1、 知识改变命运，学习成就未来 执笔人：王国礼1高二生物选修 3 导学提纲 10第 3 节 动物细胞工程 导学案 2细胞融合和单克隆抗体【课前预习】1诱导动物细胞融合的方法有哪些？2制备单克隆抗体时选择的两个亲本细胞分别是什么？请说明理由。【创设情境】我们知道，运用植物体细胞杂交技术，可以跨越植物种间生殖隔离的屏障，培育出新的作物类型。那么，能不能采用类似的方法，让不同种动物的体细胞进行杂交呢？【预习新课】一、动物细胞融合：1、概念：动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。2、诱导融合的方法：动物
2、细胞融合的方法主要有 法、 法和 法。在细胞融合后，还应该对融合的细胞进行 。3、动物细胞融合的意义：克服了 ，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。4、应用：动物细胞融合技术最重要的用途是制备 。【拓展】动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动、聚乙二醇（PEG）诱导克服远源杂交不亲和，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性 用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外，还有用灭活病毒诱导制备单克隆抗体2、单
3、克隆抗体的制备：医学上传统抗体的制备：从人的血液中提取，但提取的抗体是多种抗体的混合物。这种混合抗体，不能专一性地对抗某一种病原体，因此治疗效果差。制备化学性质单一的抗体的原理：单个效应 B 细胞能产生化学性质单一的抗体，但在体外培养条件下，效应 B 细胞不能无限增殖，因此产生的抗体的量非常有限。在体外培养的骨髓瘤细胞具有无限增殖的特点，但不能产生抗体1、制备单克隆抗体时选择的两个亲本细胞分别是什么？2、制备原理： 细胞 能产生特异性强抗体，在体外不能无限繁殖细胞 不产生专一性强抗体，体外能无限繁殖知识改变命运，学习成就未来 执笔人：王国礼2 利用 使两种细胞融合。3.制备过程：思考：杂交瘤细
4、胞有什么特点？【分析】给小鼠注射特定的抗原蛋白是为了使小鼠获得相应的免疫反应，从而获得相应的效应 B 淋巴细胞；诱导动物细胞融合以后，在相应的培养基上至少存在 种类型的细胞，即： 。因此，要对融合后的细胞进行筛选。筛选出既可以 ，又可以 的杂交瘤细胞，将之在培养基上进行克隆。4.单克隆抗体的优点： 。应抓住三个一，即“一种诱导细胞融合的新方法灭活的病毒；一种新细胞杂交瘤细胞；一种优势单克隆抗体的特异性强、灵敏度高的抗体）。5单克隆抗体的作用：作为诊断试剂：准确识别各种 物质的细微差异，并跟一定 发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗 ，可制成“
5、”，也有少量用于治疗其它疾病。【经典例题剖析】例 1、动物细胞融合的目的中最重要的是A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞例 2、能使动物细胞融合的特有的诱导因子是A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激不 D.振动例 3 科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是A.经过免疫的 B 淋巴细胞 B.不经过免疫的 T 淋巴细胞C.经过免疫的 T 淋巴细胞 D.不经过免疫的 B 淋巴细胞例 4、右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：（1）若 A、B 是植物细胞，在细胞融合之前已用 _ _ 处理，除去了 _
6、 ；由 A、B 到细胞 C 的过程中，常用的物理方法是 _ 。融合完成的标志是_ 。（2）若 A、B 是植物细胞，则形成的 D 细胞还要应用 _ _ 技术把 D 培养成植株。（3）若 A、B 是动物细胞，一般取自 _ ，然后用 使其分散开来；由 A、B到 C 的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是 _ ，所形成的 D 称为 _ 注入小鼠细胞融合分离抗原注入小鼠体内骨髓瘤细胞细胞培养选择培养细胞培养基体内培养 体外培养从腹水提取 从培养液提取知识改变命运，学习成就未来 执笔人：王国礼3，A、B 融合为 C 的过程说明了细胞膜具有 。（4）若该过程是制备单克隆抗体，A 为小鼠效应 B 细胞，那
7、么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了 。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了 _ _，图中 B 为 _ 。（5）若该过程仍是制备单克隆抗体，在 A、B 到 C 的过程中，所形成的 C 有 种，用来培养的 D 细胞应该是 _ 。从中选择出它的方法是 _ 培养，获得 D 后，常用的培养方法是培养液中培养和 _ 。【基础试题训练】一、选择题1动物细胞融合和植物原生质融合决定于 （ ）A.细胞膜的流动性 B细胞膜的选择透过性 C.细胞质的流动性 D细胞质酶的活性2只能使动物细胞融合的常用诱导方法是 （ ）APEG B灭活的病毒 C电刺激 D离心3科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细
8、胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是 （ ）A经过免疫的 B 淋巴细胞 B不经过免疫的 T 淋巴细胞C经过免疫的 T 淋巴细胞 D不经过免疫的 B 淋巴细胞4 （2004 年，全国）用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ）A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的 B 淋巴细胞B用纤维素酶处理 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D筛选杂交资金积累细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体5研究单克隆抗体治疗癌症的思路是 （ ）A利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 B以单克隆抗体
9、作抗癌药物杀死癌细胞C抗癌物质在克隆细胞中大量合成 D单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合6单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ ）AB 淋巴细胞 BT 淋巴细胞 C骨髓瘤细胞 D杂交瘤细胞7单克隆抗体和血清抗体相比，其优越性在于 （ ）A、单克隆抗体能够制成“生物导弹” B、单克隆抗体能够在体外制备C、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、免疫活性高 D、单克隆抗体制备过程简单8.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是 （ ） 诱导融合的方法完全相同 所用的技术手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成杂种细胞A. B. C. D. 9动物细胞工程技术的基础是 （ ）A.动物细胞融合
10、 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养10.“生物导弹”是指 （ ）A、单克隆抗体 B、带有特定药物的单克隆抗体 C、杂交细胞 D、B 淋巴细胞11、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活增殖的细胞是B 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B 淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞 A B C D12、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中 1 过程注射的物质和 A 细胞的名称为 （ ）知识改变命运，学习成就未来 执笔人：王国礼4A、抗体、T 淋巴细胞 B、抗原、T 淋巴细胞 C、抗体、B 淋巴细胞
11、D、抗原、效应 B 淋巴细胞13.（多选）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是 （ ）AB 淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体C体外培养时，一个效应 B 淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖D单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显14 （多选）1975 年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是A.效应 B 细胞 BT 淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D杂交瘤细胞2、非选择题1、下图是单克隆抗体制备过程示意图，据图回答：（1）图中 A 过程是从小鼠的
12、脾脏中取得_细胞，该细胞能够产生_。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_类物质。（2）B 过程是一个_过程，该过程的进行需要灭活的_或_的诱导。（3）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_。2、下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。 技术是单克隆抗体技术的基础。 根据培养基的用途分类，图中 HAT 培养基属于 培养基。 单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 。 动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用 。选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 特点，又具备淋巴细胞的 特点。 淋巴细胞是由动物体骨髓中的 细胞分化、发育而来。 杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是 。 受精作用、原生质体融合、动物细胞融合受精作用 原生质体融合 动物细跑融合细胞类型不同 精子与卵细胞 体细胞 体细胞细胞来源不同 来自同一生物个体 一般来自不同种的生物个体 一般来自不同种的生物个体染色体数目变化不同 2N 2N+2N 不一定是 2N2 2N+2N 不一定是 2N2不同点融合条件不同 不需人工诱导 需人工诱导 需人工诱导知识改变命运，学习成就未来 执笔人：王国礼5同 都有两个细胞融合成一个细胞，并且融合成这个细胞的遗传物质都是由原来的两个细胞决定的
