1、鸭大肠杆菌和葡萄球菌混合感染的诊治2005 年 10 月,山东省青州市弥河镇某养殖场饲养番鸭 8000 只,饲养至 35 日龄时,出现了以呼吸困难、并发出“吭哧” 、 “吭哧”的声音、眼睛流泪、排黄白色稀便、头部震颤、瘫痪为主要症状的传染病。日死亡率达 0.3。我公司技术服务人员遂从该养殖场带来 3 只病鸭,经我公司技术人员分离细菌和作药敏实验,很快控制了病情。现将情况总结如下:1 临床症状主要表现精神沉郁、呼吸困难、眼睛流泪且有分泌物、排黄白色稀便、头部震颤、腿瘫痪 等临床症状。2 剖检变化主要的病理变化为:心包炎、肝周炎、拨去肝脏上面的纤维蛋白膜可见肝脏肿大,肝脏边缘钝圆,肝脏呈紫红色且上
2、面有黄白色的坏死灶。脑膜呈树枝状充血。气囊混浊、肾肿大、脾肿大、肠道粘膜弥漫性充血和出血。气管粘膜潮红。2 细菌的分离和纯培养因怀疑有鸭疫里氏杆菌感染,故无菌操作取病鸭的脑组织后,划线接种于胰蛋白酶大豆琼脂平板上,置 37烛缸中培养。结果,12 小时后在胰蛋白酶大豆琼脂平板上长出乳白色、白色和金黄色三种菌落。三种菌落均呈圆形隆起、光滑、湿润、边缘整齐、直径 12mm。挑取三种典型菌落分别涂片、染色、镜检,乳白色菌落可见两端钝圆的革兰氏阴性杆菌,多单个,偶有成双;白色和金黄色菌落均可见革兰氏阳性、单个、成对、成串状葡萄样的球菌。挑取上述典型的乳白色的菌落划线接种于普通营养琼脂和麦糠凯琼脂平板上做
3、纯培养,于 37恒温箱中培养 12 小时,结果在普通营养琼脂平板上划线的地方长出乳白色的菌苔;在麦糠凯琼脂平板上划线的地方长出红色的菌苔。挑取典型的白色和金黄色的菌落分别划线接种于普通营养琼脂平板上做纯培养,于 37恒温箱中培养 12 小时,结果在普通营养琼脂平板上划线的地方分别长出白色和金黄色的菌苔。3 细菌的生化试验3.1 取乳白色菌落在普通营养琼脂平板上的纯培养物少许,穿刺接种于三糖铁斜面培养基,经 37培养24 小时,培养基斜面、试管底部均变黄色并产气。挑取上述纯培养物少许,分别接种于葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、棉子糖、木糖、甘露醇、甲基红试验、靛基质试验、枸橼酸盐试验、尿素酶试验、硫
4、化氢试验、V-P 试验生化反应和微量糖发酵管中进行细菌生化特性检查。结果该菌可发酵葡萄糖、麦芽糖、乳糖、木糖、甘露醇、产酸产气,不分解蔗糖和棉子糖,甲基红试验阳性,靛基质试验阳性、枸橼酸盐试验和尿素酶试验阴性,不产生硫化氢、V-P 试验阴性。这些符合大肠杆菌的生化特性。3.2 分别挑取白色和金黄色菌落在普通营养琼脂平板上的纯培养物少许,再分别接种于乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、甘露醇、硝酸盐还原试验、靛基质试验生化反应和微量糖发酵管中进行细菌生化特性检查。结果白色和金黄色菌落均能分解乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、且产酸而不产气。能分解甘露醇。还原硝酸盐试验阳性、不产生靛基质。这些符合金黄色葡萄球菌
5、株的生化特性。4 动物试验挑取上述两种细菌在普通营养琼脂平板上的纯培养物,分别接种于普通肉汤中,37培养 16 小时后,接种于 25 日龄的试验鸭(品种为番鸭)8 只,每只试验鸭接种两种普通肉汤培养物各 0.5ml,作为试验组。另取 8 只鸭接种不含菌的普通肉汤,作为对照组。试验组与对照组隔离饲养。结果试验组的鸭在接种细菌的普通肉汤培养物 18 小时后出现精神沉郁、缩颈、头部震颤、呼吸困难、排黄白色粪便等症状,出现症状后的第二天死亡 4 只,其余 4 只在第三天死亡。对照组全部健活。剖检死亡鸭所出现的病理变化和自然死亡鸭所出现的病理变化一致 。 无 菌 操 作 取 死 亡 鸭 的 脑 组 织
6、, 划 线 接 种 于 胰 蛋 白 酶 大 豆 琼 脂平 板 上 , 置 37烛缸中培养 12 小时后,长出的菌落特征和从自然发病的鸭的脑组织中分离出来的菌落特征相同。5 药敏实验5.1 药敏试纸:恩诺沙星、硫酸丁胺卡那霉素、盐酸左旋氧氟沙星、氟苯尼考、头孢曲松钠、硫酸庆大霉素、硫酸新霉素、硫酸粘杆菌素的药敏试纸自制。5.2 方法:分别吸取上述两种细菌的普通肉汤培养物适量,放入盛有少量灭菌水的试管中,搅匀,即成菌液,将两种菌液分别涂匀于普通营养琼脂平板上,贴上药敏试纸,于 37恒温培养箱中培养 14 小时后,观察结果。5.3 结果:5.3.1 大肠杆菌对硫酸庆大霉素、硫酸丁胺卡那霉素、头孢曲松
7、钠高敏,对盐酸左旋氧氟沙星、恩诺沙星、氟苯尼考、硫酸新霉素中敏,对硫酸粘杆菌素不敏感。5.3.2 葡萄球菌对硫酸庆大霉素、氟苯尼考高敏,对硫酸丁胺卡那霉素、盐酸左旋氧氟沙星、恩诺沙星、硫酸新霉素、头孢曲松钠中敏,对硫酸粘杆菌素不敏感。6 治疗根据药敏实验的结果,全群用肠杆速杀(通用名为硫酸庆大霉素可溶性粉,主要成分为硫酸庆大霉素,天津市天合力药物研发有限公司生产)按说明使用 3 天后,病情得到控制。7 小结7.1 葡萄球菌和大肠杆菌广泛分布于空气、饲料、垫料、饮水、地面和物体表面。人及畜禽的皮肤、粘膜、肠道、呼吸道也有寄生。饲养密度过大、拥挤,通风不良,禽舍空气污浊(氨气过浓) ,禽舍卫生太差,饲料单一、缺乏维生素和矿物质及存在疾病等因素,均可促进葡萄球菌和大肠杆菌的发生和增大死亡率。防制的原则首先应该改善饲养环境条件,加强饲养管理,改善通风条件,认真落实卫生防疫制度,做好常见病的预防工作,减少各种应激因素,防止空气及饮水的污染,定期对禽舍、养殖器具和周围环境进行消毒。7.2 药敏实验及治疗结果表明:硫酸庆大霉素对葡萄球菌和大肠杆菌高敏。但是,这两种细菌特别是大肠杆菌对抗菌药物很容易产生耐药性,故家禽发病后最好作细菌分离和药敏实验,才能及时诊治,最大限度地减少给养殖业带来的经济损失。