尿液干化学分析仪.doc

1、实验七 尿液干化学分析仪Urinary Chemical Analyzer实验原理1仪器工作原理 多联试带模块与尿样中相应成分发生特异性呈色反应，颜色深浅与相应物质浓度成正比。光源扫描各模块产生的反射光，经球面积分仪的滤光片得到单色光，照射光电二极管转化为电信号。微处理系统结合参考系统将电信号校正为测定值，以定性或半定量方式打印出结果。2试带基本结构 如图 5-3，碘酸盐层可破坏尿中维生素 C 等还原性物质，消除干扰；无此层的试带含一个检测维生素 C 的模块， 以 便 进 行 有 关 项 目 的校 正 。塑料底层吸水层试剂层 碘酸盐层尼龙膜图 5-3 尿液干化学分析仪试剂块组成示意图3试带模块

2、反应原理 各模块反应的原理、参考范围、常见干扰项目等见表 5-10。表 5-10 尿液干化学分析仪检查项目、原理、参考范围及主要干扰因素干扰因素检测项目 反应原理 灵敏度 参考范围假阳性 假阴性酸碱度 (pH)酸碱指示剂法 4.59.0 57 标本久置后，细菌繁殖或 CO2 丢失，pH 试带浸尿时间过长，pH 蛋白(PRO)pH 指示剂蛋白质误差法对白蛋白敏感(70100mg/L)，对球蛋白、粘蛋白、本周蛋白敏感性差阴性 pH8，奎宁、磺胺嘧啶、聚乙烯吡咯酮等药物，季铵类消毒剂pH3，高浓度青霉素，高盐，球蛋白、本周蛋白等非电解质蛋白葡萄糖 (GLU)葡萄糖氧化酶法250mg/L 阴性 过氧化

3、物、强氧化剂污染高 VitC、乙酰乙酸，L- 多巴代谢物，高比密低 pH尿酮体(KET)亚硝基铁氰化钠法乙酰乙酸: 50 100mg/L；丙酮: 400700mg/L；与-羟丁酸不反应阴性 苯丙酮、L-多巴代谢物、酮体以 -羟丁酸为主，陈旧尿隐血(BLD)过氧化物酶法 Hb0.30.5mg/L；RBC10/l阴性 肌红蛋白、易 热 性触酶、氧化剂和菌尿 VitC、蛋白尿、糖尿胆红素 (BIL)偶氮法 5mg/L 阴性 吩噻嗪类药物 VitC、亚硝酸盐、光照尿胆原(UBG)偶氮法或Ehrich 反应10mg/L 阴性或弱阳性吩噻嗪类药物、胆色素原、胆红素、吲哚亚硝酸盐、光照、重氮药物亚硝酸盐(N

4、IT)偶氮法 0.50.6mg/L 阴性 陈旧尿、亚硝酸盐或偶氮试剂污染、食物硝酸盐含量丰富pH5、尿量过多、食物硝酸盐含量过低、尿在膀胱内停留4h、非含硝酸盐还原酶细菌感染、VitC、亚硝酸盐白细胞(LEU/WBC)中性粒细胞酯酶法25/l 阴性 甲醛、氧化剂、胆红素、呋喃类药以淋巴或单核细胞为主、蛋白、庆大霉素比密(SG)多聚电解质中H+解离量与离子浓度相关1.0101.030 1.0151.025电解质性尿蛋白致SG碱性尿致 SG维生素 C(VitC)酸性环境中还原染料50 mg/L 阴性 巯基化合物、胱氨酸、内源性酚碱性尿仪器组成1机械系统 将试带传送至预定检测区，检测完成后送到废物盒

5、。2光学系统 光线照射到试带表面产生反射光，反射光强度与反应颜色成正比。不同强度的反射光经光电转换为电信号进行处理。（1）光源：提供特定波长的光源如发光二极管(1ight emitting diode，LED)。（2）单色装置：球面积分仪使模块表面的反射光转变成单色光。（3）光电检测器：将反射光信号转换为电信号，如电荷耦合器件（charge coupled device, CCD）。3电路系统 将电信号放大，经模/数转换后送微处理器（ computer unit, CPU）处理，计算最终检测结果。然后将结果输出到屏幕显示并打印。4微处理器 除了与参照系统比较，处理和校正检测信号外，还控制整个仪

6、器运作。尿干化学分析仪结构见图 5-4。光源 检测器 光电转换器 微处理器打印输出模块扫描结构（可移动）试带进样结构尿多联试带（位置固定）图 5-4 尿干化学分析仪结构示意图试剂器材1试剂 人工尿质控液低浓度和高浓度各 l 份。2器材 尿液干化学分析仪、尿干化学试带。操作步骤1开机 打开电源开关，等待仪器自检完成后，进入主菜单。2检测质控试带 将质控试带置于检测槽内，启动仪器运行键，自动检测。待仪器打印出质控结果，显示“正常”后，取回质控带保存。3浸渍试带 将试带完全浸入尿样中 12s，取出，吸干试带多余的尿样。4标本检测 同步骤 2，直到仪器自行打印报告或将数据输出。性能评价目 前 各 医

7、院 使 用 的 尿 液 分 析 仪 的 厂 家 、 种 类 不 一 ， 型 号 各 异 ， 但 其 性能 评 价 及 仪 器 的 校 正 均 应 包 括 以 下 5 个方面。1校正仪器（ 1） 按 仪 器 制 造 商 规 定 的 要 求 ， 调 正 仪 器 使 其 处 于 最 佳 工 作 状 态 ， 包 括仪 器 安 装 的 位 置 、 工 作 室 温 度 和 湿 度 、 检 测 速 度 、 打 印 显 示 功 能 是 否 在 规 定 范围 之 内 。 避 免 阳 光 等 其他光源的直接照射、外源性振动、外源性电源干扰等。（ 2） 检 查 仪 器 检 测 系 统 ： 用 标 准 试 带 校 正

8、 条 对 仪 器 进 行 检 测 ， 观 察 其 是否 在 规 定 的 范围内。2 检查仪器和多联试带的准确性 按仪器规定的测定范围配制一定浓度的标准物， 在严格操作的前提下，每份标准物重复检测 3 次，观察其符合程度。3 检 查 仪 器 和 多 联 试 带 的 精 确 性 取 人 工 尿 质 控 液 （ 低 浓 度 和 高 浓 度各 1 份 ） 和 自 然 尿 标 本 （ 正 常 尿 和 异 常 尿 各 1 份 ） ， 连 续 检 测 20 次 ， 观 察每 份 标 本 每 次 检 测 是 否 在 靶值允许的范围内（一般每次检测最多相差一个定性等级）。4 评 价 敏 感 性 （ S） 和 特

9、 异 性 （ Sp） 将 尿 液 干 化 学 分 析 仪 和 传 统显 微 镜 及 尿 液 理化检查结果进行对比，以传统法为基准，计算仪器检测的 S和 Sp。 假 阳 性 数真 阳 性 数真 阳 性 数S真 阴 性 数 假 阴 性 数真 阴 性 数Sp5 建 立 仪 器 检 测 参 数 的 参 考 范 围 以 传 统 法 为 基 准 ， 结 合 多 联 试 带 检 测范 围 ， 建 立符合本实验室尿分析仪的参考范围。质量控制尿 液 干 化 学 分 析 存 在 的 局 限 性 和 影 响 因 素 较 多 ， 容 易 产 生 假 阳 性 或 假 阴性 。 因 此 ， 必 须 十 分 重 视 尿 干

10、 化 学 分 析 仪 和 多 联 试 带 质 量 控 制 。 使 用 尿 干 化学 分 析 仪 应 以 传 统 法 为 基 准 ， 结 合 多 联 试 带 检 测 范 围 ， 建 立 符 合 本 实 验 室尿 液 分 析 仪 的 参 考 范 围 。 其 质 量 控 制 的 主 要 环 节 如下：1分析前的质量控制（ 1） 尿 样收 集 ： 告知病人正确留取尿样的方法。根 据 检 测 内 容 留 取 适 当的 标 本 ， 防 止 非 尿 液 成 分 （ 如 阴 道 分 泌 物 等 ） 混 入 。 要 使 用 1 次 性 尿 杯 ，有 明 显 的 标 签 ， 含 患 者 姓 名 、 病 历 号 、

11、 收 集 时 间 和 检 验 项 目 等 。（2）了解患者可能影响尿化学检测的进食及使用药物的情况。（ 3） 尿 样 保 存 ： 尿 样 收 集 后 应 在 2h 之 内 完成检测，否则选用适当的防腐剂并冷藏保存。注意准确有效地标记尿标本。2分析中的质量控制 包括仪器和试带的准确性、试带的有效期、仪器操作正确程度和仪器的校正等方面。（1）严格按操作步骤进行检测。（2 ）使 用 质 控 尿 液 ， 根 据 尿 化 学 质 控 液 的 期 望 值 判 断 尿 液 分 析 仪 的 工 作状态是否正常。自制人工尿质控液对尿葡萄糖、蛋白质、血红蛋白基本能满足要求，但尿胆红素、尿胆原结果不能令人满意，尿酮

12、体也有问题。国外公司的商品质控液效果较好，如 Bio-Rad 公司的 Routine Urine Chemistry Control。（3）质控步骤：在 对 分 析 仪 全 面 鉴 定 和 定 期 校 正 的 基 础 上 ， 每 日 对 仪器 和 试 带 按 图 5-3程 序 进 行 检查。每 次 使 用 “正 常 ”和 “异 常 ”两 种 浓 度的 质 控 物 进 行 检 查 ： 同 1天 内 最 好 使 用 同 l份 质 控 物 标 本 ； 质 控 物 任 一 膜 块 的测 定 结 果 与 “靶 值 ”允 许 有 1个 定 性 等 级 的 差 异 （ 靶 值 的 ） ， 超 过此范围或结果

13、由“正常”变成 “异常”或由“异常”变成“正常”均应视为失控。尿液分析中质量控制程序见图5-5。图 5-5 尿液分析中质量控制程序用质控物进行质控质控允许范围内 超出质控允许范围标本测定 检查质控物是否失效No Yes重复试验重新试验使用新质控物质控允许范围内 质控允许范围外继续标本测定 配制新质控物质控允许范围内 质控允许范围外标本测定 重新试验另一批号新试带新试带废弃失效试带质控允许范围内 质控允许范围外标本测定 检修或校正仪器新批号试带废弃全部失效试带质控允许范围外 质控允许范围内启用同一批号试带 继续标本测定使用新质控物 废弃旧质控物3分析后的质量控制 包括试验结果与 显 微 镜 检

14、结 果 的 相 关 性 、 是否受药物或病理物质的干扰、参考范围的认可、报告单书写是否规范和报告单回报时间是否及时等方面。（ 1） 化 学 分 析 结 果 与 显 微 镜 检 结 果 之 间 的 关 联 性 ： 如 出 现 表 5-11情 况 表示 尿 化 学 检 测 结 果 可 疑 ， 应 进 一 步 查 明 原 因。表5-11 尿干化学结果可疑情况化 学 分 析 显 微 镜 检 查隐 血 （ ） 大 量 红 细 胞亚 硝 酸 盐 （ ） 白 细 胞 （ ）蛋 白 质 （ ） 红 细 胞 、 白 细 胞 和 管 型 增 多（ 2） 综 合 考 虑 患 者 的 病 史 ： 特 别 是 肾 脏

15、疾 病 患 者 ， 尿 蛋 白 定 性 应 当 用 磺基 水 杨 酸 法 。 如 尿 化 学 分 析 结 果 与 镜 检 不 一 致 ， 应 进 一 步 查 明 原 因 。（ 3） 参 考 范 围 的 认 可 ： 尿 干 化 学 分 析 仪 检 测 白 细 胞 、 红 细 胞 出 现 “假阴 性 ”时 ， 应 以 镜 检 为 准 ； 但 当 “假 阳 性 ”时 ， 仪 器 的 结 果 可 能 正 确 。 这 种情 况 见 于 白 细 胞 ： 当 尿 在 膀 胱 贮 存 时 间 长 ， 白 细 胞 破 坏 ， 中 性 粒 细 胞 酯 酶释 放 到 尿 中 ， 导 致 仪 器 分 析 （ ） ，

16、镜 检 反 而 （ ） ； 红 细 胞 ： 肾 病 患者 尿 中 红 细 胞 常 破 坏 而 释 出 血 红 蛋 白 或 某 些 病 人 尿 中 有 高 活 性 不 耐 热 的 触酶 时 均 可 导 致 仪 器 分 析 （ ） ， 镜 检 却 为 （ ） 。 尿 液 煮 沸 冷 却 后 再 测 试可 排 除 不 耐 热 的 触 酶 造 成 的 假 阳 性 。 其 他 情 况 要 结 合 临 床 实 践 ， 不 能 一概否定或肯定仪器检测结果，更不能随意调节改变仪器的灵敏度。实验评价1 优 点 标 本 用 量 少 。 检 测 速 度 快 、 检 测 项 目 多 。准确性、重复性好。适用于普查。2缺点 不 同 厂 家 试 带 成 分 不 同 ， 呈 色 各 异 ， 检 测 灵 敏 度 和 特 异性 也 不 同 ， 应 注 意 批 间 差 异 。 不 能 完 全 替 代 对 病 理 性 尿 标 本 的 显 微 镜 检查 ， 特 别 是 管 型 、 结 晶 、 上 皮 细 胞 、 淋 巴 细 胞 、 单 核 细 胞 等 有 形 成 分 。 由 于 各 成 分 检 测 原 理 的 限 制 ， 干 扰 因 素 较 多 ， 应 对 结 果 加 以 综 合 分 析 。思考题如何评价尿干化学分析仪的临床应用？