1、平板凝集实验检测奶牛布病应注意的问题【发稿时间：2011-12-16 9:45:52】【作 者：昆明市动物卫生监督所】 【主 题 词：】【责任编辑：昆明市动物卫生监督所】【稿件来源：昆明市动物卫生监督所】【审核发布：昆明农业信息审核员（科技类） 】布病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患病，对其防治主要采取检疫净化的方式进行，经检疫为阳性的奶牛根据国家奶牛“ 两病” 防治规程，需进行无害化处理。昆明市每年进行奶牛结核病及布病的检疫净化工作，奶牛布病检疫的主要是先用平板凝集试验初筛，阳性可疑血清再进行试管凝集试验确认。平板凝集实验简单、快速，适用于大规模的筛查，但容易出现假阳性。本文结合工作实际谈谈平
2、板凝集实验应注意的几个问题供同行参考。1. 血清分离。血液采集后最好在4静置过夜，让血液自然凝固，再离心分离血清。如果静置时间不够，纤维蛋白可能没有及时网罗血细胞收缩下沉，一旦离心，纤维蛋白就会留在血清中，造成血清凝结成块。血液离心速度不可过高，在4000rpm 以内,高速离心，剪切力会激活血小板，会导致纤凝，同样也会造成血清凝结成块。而且速度过高，会挤压红细胞破裂导致溶血现象。另外高速离心后易产生微生物气溶胶，离心结束后不应马上打开离心机的顶盖，应放置1520min 后再取出血清。2. 检测时间。血液采集后离心分离的血清最好静置24h 后再检测。实验发现，血液采集后马上离心即进行检测，血清凝
3、集成块，这是由于血清里含有纤维蛋白，不利于操作。另外此时进行检测假阳性比例较高。因此，离心分离好的血清静置过夜后再进行平板凝集试验，提高检测的准确度。3. 血清平衡时间。在温度较高的夏天，为防止血液样本腐败，多把血液样本放于冰箱之中保存。试验用血清样本温度过低时进行平板凝集试验时，会产生假阴性。为防止假阴性，在冬春季时可以提前一天把血液样本放在室温下进行室温平衡；在天气比较炎热的夏天，血液样本在作凝集试验前从冰箱中拿出，在室温下放置30min 再进行检测。4. 平板凝集方式的不同。实验发现，凡是平板凝集试验实验中凝聚颗粒呈片状或絮状的，一般为假阳性；颗粒凝集均匀、规则、清澈的，一般为阳性。因此通过观察凝集方式的不同可以初步判断是否为阳性或者假阳性。5. 阳性结果需做进一步的实验室确证。大量的检测结果证实，平板凝集试验结果为阳性的血清，经试管凝集试验确证方法有5-8%是假阳性。因此平板凝集试验只能作为快速筛查，阳性血清还需经过进一步的实验室确证。
