1、编号:5 编制人:焦体霞 张琳 审核人:王善军 使用日期 2015 年 3 月 1高二生物选修三第二章第三节细胞融合技术班级: 姓名: 小组:【学习目标】1.掌握动物细胞融合的概念、方法及单克隆抗体的制备与应用。2.掌握植物体细胞杂交的过程、原理。【知识梳理】一、动物细胞融合1.动物细胞融合也称细胞杂交,指 。2.结果: 形成单核的杂交细胞。3.原理: 。 4.诱导方式:物理法: 。化学法: 。生物法: 。思考讨论:为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活?不灭活行吗?5.过程: 6.动物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。应
2、用:成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段,特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体。二、单克隆抗体1.什么是抗体?由什么细胞分泌?2.单克隆抗体:由单一 B 淋巴细胞进行无性生殖形成的细胞所产生的化学性质单一、特异 性强的抗体。3.B 淋巴细胞与抗体的关系:(1)B 淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗体。(2)动物体内的效应 B 淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。(3)每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。4.单克隆抗体制备设计方案: 。利用效应 B 淋巴细胞产生 的功能;利用肿瘤细胞 的特性;利用 的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细
3、胞特性的杂交瘤细胞;利用 技术大量培养杂交瘤细胞。制备过程:第一步:将 注射到小鼠体内进行免疫;第二步:从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的 细胞,与小鼠的 细胞在 ,或聚乙二醇的诱导下融合;第三步:在特定的 培养基中,筛选出 细胞;第四步:培养杂交瘤细胞,从中挑选出 的细胞群,继续培养;第五步:将该杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠 内增殖,然后再分离纯化单克隆抗体;2思考:(1)本过程利用了哪些原理?(2)为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与 B 细胞融合?5.杂交瘤细胞的特点: 。单克隆抗体的特点: 。6.应用主要有: 作为诊断试剂:准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟一定抗原发生特异性结合
4、,具有准确、高效、简易、快速的优点。 用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗癌症治疗,可制成“生物导弹”,也有少量用于治疗其它疾病。3. 植物体细胞杂交技术 1、定义:植物体细胞杂交就是将 的植物体细胞,在一定条件下融合成 ,并把杂种细胞培育成 技术。优点是 2、方法: 物理法: 、 化学法: 3、与动物体细胞杂交不同的是在杂交之前需要先用 和 去除细胞壁,获得具有活力的 ,此方法称为 4.植物体细胞杂交过程示意图:编号:5 编制人:焦体霞 张琳 审核人:王善军 使用日期 2015 年 3 月 35.植物体细胞杂交的优势:打破不同种生物间的生殖隔离限制,在一定程度上克服远缘杂交不亲和的障碍,大大
5、扩展了可用于杂交的亲本组合范围。4、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用法植物体细胞杂交动物细胞融合课堂检测:1.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌的实验方案(1)该实验方案的目的是 。(2)该方案能达到预期效果吗?为什么?(3)A 是从小鼠脾脏中取得 ,该细胞能产生 。(4)图中 B 为_过程,常用_作为诱导剂,该细胞继承_的遗传特性,既能_,又能_4(5)C 过程指细胞培养,该过程包括_培养和_培养两个阶段,其中_代以内的的细胞属于细胞株。2下列不是细胞融合常用方法的是( )A细胞培养 B灭活的仙台病毒诱导C电刺激
6、D聚乙二醇作为诱导剂3动物细胞融合的目的中,最重要的是( )A克服远缘杂交不亲和的障碍B制备单克隆抗体C培育新物种D生产杂交细胞4. 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( )淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B 淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞A B C D 5科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( )A经过免疫的 B 淋巴细胞B不经过免疫的 T 淋巴细胞C经过免疫的 T 淋巴细胞 D不经过免疫的 B 淋巴细胞 6用动物细胞工程获得单克隆抗体,下列实验步骤错误的是( )A将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的 B 淋巴细胞B用纤维素酶处理 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C用聚乙二醇作诱导剂,使能产生抗体的 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体7单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述,错误的是 ( )A特异性强、灵敏度高B与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C体外培养 B 淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D由效应 B 细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌