1、pMD18-T Vector: 制品说明 pMD18-T Vector 是一种高效克隆 PCR 产物(TA Cloning)的专用载体。本载体由 pUC18 载体改建而成,在 pUC18 载体的多克隆位点处的 Xba I 和 Sal I 识别位点之间插入了 EcoR V 识别位点,用 EcoR V 进行酶切反应后,再在两侧的 3端添加“T”而成。因大部分耐热性 DNA 聚合酶进行 PCR 反应时都有在 PCR 产物的 3末端添加一个“A” 的特性,所以使用本制品可以大大提高 PCR 产物的连接、克隆效率。 由于本载体以 pUC18 载体为基础构建而成,所以它具有同 pUC18 载体相同的功能。
2、此外,本制品中的高效连接液 Solution I 可以在短时间内(约 30 分钟)完成连接反应,其连接液可以直接用于细菌转化,大大方便了实验操作。本制品中的 Control Insert(500 bp)还可以用于 Control 反应。 制品内容 pMD18-T Vector(50 ng/l) 20 l1 支 Control Insert( 50 ng/l) 10 l1 支 Solution I* 30 l5 支 * 使用时请于冰中融解。 保 存: -20 纯 度 Control Insert 经克隆后的白色菌落中,有 90%以上含有 Insert DNA 片段。 Control Insert 经克隆后,用双脱氧测序法确认多克隆酶切位点及 T 碱基的存在。 用 途 进行 TA 克隆,克隆 PCR 产物。 对克隆后的 PCR 产物使用 BcaBESTTM Sequencing Primers、M13 Primers 进行 DNA 测序。