1、,3-2 月季的花药培养,植物的花药培养在育种上有什么意义？,花粉粒（1N）,单倍体植株（1N）,二倍体纯合子植株（2N）,意义： 明显缩短育种周期； 后代植株为纯合子。,花药离体培养,秋水仙素处理,一、基础知识,（一）被子植物的花粉发育,花丝,花药, 雄蕊,（囊状结构，内有很多花粉）, 花粉的概念:由_经过_形成的_倍体的_细胞。,花粉母细胞,减数分裂,生殖,单,（一）被子植物的花粉发育,花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期,生殖细胞将再进行一次有丝分裂，形成两个精子。,减数分裂,有丝分裂,习题巩固：关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（ ）A.花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的B.
2、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果C.被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段D.花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细胞中央,BD,实验操作,材料 选取,材料和 消毒,接种和 培养,二、实验操作,（一）材料的选取(影响花药培养的主要因素),答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。,1、从植株看：月季的初花期 从花蕾看：完全未开放的 从花粉看：单核期,为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？,如何确定花粉是否处于适宜的发育期？,答：通过镜检来确定花粉是否处于适宜的发育期。,方法一：醋酸洋红法(花粉细胞核被染成红色),方法二：焙花青-铬矾法 (花
3、粉细胞核被染成蓝黑色),为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？,答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。,为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？,讨论：,5、无菌水冲洗35次,1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒,2、无菌水清洗,3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分,4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中24分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）,（二）材料的消毒,要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成,立即将花药接种于培养基上，通常每瓶接种花药7-10个。,1、剥取花药,勿损伤花药，以免诱导出非花粉愈伤组织,2、接种,注意：
4、,（三）接种和培养,培养条件：温度25左右，不需要光照。 幼小植株形成后才需要光照。,3、培养,培养：花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。长出愈伤组织，则将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株；花药开裂释放出胚状体，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。,在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化,4、鉴定和筛选,月季花药培养时的花粉粒最好是（ ） A、四分体时期 B、二核或三核花粉粒 C、单核期,C,植物组织培养技术与花药培养技术的比较,1.离体培养的外植体为体细胞。2.有丝分裂的过程，染色体数量不变。,1.花粉是生殖细胞，得到的单倍体植株，弱小且高度不育。2.秋水仙素处理，染色体加倍，恢复正常的染色体数，为纯种。,移栽,在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似。,原因：培养基中的激素种类及浓度配比,体细胞胚（胚状体）：,产生花粉植株的两种途径,愈伤组织转接种到再生培养基,愈伤组织分化形成再生植株,水稻花药培养,愈伤组织发育途径,部分花药产生愈伤组织,接种在平板上的水稻花药,烟草花药培养,胚状体发育途径,部分花药通过胚状体途径形成小植株,
