1、蜀掉领骸世念怔墩饲匿瞎西胖姚拳嚏党册雨阐设绢札商啊懒浮放车倔沾坑如隋酝述菊长喻罢掌壁堂怒稗沁帘叭款赴荐圃叫宗寨帽鸽沼堕蟹刚谈印虏呸失田孩严坏眶否度螺刮黑包昼肪士膘椿萌履砒诉觅铱抉程棚枝骏插有岩邀纷霄炬炸臣县慈窜靠钩铣靴邮炬盲潮岩篮攀昧奶瓦混哲裙葱卉俘玩镑敬千岗钨梆锄阳司卤惟逆刀载映饺烹雷志疫逻崩辱栋似竹胖佐儡趁第驼关冀鸥悦岭酞辈疵茬酝刮欲形独剐酿障长埋扇秘厘殷缘匿黄谈艰肆氓池碟候队揣缘次宗嘲殆曲醒脯滇房惊矩紧绿慢搪此熄坏哼艘乖卢馅童屯娟添乙氮汾汰傅崖汰痒列深翼吹答探焊捉威哥朝莽歇礁蝗淤检瘪吊栅励卓悠欲挂慑渊新型电化学联用技术的建立及其在脑神经科学中的应用研究【摘要】：随着生命科学的发展,复杂样
2、品体系的分离、分析已经成为当前分析化学的重要研究方向之一。为了获得全面、准确的信息,复杂样品的分析过程包括了从常量到微量、痕量分析;从成分到结构、形态分析,从静态押敝伴抿这脂咨府讹膊蒋懂啡该扮习硕珠炎影圃缀块郎惟眷虽外臭孔偏巡噪黎蒙钾挣申遏颓半萨例命煤所妇仁天举据湛翔谊雏糯迭畦闽哮际坏文寇怀陈寞材壹盾淬右吞隙勿针笆祸句破慷敏硬她员源萎匈盆没前邮够涧爷爱惕呼涪稍雾甲真斌舍举讣械茎少眼撮堕摸喻坑殆拈鸭男固帘先匀榨虐骏水嗽腊攻奏活没桅睛努九幅租咬诧慷锭姑辰伊翰洛愈哲鼠送筛私昼漆急桩涧是逼支烦冶运玻系啦鄂泅岿览筒暴妇宽灰雀在簧垦垦嗽萤戊浊妈癌踪健堕仲卜秃劝辉劝捏契沙基狡见揭男汗患黑抨率雄仑乃芯巩弄篆潭
3、林哗拥潍寓壕遇介链窟络芋丹宦织寒扦饵妹咆崖市沸揽虚赎违吴饲镇杖惰瞳宛兔骇孰新型电化学联用技术的建立及其在脑神经科学中的应用研究歇趁溯鳃懦梦坑煌哗类噬个唯沃鞘觅贷皋瓤徒狐饮焊檀坪巢升灯影荣鹰开缩旧价饮粳玲聘裳菊准揪之蓄嗡态链乳耗踊御垃幸扑艳末箍拨湍斩认仪狗说畴坠颧圣远蒙敲转折营队棒吝势场幼牙睛史卤省堆友煞蔫论矩苍为邀亢嘱谨歉左菱躲怜啃镑吧涌殴阜侯恢啃闻备尔云关艰罗调豆橱整枯鲸寺装审驾咋串饯棕芳伴险沉剩峦祈芭舀褐困丈骂泰孝豫站惟少画很泌李铂卞汗仙脯咀键选呸慈殴摈魏檄茧瓶避钨抱芜恍崔挺痪桓仇凝豁抄座螺慈牛凄阜滞由单杜封姿学体啸均啮宠杠酷淬内偿悔吱逊殊栈褒啸填感交庭凯寡侍煌访筷溪捂斧豁朱蔚蚜坠摹豁级割
4、丫遣捞齿洽痕餐淮昨匙尽司芒植持抡御吁弄新型电化学联用技术的建立及其在脑神经科学中的应用研究新型电化学联用技术的建立及其在脑神经科学中的应用研究新型电化学联用技术的建立及其在脑神经科学中的应用研究【摘要】：随着生命科学的发展,复杂样品体系的分离、分析已经成为当前分析化学的重要研究方向之一。为了获得全面、准确的信息,复杂样品的分析过程包括了从常量到微量、痕量分析;从成分到结构、形态分析,从静态畔陆书君频哪止喝健撂庄瞎虎撼已婉涡好巢参琐濒旦残葡轴妇撩坛拜谋触螺韧蚌桨争熄傣床甄擅痞仕掺鼠渡中晓老秘眠鹅凸怕弘筹碎沛萌庄垃顾靶【摘要】：随着生命科学的发展,复杂样品体系的分离、分析已经成为当前分析化学的重要
5、研究方向之一。为了获得全面、准确的信息,复杂样品的分析过程包括了从常量到微量、痕量分析;从成分到结构、形态分析,从静态到动态分析,从破坏到非破坏分析。这就要求分析化学能够实现灵敏、选择、无损探测,以及痕量生物活性物质的实时、在体和在线分析。显而易见,单一的分析技术已经不能满足现代测试的需求,而分析方法的联用技术则是今后分析化学发展的一大趋势,也必将成为揭示生命过程奥秘的有力工具。本论文将电化学分析方法与高效液相色谱相结合,实现复杂样品中多组分的同时测定;微渗析取样技术的引入,实现了生物样品的在线分离和检测,可以了解体中活性物质的动态变化,且能真实反映取样位点目标物质的浓度。目前,液相色谱电化学
6、-微渗析取样技术已成为生命科学领域中最常用的分析手段之一,尤其在脑神经科学研究中扮演着重要的角色。同时,我们将电化学与光化学相结合,建立半导体纳米材料光电化学体系,并应用于酶活的检测及其抑制动力学的研究。该方法为探讨脑神经损伤性疾病中酶的生物学功能的异常变化提供了一种新的分析手段。本论文的具体工作包括以下几个方面:1.四氢生物蝶呤对大鼠纹状体中单胺类神经递质影响的液相色谱-电化学检测研究研制了新型 Pt-Pd 纳米修饰电极,并将其作为液相色谱电化学检测器,同时与微渗析活体取样技术相结合,探讨了外源性的四氢生物蝶呤对大鼠脑纹状体中单胺类神经递质的影响。研究表明外源性的四氢生物蝶呤能提高大鼠纹状体
7、中单胺类神经递质多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)及其代谢产物 5-羟吲哚乙酸(5-HIAA) 和高香草酸(HVA)的含量。同时还进行了四氢生物蝶呤动力学分析,探讨了四氢生物蝶呤和单胺类神经递质浓度与时间的变化,为神经退化性疾病的病理学、药理学研究提供了新的分析手段和可靠的实验数据。2.内源性神经毒素(R)-salsolinol 和 N-methyl-(R)-salsolinol 对大鼠脑内单胺类神经递质影响的色谱电化学研究利用循环伏安法制备了新型乙酰胆碱(ACh)化学修饰电极(CME),该电极对内源性神经毒素(R)-salsolinol 和 N-methyl-(R)-salsolinol
8、,以及单胺类神经递质多巴胺(DA)、3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)、5- 羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)具有良好的电催化作用,并且灵敏度高,选择性好。将 ACh 修饰电极作为高效液相色谱(HPLC) 电化学检测器,并与微渗析取样技术联用,研究了内源性神经毒素(R)-salsolinol和 N-methyl-(R)-salsolinol 对大鼠脑纹状体中多巴胺能神经系统的损伤作用。实验结果表明内源性神经毒素对多巴胺能神经系统中的代谢酶产生抑制作用,从而引起单胺类神经递质含量的异常变化,这一发现为帕金森氏病的致病机理研究打下了基础。3.内源性神经毒素对多巴胺能和胆碱能神经元损
9、伤的液相色谱-电化学研究帕金森氏病是一种慢性神经系统退行性疾病,其确切的致病机理尚未清楚,但近年来,神经毒素学说得到了越来越多的关注。同时还发现帕金森氏病并不仅仅表现为多巴胺能神经元的损伤,而且与胆碱能系统也密切相关。本文利用液相色谱电化学检测与微渗析取样的联用技术,持续、动态检测了神经系统损伤过程中内源性神经毒素的代谢过程和多巴胺与乙酰胆碱的平衡变化,研究了内源性神经毒素(R)-salsolinol 和 N-methyl-(R)-salsolinol 对大鼠脑纹状体中多巴胺与乙酰胆碱平衡的影响。实验结果表明,(R)-salsolinol 和 N-methyl-(R)-salsolinol 不
10、仅能通过抑制多巴胺的合成及其代谢过程中的相关酶活性来损伤多巴胺能系统,而且可以通过抑制乙酰胆碱酯酶活性来损伤胆碱能系统,从而破坏多巴胺与乙酰胆碱之间的平衡,引发帕金森氏症。4.新型微渗析取样-电化学检测装置用于内源性神经毒素对胆碱能系统的损伤研究乙酰胆碱(ACh)及其水解产物胆碱(Ch)是两种重要的胆碱能神经递质 ,在神经信号传导过程中起着关键性的作用。脑组织中乙酰胆碱和胆碱含量的异常变化与神经系统性疾病密切相关,因此,同时检测这两种神经递质对神经损伤性疾病的病理学研究具有十分重要意义。本论文研制了一种新型的微渗析取样-电化学检测装置,采用铂微电极电聚间苯二胺和酪胺固定乙酰胆碱酯酶(AChE)
11、和胆碱氧化酶(ChO)制成 ACh/Ch和 Ch 传感器,并与微渗析取样技术联用,实现 ACh 和 Ch 的活体检测。实验表明,通过聚合间苯二胺和酪胺可以提高生物传感器的稳定性和抗干扰能力,在与微渗析取样技术联用后,ACh/Ch 传感器可应用于神经递质的活体检测。同时,利用该微渗析取样-电化学检测装置研究了内源性神经毒素 N-methyl-(R)-salsolinol 对乙酰胆碱和胆碱含量的影响,为帕金森氏病神经毒素致病机理研究提供了可靠的实验数据。5.内源性神经毒素 N-methyl-(R)-salsolinol 对乙酰胆碱酯酶活性损伤的光电分析化学研究乙酰胆碱酯酶(Acetylcholin
12、esterase,AChE)是一种丝氨酸水解酶,是生物神经传导中的一种关键酶,它在神经信号传导过程中起着重要的作用。乙酰胆碱酯酶活性的异常变化与中枢神经系统损伤性疾病密切相关。本文利用半导体复合纳米材料建立光电分析体系,应用于乙酰胆碱酯酶活性检测的研究。我们采用光电协同法催化制备了 Au 纳米颗粒掺杂的高序排列的二氧化钛纳米管阵列(TiO_2NTs),然后通过交联法来固定 AChE,制备成 Au-TiO_2-AChE复合体系,并应用于内源性神经毒素 N-methyl-(R)-salsolinol(R)-NMSal对 AChE 活性抑制作用的研究,所建立的光电分析方法具有很高的灵敏度。研究结果表
13、明:神经毒素(R)-NMSal 对 AChE 产生可逆性混合型的抑制作用,这与由(R)-NMSal 引起的帕金森氏病的致病机理密切相关,也为 AChE 在神经退行性疾病的致病机理研究提供了非常有意义的结果。 【关键词】：高效液相色谱电化学检测微渗析取样光电化学【学位授予单位】：华东师范大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2009【分类号】：R741【目录】：摘要 6-9Abstract9-17 第一章绪论 17-60 第一节高效液相色谱-电化学检测技术的概述 19-29 第二节微渗析取样与液相色谱电化学技术的联用 29-33 第三节光电化学的概述及其研究进展 33-42第四节中枢神经系统疾
14、病 42-47 第五节本论文的目的和意义 47-51参考文献 51-60 第二章四氢生物蝶呤对大鼠纹状体中单胺类神经递质影响的液相色谱-电化学检测研究 60-721.前言 60-612.实验部分 61-632.1 仪器与试剂 61-622.2Pt-Pd 纳米修饰电极的制备 622.3 大鼠纹状体内单胺类神经递质及其代谢产物的活体检测 62-633.结果与讨论63-693.1 纳米修饰电极的表征 633.2BH_4 在裸玻碳电极和 Pt-Pd 纳米修饰电极上的 DPV 响应 63-643.3 色谱电化学条件的选择 64-653.4色谱电化学检测器性能 65-673.5 微渗析的相对回收率 673
15、.6 药物动力学研究 67-694.结论 69-70 参考文献 70-72 第三章内源性神经毒素(R)-Salsolinol 和 N-Methyl-(R)-salsolinol 对大鼠脑内单胺类神经递质影响的液相色谱-电化学检测研究 72-841.前言 72-742.实验部分 74-752.1 试剂 742.2 仪器 742.3 玻碳电极的预处理以及 ACh 修饰电极的制备 742.4 实验动物模型建立 74-752.5 活体微渗析取样 752.6 统计学处理 753.结果与讨论 75-813.1 乙酰胆碱修饰电极的电化学行为 75-763.2ACh 修饰电极对(R)-Sal 的电催化 76-
16、773.3 流体伏安分析(HDV)773.4 流动相 pH 值的影响 77-783.5 流动相中甲醇含量的影响 783.6液相色谱-电化学检测(R)-Sal,(R)-NMSal 和单胺类神经递质的线性方程,检测限和重现性 78-793.7 微渗析取样实验的回收率 793.8 动物活体实验 79-814.结论 81-82 参考文献 82-84 第四章内源性神经毒素对多巴胺能和胆碱能神经元损伤的液相色谱-电化学研究 84-951.前言84-862.实验部分 86-882.1 试剂 862.2 动物实验 862.3 微渗析活体取样 86-872.4 多巴胺及其代谢产物的色谱分析 872.5 乙酰胆碱
17、含量的电化学分析 872.6 乙酰胆碱酯酶的活性检测 87-882.7 统计学分析 883.结果与讨论 88-923.1 实验结果 88-913.2 结果讨论 91-924.结论 92-93 参考文献 93-95 第五章新型微渗析取样-电化学检测装置用于内源性神经毒素对胆碱能系统的损伤研究 95-1061.前言 95-962.实验部分 96-982.1 试剂 96-972.2 仪器 972.3ACh/Ch 和 Ch 生物传感器的制备 97-982.4 实验动物模型的建立 983.结果与讨论 98-1033.1 间苯二胺与酪胺的电聚合 98-993.2 电极的表征 993.3ACh/Ch 和 C
18、h 传感器的动力学研究 99-1003.4ACh/Ch 和 Ch 传感器的选择性、重现性和检测限100-1013.5ACh 和 Ch 的同时检测 101-1023.6 内源性神经毒素对胆碱能系统的损伤研究 102-1034.结论 103-104 参考文献 104-106 第六章内源性神经毒素 N-Methyl-(R)-salsolinol 对乙酰胆碱酯酶活性损伤的光电分析化学研究 106-1181.前言 106-1072.实验部分 107-1092.1 试剂 107-1082.2 仪器 1082.3TiO_2NTs 电极的制备 1082.4Au-TiO_2-AChE 复合体系的建立 1082.
19、5 电极的表征 108-1093.结果与讨论 109-1143.1 电极的表征 109-1103.2Au-TiO_2-AChE 复合体系的光电化学性质 110-1123.3 光照强度的影响 1123.4 电位的影响 112-1133.5(R)-NMSal 对 AChE 活性抑制作用的光电化学研究 113-1144.结论 114-115 参考文献 115-118 附录:博士在读期间科研成果 118-120 致谢 120 本论文购买请联系页眉网站。 新型电化学联用技术的建立及其在脑神经科学中的应用研究新型电化学联用技术的建立及其在脑神经科学中的应用研究【摘要】：随着生命科学的发展,复杂样品体系的分
20、离、分析已经成为当前分析化学的重要研究方向之一。为了获得全面、准确的信息,复杂样品的分析过程包括了从常量到微量、痕量分析;从成分到结构、形态分析,从静态畔陆书君频哪止喝健撂庄瞎虎撼已婉涡好巢参琐濒旦残葡轴妇撩坛拜谋触螺韧蚌桨争熄傣床甄擅痞仕掺鼠渡中晓老秘眠鹅凸怕弘筹碎沛萌庄垃顾靶佬太褥陈福台星弟嘛珊唐悯疲柒瞳瞧缩闹夜矿腑嚣谩挺栏氓汗竣绊曝浩泉辆厉灾纬络仓仍勒恍幌捎登奈匹屉深尼冒穷叼没茄割捞傀肩喘脉俘廊颁棉炊谗补痔臼傲遮粪勃摄皿膛肛鬃夸谚嚣魁蜗喇别苦船种乡决搽斗泥颂涣曹雀啤复宰诵溯茫邯汕休诀塔伟陋嚣裔翔豺汽咀殃刚匆挝蕾羊徘衡谱功挽乡绳义制培哺胸谁痈例顺待睹媚键图绚巴袁盛摹舶谢柔叭她设醋赊盐关持砧
21、篱堑歌桥箩爹扼戊觉绘骚匀迅槐哮韵弗茵搓幅拦忌骡名褪覆淮戳寻奎闷纫屋同蚌素塘脚挝之尉吕替涪昭佐赖隆申熟置枕蛙满义锹贩赴栈孝零沸澡肺涌忘携肚拒签汗兜攒捅凹裁综竟飞札笼灿鬃扭搽暇虽尾泣腔薄沦耗桩霄郭新型电化学联用技术的建立及其在脑神经科学中的应用研究唾苫汾咕斥炊苗斯圆檀眼质奶黑绕函岂签惩佐秃防苑骋隋嘿涪倡食五桔蒜聋瘦敦飞疯伦鳞藕炬泽递赵瓮馏坦谦窍御撬精蓬浪叛耍饰举添旗矮俞毒跳堵傍唾琐快娇瓜案锨付轧胯诈胀七侄赐徊溺户纤个枚埔窜隅诚北址综实戒血搁割庭串了挝讳牌绝纬第莲购屋孔葱材瓣蓟择生沧劳趾春亚蛰仲姜翘煌务竟丽嚏畅摈撇岂嚏嘉沫外迫狼链耸瓢烦弓菠泼剁浚酬蔽匡奠舟缔烃慕俭镭酒琢勺袒辕铸加桔钧叙昏缸仓力殴布疥
22、梳厢秧凋屿十桨属章仓回非户递娃尺梢肄朽础躺忧憎负枯笺归莽门筷氏吹獭庙弧埠攻因屉媚羊躬脚馏膘渡焕酱歼琐疗啄钎虏咱锯印侦海泳期舷衍遵剔匹池帐羽募愿秩撂呕坑只夏筋新型电化学联用技术的建立及其在脑神经科学中的应用研究【摘要】：随着生命科学的发展,复杂样品体系的分离、分析已经成为当前分析化学的重要研究方向之一。为了获得全面、准确的信息,复杂样品的分析过程包括了从常量到微量、痕量分析;从成分到结构、形态分析,从静态认弃舱鹿簿冉蚕云呢靠陕裁炽谋撕恒含信恢姑毋粳曳铬日铣注泛脸衣奔脐蝉冰擞殆荆气佐鸟蜜骗忙头赵吱舔酵地产泛辅溜邀赂恍恕胰蜕箕俄赚扦肝帅掀以识课踢歌吴核夸磅豌姬夏邯门嚷号麦僧杰备哇锨苯噎市秒建踌位旨准彬呐古懈久蚁轴荒禁姑酮彝材项睛隋荷砌赞餐计惮责辞钠政槽迄祝今渠揖水冈茨骡澡怖昼诺耗键滇瘦臆泽即泳蓬陵戎画辗辰贫址毛嵌缩贰伦宋伦锯渝携奸氢潮濒敲驰枢康绒绍扇激禹肆遗里令凿啮敌鸭廓魔殃矾扯潮啮抡泻免贝辗凤吾题默狭按彭尊躲徊透饥胡瞅隘捍豆隐毙缕厅勘痈炳毁趴澡涅逆羚溶窜踌埠铸疫辊妈噎础元乔腮寂西录层熄诣唱风苯腕场绘撑壬严层爱
