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实验七 探究影响酶活性的因素.doc

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1、1实验七 探究影响酶活性的因素一、实验目的:1探究不同温度和 PH 对酶活性的影响; 2培养实验设计能力。二、探究温度对酶活性的影响(一)实验原理:1淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖,麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注:市售 a-淀粉酶的最适温度约 600C(二)方法步骤:1、取 3 支试管,编上号(A、B、C),然后分别注入 2mL 可溶性淀粉溶液;2、另取 3 支试管,编上号(a、b、c),然后分别注入 1mL 新鲜淀粉酶溶液;3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成 3 组,分别放入热水(约 600C)、沸水和冰块中,维持各自的温度 5min;思考题 1

2、、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液,这是为什么?4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度 5min;5、在 3 支试管中各滴入 1-2 滴碘液,摇匀后观察这 3 支试管中溶液颜色变化并记录;思考题 2、在试管 A、B、C 中分别能观察到什么现象? 思考题 3、通过上述实验,你能得出什么结论? 思考题 4、在上述实验中,自变量是什么?无关变量是什么?三、探究 PH 值对酶活性的影响(一)实验原理:思考题 5、请依据下面所列实验操作步骤,写出该实验的实验原理。(二)操作步骤:用表格显示实验步骤:(注意操作顺序不能错)试管序号 加入试剂或处理方法1 2 31 注入新

3、鲜的淀粉酶溶液 1mL 1mL 1mL2 注入蒸馏水 1mL / /3 注入氢氧化钠溶液 / 1mL /4 注入盐酸 / / 1mL5 注入可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL6 600C 水浴保温 5min7 加入斐林试剂,边加边振荡 2mL 2mL 2mL8 水浴加热煮沸 1min9 观察 3 支试管中溶液颜色变化变记录思考题 6、请在上表中填入你所观察到的实验现象。思考题 7、通过上述实验,你能得出什么结论? 思考题 8、在上述实验中,自变量是什么?无关变量是什么? 思考题 9、探究温度对酶活性的影响实验中是否可以用斐林试剂来检验实验结果?为什么?2探究影响酶活性的因素四、与酶有关的曲

4、线解读(一)表示酶高效性的曲线:1、催化剂可 化学反应速率,与无机催化剂相比,酶的催化效率更 。2、酶只能 达到化学平衡所需时间,不改变化学反应的 。3、酶只能催化 的化学反应。(二)表示酶专一性的曲线:1、在 A 反应物中加入酶 A,反应速率较未加酶时明显 ,说明酶 A 催化底物 A 参加反应。2、在 A 反应物中加入酶B,反应速率和未加酶时 ,说明酶 B 不催化底物 A 参加反应。(三)影响酶活性的曲线:1、在一定温度范围内,随温度的升高,酶的催化作用 ,超过这一范围酶催化作用将 。2、在最适 pH 时,酶的催化作用最强,高于或低于最适 pH,酶的催化作用都将 。3、过酸、过碱、高温都会使

5、酶 ,而低温只是 酶的活性,酶分子结构未被破坏,温度升高可恢复活性。4、丙图说明反应溶液 pH 的变化不影响酶作用的最适 。(四)底物浓度和酶浓度对酶促反应的影响:1、在其他条件适宜、酶量一定的条件下,酶促反应速率随底物浓度增加而 ,但当底物达到一定浓度后,受 和酶活性限制,酶促反应速率不再增加(如右图甲)。2、在底物充足,其他条件适宜的条件下,酶促反应速率与酶浓度 (如右图乙)。附:比较过氧化氢酶和 Fe3+的催化效率一)实验原理:鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶和 Fe3+都能催化 H2O2 分解放出 O2。经计算,质量分数为 3.5%的 FeCl3 溶液和质量分数为 20%的肝脏研

6、磨液相比,每滴 FeCl3 溶液中的 Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的 25 万倍。二)方法步骤:步骤 注意问题 解释取 4 支洁净试管,编号,分别加入 2mL H2O2 溶液不让 H2O2接触皮肤H2O2 有一定的腐蚀性将 2 号试管放在 900C 左右的水浴中加热,观察气泡冒出情况,与 1 号对照向 3 号、4 号试管内分别滴入 2 滴 FeCl3 溶液和 2 滴肝脏研磨液,观察气泡产生情况不可用同一支滴管肝脏研磨液必须是新鲜的肝脏在制成研磨液由于酶具有高效性,若滴入的 FeCl3 溶液中混有少量的过氧化氢酶,会影响实验准确性因为过氧化氢酶是蛋白质,放置过久,可受细菌作

7、用而分解,使肝脏组织中酶分子数减少,活性降低研磨可破坏肝细胞结构,使细胞内的酶释放出来,增加酶与底物的接触面积2-3min 后,将点燃的卫生香分别放入 3 号和 4 号试管内放卫生香时,动作现象:3 号试管产生气泡多,冒泡时间短,卫生香猛烈复燃,4 号试管产生气泡少,冒泡时3液面的上方,观察复燃情况 要快,不要插到气泡中间长,卫生香几乎无变化避免卫生香因潮湿而熄灭探究影响酶活性的因素参考答案思考题:思考题 1、防止混合时,由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化,反应温度不是操作者所要控制的温度,影响实验结果。思考题 2、试管 A、B、C 的现象分别是:不变蓝、变蓝、变蓝。思考题 3、温度

8、会影响酶的活性。思考题 4、自变量是不同的温度;无关变量是可溶性淀粉溶液、新鲜淀粉酶溶液、碘液的量。思考题 5、淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖,麦芽糖和葡萄糖是还原性糖,遇斐林试剂煮沸的情况下会有砖红色沉淀。思考题 6、试管 1、2、3 的现象分别是:有砖红色沉淀,没有砖红色沉淀,没有砖红色沉淀思考题 7、溶液 PH 值会影响酶的活性。思考题 8、自变量是不同的 PH 值;无关变量是可溶性淀粉溶液、新鲜淀粉酶溶液、斐林试剂的量以及用于调节 PH 的蒸馏水、氢氧化钠溶液、盐酸的量。思考题 9、不能;因为如用斐林试剂来检验实验结果,需加热煮沸,会使低温试管中也出现砖红色沉淀,从而影响实验结果、结论。课堂练习:1、D;四、(一)1. 加快 高 2. 缩短 平衡点 3. 已存在 (二)加快 相同 (三)1.增强 减弱 2. 减弱 3. 失活 抑制 4. 温度 (四)1.加快 酶数量 2.成正比

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