1、1. 什么是细胞工程细胞工程按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。细胞工程所涉及的范围很广，按生物类型可以分为动物细胞工程、植物细胞工程和微生物细胞工程，按实验操作对象可以分为细胞与组织培养、动物融合、细胞核移植、染色体操作、转基因生物等。以细胞工程为基础，发展派生出了不少以工程冠名的新领域，如组织工程、胚胎工程、染色体工程等。2. 什么是消毒 disinfection是 指 杀 灭 或 去 除 外 环 境 中 媒 介 物 携 带 的 病 源 微 生 物 的 过 程 。3. 什 么 是 干 细 胞
2、 stem cell干 细 胞 是 指 具 有 自 我 更 新 和 分 化 潜 能 的 细 胞 。4. 什 么 是 细 胞 融 合 cell fusion又 称 细 胞 杂 交 ， 是 指 两 个 或 两 个 以 上 的 细 胞 融 合 形 成 一 个 细 胞 的 过 程 。5. 什 么 是 细 胞 培 养 cell culture 是 指 生 物 细 胞 在 离 体 条 件 下 的 生 长 和 增 殖 ， 细 胞 的 离 体 培 养 称 为 细 胞 培 养 。6. 基 因 治 疗 gene therapy 指 将 外 源 功 能 性 目 的 基 因 导 入 患 者 体 内 ， 通 过 调 控
3、 目 的 基 因 表 达 ， 抑 制 、 替代 或 补 偿 缺 陷 基 因 ， 从 而 恢 复 受 累 细 胞 、 组 织 或 器 官 的 生 理 功 能 ， 达 到 疾 病治 疗 目 的 。7. 转 基 因 动 物 transgenic animal 借 助 基 因 工 程 技 术 将 外 源 基 因 导 入 受 体 动 物 染 色 体 内 ， 外 源 基 因 与 动 物 基 因整 合 后 岁 细 胞 的 分 裂 而 扩 增 ， 在 体 内 表 达 并 能 稳 定 的 遗 传 给 后 代 的 动 物 。8. ES 细 胞 embryonic stem cell当 细 胞 团 的 细 胞 分
4、离 出 来 进 行 培 养 ， 在 一 定 条 件 下 这 些 细 胞 可 在 体 外 “无限 期 ”地 增 殖 传 代 ， 同 时 还 保 持 其 全 能 性 。 这 种 干 细 胞 称 为 胚 胎 干 细 胞 即ES 细 胞 。 他 是 一 种 高 度 未 分 化 细 胞 ， 具 有 发 育 的 全 能 性 ， 能 分 化 出 成 体 动 物的 所 有 组 织 和 器 官 ， 包 括 生 殖 细 胞 。9. 什 么 是 克 隆 clone克 隆 是 指 生 物 体 通 过 体 细 胞 进 行 的 无 性 繁 殖 ， 以 及 由 无 性 繁 殖 形 成 的 基 因 型 完 全相 同 的 后
5、代 个 体 组 成 的 种 群 。10.什 么 是 染 色 体 Chromosome染 色 体 是 细 胞 内 具 有 遗 传 性 质 的 物 体 ,易 被 碱 性 染 料 染 成 深 色 ,所 以 叫 染 色 体 (染 色质 ),其 本 质 是 脱 氧 核 甘 酸 . 11. 什 么 是 细 胞 污 染 cell contamination在 细 胞 培 养 中 ， 凡 是 与 培 养 无 关 的 杂 质 的 混 入 培 养 系 统 称 为 污 染二 、 简 答 题 1.重 组 DNA 技 术 的 一 般 步 骤（1）目的基因的获取 目前，获取目的基因的方法主要有三种：反向转录法、从细胞基因
6、组直接分离法和人工合成法。 （2）DNA 分子的体外重组 体外重组是把载体与目的基因进行连接。（3）DNA 重组体的导入 把目的基因装在载体上后，就需要把它引入到受体细胞中。导入的方式有多种，主要包括转化、转导、显微注射、微粒轰击和电击穿孔等方式。转化和转导主要适用于细菌一类的原核生物细胞和酵母这样的低等真核生物细胞，其他方式主要应用于高等动植物的细胞。 （4）受体细胞的筛选与鉴定 由于 DNA 重组体的转化成功率不是太高，因而，需要在众多的细胞中把成功转入 DNA 重组体的细胞挑选出来。应事先找到特定的标志，证明导入是否成功。（5）基因表达 目的基因在成功导入受体细胞后，它所携带的遗传信息必
7、须要通过合成新的蛋白质才能表现出来，从而改变受体细胞的遗传性状。目的基因在受体细胞中要表达，需要满足一些条件。2、 细 胞 融 合 一 般 采 用 哪 几 个 方 法 ， 一 般 经 历 哪 几 个 步 骤方法：诱导细胞融合的主要方法有：病毒诱导融合，化学融合剂诱导融合和电融合。1. 病毒诱导融合：病毒诱导细胞融合的过程有：首先是细胞表面吸附许多病毒粒子，接着细胞发生凝集，几分钟至几十分钟后，病毒粒子从细胞表面消失，而就在这个部位邻接的细胞的细胞膜融合，胞浆相互交流，最后形成融合细胞。2. 化学融合剂诱导融合：化学融合剂主要有高级脂肪酸衍生物、脂质体、钙离子、水溶性高分子化合物、水溶性蛋白质和
8、多肽，其中最常用的是聚已二醇（PEG） 。PEG 用于细胞融合至少有两方面的作用：可促使细胞凝结； 破坏互相接触处的细胞膜的磷脂双分子层，从而使相互接触的细胞膜之间发生融合，进而细胞质沟通，形成一个打的双核或多核融合细胞。3. 电融合：是指细胞在电场中极化成偶极子，并沿着电力线排列成串，然后用 高强度、短时程的电脉冲击穿细胞膜而导致细胞融合。步骤：以动物细胞为例（1）细胞准备。分贴壁和悬浮细胞两种。前者可直接将两亲本细胞混合培养，后者需制成一定浓度的细胞悬浮液。 （2）细胞融合，加促融因子于将行融合的细胞之中，诱导融合。 （3）杂种细胞选择。利用选择性培养基等，使亲本细胞死亡，而让杂种细胞存活
9、。 （4）杂种细胞克隆。对选出的杂种细胞进行克隆（选择与纯化） ，经过培养，就能获得所需要的无性繁殖诱导细胞融合的方法有三种：生物方法（病毒）、化学方法（聚乙二醇 PEG） 、物理方法（离心，震动，电刺激） 。3、 细 胞 生 长 的 测 定 方 法MTT 法又称 MTT 比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其原理为活细胞的线粒体脱氢酶能使将染料 MTT 还原为难溶性的蓝紫色结晶物，并沉积在细胞中，经酸性异丙醇溶解后呈现的色度可反映出生活细胞的代谢水平。而死细胞无此酶活性。需要注意的是，MTT 法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。微生物细胞数目的检测方法1总细胞计数法
10、 显微镜直接记数法和比浊法(1)血球计数板法 (2)涂片计数法 （3）比浊法。2活菌计数法（平板 菌落 记数法）：是通过测定样品在培养基上形成的菌落数来间接确定其活菌数的方法故又称平板计数法（1）涂布平板法（2 ）倒平板法3 滤膜过滤法：样品同过微孔滤膜后，细菌收集在滤膜上，然后将滤膜放在培养基中培养，通过菌落计数求出样品活菌落。 (2)微生物生长量和生理指标的测定方法测定微生物生长量及相关的生理指标，常用以下方法：1 湿重法 2干重法(3) 测定含氮量（2） 测定 DNA（3 ） 其他生理指标：如测定碳、磷、RNA、ATP 、 DAP(二氨基庚二酸)的含量等。 4、 细 胞 培 养 中 消
11、毒 的 原 则 是 什 么体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。1.培养前准备 根据实验要求，将所需器具和材料准备好，以合适的方法进行消毒和灭菌。2.操作室消毒 无菌培养室每天都要用 1的新洁尔灭拖洗地面次(拖布要专用).紫外线照射消毒 30-50min，超净工作台台面每次实验前要用 75酒精擦洗。然后紫外线淌毒 30min。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线，消毒时工作台面上用品不要过多或重叠放置，些操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用 75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。 3.洗手和着装 平时仅做观察不做培养操作时，可穿装细
12、胞培养室内紫外线照射30min 的清洁工作服。在利用超净台工作时，前臂要伸入箱内，应着长袖的清洁工作服，操作前要用 75酒精消毒手。出入培养室都要重新用消毒液洗手。进入原代培养室需彻底洗手还要戴口罩、着消毒衣帽。 4.无菌培养操作在无菌环境进行培养或做其它无菌工作时，首先要点燃酒精灯或煤气灯。以后一切操作都需在火焰近处并经过烧灼进行。金属器械不能在为焰中烧的时间过长，以防退火，烧过的金属镊要待冷却后才能挟取组织，以免造成组织损伤。吸取过营养液后的吸管不能再用火焰烧灼，再用时会把有害物带入营养液中。开启、关闭长有细胞的培养瓶时，火焰灭菌时间要短。防止因温度过高烧死细胞。另外胶塞过火焰时也不能时间
13、长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞。进行培养时，动作要准确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要用火焰烧灼消毒或取备品更换。原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧，酒精灯置于中央。组织或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，不要过早开瓶；吸取营养液、 PBS、细胞悬液及其它各种用液时，均应分别使用吸管，不能混用。工作中不能面向操作野讲话或咳嗽，以免唾沫把细菌或支原体带入工作台面发生污染。操作前用酒精擦拭超净台面及双手。三、问答题1、 二 级 生 物 安 全 主 要 处 理 哪 些 材 料 ， 具 体 要 求
14、是 哪 些材 料 ： 对 人 和 动 物 有 致 病 性 ， 但 对 实 验 人 员 、 动 物 和 环 境 不 会 造 成 严 重 危 害的 动 物 致 病 微 生 物 ， 具 有 有 效 的 预 防 和 治 疗 措 施 。要求：使用个体防护设备。当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置（护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备） 。在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出，更不能携带回家。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。当手可能接触感染
15、材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。实 验 室 设 计 和 建 造 的 特 殊 要 求 ：生 物 安 全 防 护 二 级 实 验 室 必 须 满 足 本 标 准 中 各 款 的 要 求 。 应设置实施各种消毒方法的设施，如高压灭菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理 。 应 设 置 洗 眼 装 置 。 实 验 室 门 宜 带 锁 、 可 自 动 关 闭 。 实 验 室 出口 应 有 发 光 指 示 标 志 。 实 验 室 宜 有 不 少 于 每 小 时 3 4 次 的
16、通 风 换 气次 数 。2、 原 生 质 体 分 离 有 何 优 缺 点机 械 分 离 法 优 点 ： 可 避 免 酶 制 剂 对 原 生 质 的 破 坏 作 用缺 点 ： 获 得 完 整 的 原 生 质 的 数 量 比 较 少酶 解 分 离 法 优 点 ： 可 以 用 于 几 乎 所 有 植 物 和 植 物 材 料 ， 以 获 得 大 量 的原 生 质 体缺 点 ： 这 些 酶 制 剂 常 污 染 有 核 酸 酶 、 蛋 白 酶 、 过 氧 化 物 酶 以及 酚 类 物 质 ， 会 影 响 到 原 生 质 体 的 活 力3 植 物 组 织 培 养 的 方 法 和 步 骤植 物 组 织 培 养
17、 是 在 含 有 营 养 物 质 及 植 物 生 长 物 质 的 培 养 基 中 ， 培 养 离 体植 物 组 织 ， 并 诱 导 使 其 长 成 完 整 植 株 的 技 术 。 离 体 培 养 的 细 胞 、 组 织 或 器 官发 育 形 成 完 整 植 株 是 通 过 体 细 胞 胚 胎 发 生 和 器 官 形 成 两 种 方 式 实 现 的 。 他 们均 受 植 物 激 素 和 加 到 培 养 基 中 的 其 他 因 子 控 制 。 利 用 植 物 组 织 培 养 技 术 可 以研 究 被 培 养 部 分 在 不 受 植 物 其 他 部 分 干 扰 下 的 生 长 和 分 化 规 律 ，
18、 并 且 可 以 用各 种 培 养 条 件 印 象 他 们 的 生 长 和 分 化 。培养 材 料 的 采 集要 根 据 培 养 目 的 适 当 选 取 材 料 ， 选 择 原 则 ： 易 于 诱 导 、 带 菌 少 。 要 选 取 植物 组 织 内 部 无 菌 的 材 料 。这 一 方 面 要 从 健 壮 的 植 株 上 取 材 料 ， 不 要 取 有 伤 口 的 或 有 病 虫 的 材 料 。 另 一方 面 要 在 晴 天 ， 最 好 是 中 午 或 下午取材料，决不要在雨天、阴天或露水未干时取材料。因为健壮的植株和晴天光合呼吸旺盛的组织，有自身消毒作用，这种组织一般是无菌的。培养材料的消
19、毒从外界或室内选取的植物材料，都不同程度地带有各种微生物。这些污染源一旦带人培养基，便会造成培养基污染。因此，植物材料必须经严格的表面灭菌处理，再经无菌操作手续接到培养基上。第一步，用自来水流水冲洗 5min，然后用中性洗衣粉液进行清洗，最后用自来水流水冲洗 30min，以备药剂灭菌。清洗过程勿伤实验材料。第二步 清洗药剂灭菌法适用于培养材料的表面消毒。药剂灭菌必须根据培养材料的特点，选择适合的药剂种类、浓度和消毒时间，原则上要求即达到灭菌能目的，又不能损伤植物组织和细胞。对一些具有特俗生物特性的植物材料需要特殊的处理。（一） 培养基的选择 、培养基的制备、培养基的灭菌（二）接种在无菌坏境下，
20、将切好的外植体立即接在培养基上，每瓶接种 12 个，以防止交叉污染（三）封口接种后，瓶、管用无菌药棉或盖封口，培养皿用无菌胶带封口。（四）温度培养基大多应保持在 25左右，但要因花卉种类及材料部位的不同而区别对待。增殖外植体的增殖是组培的关键阶段，在新梢等形成后为了扩大繁殖系数，需要继代培养。把材料分株或切段转入增殖培养基中，增殖培养基一般在分化培养基上加以改良，以利于增殖率的提高。增殖 1 个月左右后，可视情况进行再增殖。根的诱导 继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根，必须转到生根培养基上进行生根培养。1 个月后即可获得键壮根系。组培苗的炼苗移栽试管苗从无菌到光、温、湿稳定的环境进入自然环
21、境，必须进行炼苗。一般移植前，先将培养容器打开，于室内自然光照下放 3 天，然后取出小苗，用自来水把根系上的营养基冲洗干净，再栽 入 已 准 备 好 的 基 质 中 ， 基 质 使 用 前 最 好 消毒 。 移 栽 前 要 适 当 遮 荫 ， 加 强 水 分 管 理 ， 保 持 较 高 的 空 气 湿 度 （相对湿度98左右）， 但 基 质 不 宜 过 湿 ， 以 防 烂 苗 。4 鸡 胚 成 纤 维 组 织 为 例 ， 如 何 制 作 原 代 细 胞选 取 受 精 鲜 鸡 蛋 ， 置 孵 化 箱 或 温 箱 中 37 孵 育 ， 一 般 采 用 912d 的 鸡 胚 ，根 据 需 要 取 材
22、 后 进 行 组 织 细 胞 的 分 离 ， 再 进 行 单 层 细 胞 的 培 养 ， 建 立 原 代细 胞 系 。保 存 ： 用 冻 融 方 法 或 低 温 保 护 剂 来 保 存 细 胞 ， 常 用 35L 液 氮 罐 储 存 法 。复 苏 ： 一 般 以 很 快 的 速 度 升 温 ， 12min 内 回 复 到 常 温 ， 使 细 胞 迅 速 通过 最 易 受 损 的 -50 。4. 细 胞 系 和 细 胞 株 的 鉴 定 方 法 和 指 标1.鉴定指标1）纯度：分析以何种细胞为主，所占比例有多少，混杂有哪些其他细胞；2）细胞学特征：观察细胞的形态、结构、染色体组型、生长曲线、分裂指
23、数、倍增时间等是否与来源细胞一致；3）稳定性：观察细胞在传代过程中，细胞学特征在传代过程中是否发生变化；4）污染情况：检查是否有微生物和其他细胞系的污染；2. 鉴定方法1）.细胞形态学观察：光镜和电镜观察其形态特征；2).绘制生长曲线，计算分裂指数；3).染色体组型和带型分析；4).同工酶酶谱检测。6.奶 牛 场 能 做 到 性 别 控 制 吗 ， 如 果 能 ， 是 怎 么 控 制 的四 、 论 述 题1、 显 微 注 射 法 培 育 转 基 因 动 物答 ： 1） 目 的 基 因 的 制 备 与 纯 化 目 的 基 因 可 以 来 源 于 ： 1 通 过 限 制 性 内切 酶 预 先 分
24、离 的 某 一 基 因 ； 2 逆 转 录 法 得 到 的 cDNA； 3 人 工 合 成的 DNA 片 段 ； 4 聚 合 酶 链 式 反 应 （ PCR） 扩 增 的 特 定 基 因 片 段 。目 的 基 因 的 克 隆 可 以 通 过 载 体 方 式 进 行 ， 通 常 选 择 质 粒 作 为 载 体 。将 目 的 基 因 与 质 粒 结 合 形 成 重 组 子 ， 然 后 转 化 至 E.coli， 扩 增 质 粒 ，再 分 离 纯 化 重 组 质 粒 DNA， 用 适 当 的 限 制 性 内 切 酶 消 化 ， 制 成 线 状基 因 片 段 备 用 。 目 的 基 因 的 克 隆 也
25、 可 以 通 过 PCR 来 实 现 。2） 卵 供 体 母 鼠 和 假 孕 母 鼠 的 准 备 定 期 准 备 相 当 数 量 的 卵 供 体 母 鼠和 假 孕 母 鼠 以 及 一 批 相 对 稳 定 的 正 常 雄 鼠 和 结 扎 雄 鼠 。3） 超 排 卵 与 取 卵 选 择 46 周 龄 母 鼠 ， 注 射 孕 马 血 清 促 性 腺 激 素(PMSG)后 ， 隔 4248h 再 注 射 人 绒 毛 膜 促 性 腺 激 素 （ HCG） ， 注 射HCG 后 1013h 剖 腹 取 卵 ， 用 培 养 液 保 存 ， 置 CO2 培 养 箱 备 用 。4） 基 因 显 微 注 射 用
26、专 门 的 持 卵 管 和 注 射 针 在 显 微 注 射 仪 是 哪 个操 作 ， 将 纯 化 的 目 的 基 因 注 射 到 受 精 卵 的 雄 性 原 核 内 （ 雄 性 原 核 较雌 性 原 核 大 ） 。5)受 精 卵 移 植 转 基 因 受 精 卵 在 单 细 胞 至 桑 葚 胚 阶 段 移 植 到 受孕 后 0.5d 的 假 孕 母 鼠 的 输 卵 管 ， 在 囊 胚 期 则 移 植 到 受 孕 后 2.5d 的假 孕 母 鼠 子 宫 。 每 只 假 孕 母 鼠 移 植 2030 个 转 基 因 卵 为 宜 。6） 目 的 基 因 的 表 达 整 合 鉴 定 和 检 测 从 假
27、孕 母 鼠 产 下 的 幼 鼠 尾 尖提 取 DNA， 用 PCR、 FLSH 等 方 法 在 染 色 体 及 基 因 水 平 上 进 行 整 合鉴 定 ， 并 通 过 RNA 印 迹 和 蛋 白 质 印 迹 等 方 法 在 转 录 及 蛋 白 质 水 平上 进 行 表 达 检 测 。 经 检 测 获 得 阳 性 Founder 小 鼠 。7） 建 系 将 阳 性 Founder 小 鼠 与 同 一 品 系 的 正 常 小 鼠 交 配 ， 检测 F1 代 仔 鼠 的 阳 性 率 ， 当 繁 殖 到 阳 性 率 为 50 左 右 时 基 本 上 可 以判 断 外 源 目 的 基 因 为 单 一
28、位 点 的 整 合 。 经 扩 大 增 殖 ， 从 中 选 择 外 源目 的 基 因 表 达 效 果 好 ， 适 应 性 好 的 转 基 因 小 鼠 进 行 近 亲 繁 殖 。 然 后从 子 代 中 选 择 理 想 的 纯 合 子 个 体 进 行 全 同 胞 兄 妹 交 配 ， 建 立 遗 传 基因 小 鼠 近 交 系 。2、 绵 羊 乳 腺 生 物 反 应 器 制 备 方 法 、 优 势 、 存 在 问 题 。 P148答 :1、 表 达 载 体 的 构 建目 前 用 于 表 达 载 体 的 启 动 子 调 控 元 件 选 用 动 物 乳 蛋 白 基 因 启 动 子 元 件 ，主 要 有 四
29、 类 乳 腺 定 位 表 达 调 控 元 件 ； 第 一 类 是 B2 乳 球 蛋 白 （ BLG） ；第 二 类 是 酪 蛋 白 基 因 调 控 序 列 ； 第 三 类 是 乳 清 酸 蛋 白 （ WAP） 基 因调 控 序 列 ； 第 四 类 是 乳 清 白 蛋 白 基 因 调 控 序 列 。2、 目 的 基 因 的 选 择选 择 目 的 基 因 的 基 本 要 求 是 正 常 情 况 下 浓 度 低 、 翻 译 后 修 饰 复 杂 、 其他 表 达 体 系 难 以 表 达 或 表 达 量 低 、 应 用 前 景 广 阔 。3、 体 外 重 组选 择 好 目 的 基 因 和 启 动 子 调
30、 控 元 件 后 进 行 体 外 重 组 ， 构 建 融 合 基 因 。4、 基 因 转 导将 构 建 好 的 重 组 基 因 用 基 因 转 导 方 法 转 移 到 受 精 卵 。5、 胚 胎 移 植利 用 胚 胎 移 植 技 术 将 制 备 好 的 转 基 因 受 精 卵 植 入 代 孕 母 体 子 宫 内 ， 生产 转 基 因 动 物 ， 得 到 转 基 因 乳 腺 表 达 个 体 。 通 过 采 集 转 基 因 动 物 的 乳汁 来 获 得 目 的 基 因 表 达 产 物 。6、 鉴 定转 基 因 动 物 乳 腺 生 物 反 应 器 可 以 从 分 子 水 平 和 乳 腺 分 泌 物
31、两 个 方 面进 行 鉴 定 。1） DNA 水 平 上 的 测 定 可 以 用 PCR、 斑 点 杂 交 、 印 迹 分 析 等 方法 进 行 鉴 定 。 在 实 验 中 按 照 常 规 方 法 提 取 模 板 ， 根 据 启 动 子 调控 序 列 和 目 的 基 因 精 心 设 计 特 异 的 引 物 和 探 针 。2） 表 达 产 物 上 的 鉴 定 建 立 乳 腺 生 物 反 应 器 的 目 的 是 获 得 具 有生 物 活 性 的 蛋 白 ， 因 此 可 以 对 分 泌 的 蛋 白 进 行 检 测 。 检 测 方法 主 要 有 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 、 酶 联 免 疫 吸 附 实 验 、 免 疫 印迹 分 析 等 方 法 。优 点 ： 1、 产 品 质 量 稳 定2、 产 品 成 本 低3、 研 制 开 发 周 期 短4、 无 污 染5、 经 济 效 益 显 著缺 点 ： 1、 外 源 基 因 在 动 物 体 内 的 位 点 整 合 问 题2、 乳 蛋 白 基 因 表 达 组 织 特 异 性 问 题3、 目 的 蛋 白 的 翻 译 后 修 饰 问 题4、 转 基 因 表 达 产 物 的 分 离 和 纯 化 问 题5、 转 基 因 的 技 术 与 方 法 问 题6、 伦 理 道 德 问 题
