸 的 一
32、 端 剪 去 二 个 角 的 目 的 是 什 么 ?因为物质在滤纸上扩散时,在 边缘的速度要比中间的速度快。剪去二个角可使层析液同时到达滤液细线,层析时,色素分离效果好。六 、 当 堂 训 练1、 叶绿体色素的纸层析结果显示叶绿素 b 位于层析滤纸的最下端,原因是( )A分子量最小 B分子量最大C在层祈液中的溶解度最小 D在层析液中的溶解度最大2、通过纸层析法分离叶绿体色素,结果在滤纸条上出现 4 条色素带,从上而下依次为( )A胡萝卜素、叶黄素、叶绿素 a、叶绿素 bB胡萝卜素、叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素C叶绿素 a、叶绿素 b、胡萝卜素、叶黄素D叶黄素、叶绿素 a、叶绿素 b、胡萝卜素
33、3、下列项目中,前项为实验试剂,中项为试剂的作用,后项为实验结果或实验目的,其中错误的一项是( )A 丙酮 溶解叶绿体中色素 提取色素B 二氧化硅 防止色素分解 研磨时避免色素被破坏C 醋酸洋红溶液 染色体着色 观察染色体D 斐林试剂 鉴定还原性糖 产生砖红色沉淀答案:1C 2A 3BI 观察植物细胞的质壁分离与复原一、实验目的1学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法;2了解植物细胞发生渗透作用的原理。二、实验原理1质壁分离的原理:当细胞液的浓度 外界溶液的浓度时,细胞就会通过 而失水,细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定广东实验中学附属天河学校 高三生物欧阳主
34、星 10 程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性 (大还是小) ,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁分离。2质壁分离复原的原理:当细胞液的浓度 外界溶液的浓度时,细胞就会通过 而吸水,外界溶液中的水分就通过 进入到细胞液中,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,紧贴细胞壁,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。三、实验材料紫色洋葱鳞片叶的外表皮,因为液泡呈紫色,易于观察(也可用水绵代替) 。0.3g/ml的蔗糖溶液(用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用) 。四、实验讨论1如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中,这些表皮细胞会出现什么现象?表皮细胞维持原状,因为细胞液的 浓度与
35、外界溶液浓度相等。2当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时,红细胞会不会发生质壁分离?为什么?不会。因为红细胞不具细胞壁。3为什么用蔗糖溶液做质壁分离剂?其浓度用 0.5g/ml 可以吗?为什么?因为其对细胞无毒害作用;不行,因 为如用浓度用 0.5g/ml 的蔗糖溶液,细胞会严重失水死亡,看不到质壁分离的复原。4原生质层与细胞壁之间的液体是什么?为什么?蔗糖溶液,因为细胞壁具有全透性。但注意,这是观察不到的,观察只能看到透明液体。5发生质壁分离的装片,不能久置,要马上滴加清水,使其复原。这是为什么?因为细胞失水过久,也会死亡。五、当堂训练1、将一植物细胞放入 KNO3 溶液中,一段时间后发生了
36、质壁分离,下列说法不正确的是( )A此细胞是活细胞 B原生质层具有选择透过性C发生质壁分离的细胞一段时间后可自动质壁分离复原D原生质层两侧溶液存在浓度差, KN03 溶液浓度低于细胞液浓度2、以紫色洋葱鳞茎表皮为材料观察植物细胞质壁分离现象,下列叙述错误的是( )A在发生质壁分离的细胞中能观察到紫色中央液泡逐渐缩小B滴加 30的蔗糖溶液比 10蔗糖溶液引起细胞质壁分离所需时间短C发生质壁分离的细胞放入清水中又复原,说明细胞保持活性D用高浓度的 NaCl 溶液代替蔗糖溶液不能引起细胞质壁分离3、 (多选)用一个紫色洋葱的鳞片叶可做下列哪些实验的材料? ( )A观察植物细胞减数分裂 B观察植物细胞
37、的质壁分离和复原C观察细胞中 DNA 和 RNA 的分布 D叶绿体中四种色素的提取和分离4、 (多选)将新鲜马铃薯切成 5cm 的长条(粗细相同) ,再将它们分别放在浓度不同的甘露醇溶液中,4h 后测量每条的长度,结果如图所示。以下有关分析正确的是( )A马铃薯细胞液的浓度约为 30gL-1B当溶液浓度为 40gL-1 时,细胞开始发生质壁分离C在溶液浓度为 30gL-190gL -1 的范围内,细胞壁也有一定程度的收缩D在溶液浓度为 20gL-1,细胞能发生质壁分离答案:1D 2D 3BC 4AC广东实验中学附属天河学校 高三生物欧阳主星 11 J 植物向性运动的实验设计和观察一、实验原理向
38、性运动是植物受 外界因素的刺激而引起的定向运动。它的运动方向随刺激的方向而定。在单侧光的刺激下,植物表现出 。在地心引力(重力)的影响下,植物的根表现出 。二、目的要求1初步学会设计植物向性运动实验的方法。2学会观察植物的向性运动。三、材料用具(向光性设计)植物幼苗,刚萌发并已长出幼根的蚕豆种子或玉米种子等。锡纸,滤纸,不透光的纸盒,培养皿,剪刀,台灯,胶布,橡皮泥,棉花,清水,琼脂 四、方法步骤(植物的向重力性实验设计方案示例 )1实验题目:植物的向重力性实验。2目的要求:了解植物根的生长具有向重力性的特点。3材料用具:刚萌发的玉米种子(胚根长至左右) 、培养皿、棉花、滤纸、胶布、橡皮泥、剪
39、刀。4实验假设:根的生长与地心引力有关。5实验预期:经过一定时间后,4 粒玉米种子的胚根都向下生长。6方法步骤:(1)取 4 粒同样大小已萌发并长出胚根的玉米粒,平放在一个培养皿中,使其胚根尖端部分朝向培养皿中央。各萌发的玉米粒分别位于罗盘的东、南、西、北位置。(2)将滤纸剪成培养皿大小,盖在玉米粒上,然后再盖上湿棉花,直到填满整个培养皿(3)盖上培养皿盖,边缘用胶布封口;竖起培养皿,用橡皮泥固定住。放入恒温箱中培养。7实验记录:列表记录这 4 粒玉米种子胚根的生长情况。8实验结果和结论:分析实验结果,得出结论。五、实验成功的关键及注意事项1用于向光性实验的单子叶植物幼苗,应是真叶未出胚芽鞘的
40、。用于实验的纸盒应保证不透光。人造光源与纸盒的距离不应太近,以免烤着纸盒,人造光源应与纸盒上的小孔高度相当。2向重力性运动实验装置的设计,应注意实验材料的可对照性(如不同萌发种子的幼根,可安排在不同方位)。3向光性实验中打开纸盒观察实验现象的时间应尽可能短,并保持透光孔的方向与前次一致。4向重力性实验中注意培养皿中玉米粒的位置必须保持不变,使最上面的玉米粒的胚根垂直向下,最下面玉米粒的胚根垂直向上,左右两个玉米粒的胚根处于水平位置。5对照的设置向光性:单侧光照射光线均匀照射;或者胚芽鞘完整去胚芽鞘尖端(或用锡箔小帽套住胚芽尖端)向重力性:根尖除去根尖完整;根尖垂直向下放置根尖在其他方位放置六、
41、当堂训练1、植物的向光性是由下列哪项引起的( )广东实验中学附属天河学校 高三生物欧阳主星 12 A单一光 B单侧光 C均匀光 D红光、蓝紫光 2、植物的向重力性运动是由哪种因素引起的( )A重力 B弹力 C水 D光3、向光性实验中在纸盒上打一个小孔的目的是( )A便于观察胚芽鞘生长 B通风C形成单侧光 D测量胚芽鞘的高度4、打开纸盒观察小麦幼苗的向光性运动时,应保持透光孔的方向与前次一致是为了( ) A保持单侧光 B便于观察胚芽鞘弯曲情况C便于测量胚芽鞘生长情况 D形成多方向光答案:1B 2A 4C 6A K 观察生长素或生长素类似物对植物生长发育的影响(示例)一、实验题目:2,4D 对菊花
42、花芽分化的影响。二、实验原理:2,4D 对菊花花芽分化有抑制作用(假设),能延迟菊花的开花时间(预期结果)。三、目的要求:学会设计实验的一般方法,学会观察、记录、分析实验现象的方法,从而得出适当的结论,巩固理论知识。四、实验器材:盆栽菊花(5 组,每组 2 盆3 盆)、2,4D 母液、小喷雾器、移液管、烧杯等。五、实验步骤(1)配制浓度分别为 5mg/L、1 mg/L、0.1 mg/L、0.01 mg/L 的 2,4D 溶液。(2)选取 5 组盆栽菊花(每组 2 盆3 盆)编号,放置在光照、通风、水分、温度等条件适宜的相同环境下管理。(3)分别用配制好的 4 种不同浓度的 2,4-溶液喷洒编号
43、 14 组菊花的植株(第 5 组作为对照组)六、实验记录:定期观察、测量、记录菊花的发育情况,填写下表 1 2 3 4 5使用 2,4D 溶液的浓度 5mg/L 1 mg/L 0.1 mg/L 0.01 mg/L 清水开始形成花蕾的时间开始开花的时间菊花盛开的时间其它(花蕾的大小、植株的高低等)七、实验结果(1)分析实验现象的可靠性(出现误差的原因)。(2)绘出浓度与时间的函数图表。(3)分析 2,4-浓度与花芽分化时间的关系,得出相应的结论,写出实验报告。L DNA 的粗提取与鉴定一、实验目的:初步掌握 DNA 的粗提取和鉴定的方法。二、实验原理1DNA 的提取: 广东实验中学附属天河学校
44、高三生物欧阳主星 13 2DNA 的提纯: 蛋白酶能水解蛋白质,但对 DNA 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 6080的高温,而 DNA 在 80以上才会变性。洗 涤剂能够瓦解细胞膜,但对 DNA 没有影响。3DNA 的鉴定: 三、实验材料:鸡血细胞液四、实验步骤:制备鸡血细胞液提取鸡血细胞的细胞核物质溶解细胞核内的 DNA析出含 DNA 的黏稠物滤取含 DNA 的黏稠物将 DNA 的黏稠物再溶解过滤含有 DNA 的氯化钠溶液提取含杂质较少的DNADNA 的鉴定五、DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度曲线(如右图)在 DNA 粗提取与鉴定的实验中,DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度,随着 N
45、aCl 的浓度的变化而改变的。当 NaCl 的物质的量浓度为 0.14mol/L 时,DNA 的溶解度最低;而当 NaCl 的浓度为 0.015mol/L 或 2mol/L 时,DNA 的溶解度最高。利用这一原理,选择适当浓度的 NaCl 溶液就能充分溶解 DNA 而使杂质沉淀,或析出 DNA 过滤去除溶液中的可溶性杂质。五、思考1生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,他们能否选用牛、羊、马血做实验材料?为什么?不能。因为哺乳动物成熟的红细 胞中无细胞核, 仅靠白细胞和淋巴 细胞中的少数 DNA,在实验中很难提取到。2为什么反复地溶解与析出 DNA,能够去除杂质?用高盐浓度的溶液溶解 D
46、NA,能除去在高 盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使 DNA 析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出 DNA。3为什么加入的酒精需要冷却的?可抑制核酸水解酶的活性,防止降解 DNA;降低分子的运动,易于形成沉淀析出;低温有利于增加 DNA 分子柔韧性,减少断裂。4为什么要设置对照组?实验中能观察到什么现象?确定二苯胺不与氯化钠发生颜色反应;实验组试管中可看到溶液变蓝色。六、注意:(1)科学性:即严密的理论依据,严格的操作过程、步骤。 (2)可行性:即切合自己实际,简单可行,效果明显。 (3)创新性:即突出自己的特点,有创新意识。1、下列不适宜作为 DNA 提取的实验材料是( )A鸡血细胞 B蛙的红细胞 C人的成熟红细胞 D菜花2、 (2007 江苏单科)在采用鸡血为材料对 DNA 进行粗提取的实验中,若需进一步提取杂质较少的 DNA,可以依据的原理是( )A在物质的量浓度为0 14 mol L 的氯化钠溶液中DNA 的溶解度最小BDNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会染成蓝色CDNA不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精D质量浓度为 01g