1、发热伴血小板减少综合征实验室检测方案为保证及时、科学地采集、运送发热伴血小板减少综合征病例（包括疑似病例标本），规范发热伴血小板减少综合征的实验室检测程序，提高检测质量，特制定本方案。一、样本采集对象发热伴血小板减少综合征病例（包括疑似病例，以下同）。二、标本种类及采集方法（一）血清标本。用无菌真空管，采集患者急性期（发病 2周内）和恢复期（发病 4 周左右）非抗凝血 5ml，及时分离血清，分装保存于带螺旋盖、内有垫圈的冻存管内，标记清楚后将血清保存于-70 冰箱（一周内可保存在-20冰箱），用于病毒特异性核酸、抗原和抗体检测及病原体分离。编码规则：“年份（ 2 位）- 乡镇级地区编码（8 位
2、）-流水号（3 位）”。地区 编码可通 过中国疾病预防控制中心网络直报系统查询。如 2010 年云南省昆明市五华区沙朗乡的第 12 位调查者的编码为“10-53010220-012”。该调查者的急性期和恢复期血清分别在编号首位增加“J”和“H” 。如上例调查者的急性期血清编号为 J10-53010220-012，恢复期血清编号为 H10-53010220-012。（二）必要时，可采集病例的活检或尸检标本进行实验室检测。具体方法参照病理实验室相关要求和卫生部传染病人或疑似传染病人尸体解剖查验规定。三、实验室检测和诊断（一）病原学。1核酸检测：采用 RT-PCR 和 Real-time PCR 病
3、毒核酸 诊断方法进行检测和诊断，患者血清中扩增到特异性核酸，可确诊新型布尼亚病毒感染。2病毒分离：用于病毒分离的患者急性期血清标本经处理后，可采用 Vero、Vero E6 等细胞或其他敏感细胞进行，用 Real-time PCR 病毒核酸诊断方法、ELISA、免疫荧光等方法确定。患者血清中分离到病毒可确诊。（二）血清学。1. 血清特异性 IgG 抗体：采用 ELISA、免疫荧光（IFA）抗体测 定、中和试验等方法检测，新型布尼亚病毒 IgG 抗体阳 转或恢复期滴度较急性期 4 倍以上增高者，可确认为新近感染。2.血清特异性总抗体：可采用双抗原夹心 ELISA 法检测，血清病原特异性总抗体阳性
4、表明曾受到病毒感染。四、生物安全生物安全按照病原微生物实验室生物安全管理条例等相关规定要求，做好生物安全工作。（一）实验室生物安全。加强实验室生物安全，应当在生物安全级及以上的实验室开展标本的血清学、核酸检测和病毒分离工作。（二）标本采集个人防护。采集病人标本时可进行一般性防护（穿戴口罩、手套和长袖工作服）。野外采集标本时，应穿着颜色明亮的防护服，并将衣袖或裤管口扎紧以防蜱叮咬人体。一旦发现有蜱附着体表，应当用镊子等工具夹取，不要用手直接摘除。野外作业或活动的人员可使用驱避剂喷涂皮肤。（三）在诊疗及标本的采集、包装和实验室检测等过程中所产生的医疗废物，应当按照医疗废物管理条例和医疗卫生机构医疗废物管理办法等相关规定处理。
