1、实验三 呼吸运动的调节及影响因素(综合实验)目的要求1、学习用 BL-420E 生物机能实验系统描记呼吸运动的方法。2、观察某些神经体液因素对呼吸的影响。3、观察药物对呼吸运动的影响。4、掌握实验动物呼吸运动的描记方法。实验器材1、仪器与材料BL-420E 生物机能实验系统,哺乳类动物手术器械、气管插管、50CM 的橡皮管、缝合针、呼吸换能器2、药品25氨基甲酸乙酯、3%乳酸、 CO2 气体2%盐酸吗啡,10%尼可刹米3、动物健康家兔,体重 2-3Kg方法步骤(一)手术操作1.称重、麻醉、固定2.颈部手术,气管插管,分离双侧迷走神经,3.剑突部位剪毛,将连接换能器的缝合针,固定于剑突处。(二)
2、仪器连接(三)实验观察项目1、描记正常呼吸曲线(频率,幅度)2、增大解剖无效腔3、增加吸入气中 CO24、耳缘静脉注射 3乳酸 0.5ml5、观察药物对呼吸的影响腹部皮下注射 2盐酸吗啡,呼吸抑制。立即耳缘静脉注射 10尼可刹米 100mg,观察呼吸变化。6、先剪断一侧迷走神经,观察呼吸变化,再剪断对侧迷走神经观察呼吸变化。7、电刺激迷走神经中枢端,观察呼吸的变化。注意事项1、气管插管时,注意防止切口出血过多,避免吸入肺影响肺通气。2、每项实验均要有正常呼吸曲线作为前后对照思考题1、缺 O2、CO2 和H+对呼吸运动的影响机制有何不同?2、分析迷走神经在节律呼吸运动中起何作用?3、吗啡、尼可刹
3、米对呼吸运动有何影响?作用机制是什么?实验四 蛙心起搏点的观察、期前收缩与代偿间歇、蟾蜍心脏灌流,胃肠运动观察(录像)目的要求1.学习暴露蛙类心脏的方法,熟悉心脏的结构。2.观察心脏起搏点以及各部分的自律性高低和心脏的兴奋性传导顺序。实验原理1. 两栖类动物的心脏解剖2. stannius 结扎实验器材动物:蟾蜍仪器及药品:蛙类手术器械,丝线,任式液。方法步骤1.破坏脑脊髓 。2. 仰卧位固定于蛙板上。3.打开胸腔暴露心脏 ,观察心脏的结构 。4. 斯氏结扎,记录结果。两栖类动物的心脏为两心房、一心室,心脏的起搏点是静脉窦。静脉窦的自动节律最高,心房次之,心室最低。正常情况下,心脏的活动节律服
4、从静脉窦的节律,其活动顺序为:静脉窦、心房、心室。 二、蟾蜍心室的期前收缩与代偿间歇实验目的1学习在体蟾蜍心跳曲线的记录方法。2观察心脏在兴奋过程中兴奋性的变化。实验原理心肌的有效不应期(收缩期,舒张早期)实验器材动物:蟾蜍仪器及药品:BL-420 生物实验系统,刺激电极,蛙心夹,张力换能器,蛙类手术器械,任式液。方法步骤1. 破坏脑脊髓 2.仰卧位固定于蛙板上。3. 打开胸腔暴露心脏4. 蛙心夹于心脏舒张期夹住心尖 5. 连接张力换能器和刺激器6. 选择合适的刺激强度 ;分别在心室舒张的早期、中期和晚期给予单个刺激,观察心跳曲线的变化。 1. 蟾蜍毁髓时要彻底。2. 实验过程中,应经常用任氏
5、液湿润心脏。3. 刺激电极要与心室肌接触良好,应避免短路。4. 心跳曲线的上升支应代表心室收缩,下降支代表心室舒张,如相反则应将换能器倒向。5. 先用刺激电极刺激蟾蜍的腹壁肌肉,以检测强度是否适宜。 6. 每个组蛙心夹留在支架上,勿丢失。实验五 心血管活动的神经体液调节及影响因素(综合实验)学习哺乳类动物动脉血压的直接描记方法;观察神经体液因素对心血管活动的影响;掌握哺乳类动物手术常规;熟悉 BL-420 生物机能实验系统;复习相关理论课内容。1.仪器与材料:BL-420 生物机能实验系统,压力传感器,塑料动脉插管2.药品:25氨基甲酸乙酯(麻醉) ,1:10000 去甲肾上腺素(升压)5%肝
6、素(抗凝)3.动物:家兔1.称重、麻醉、固定: 25氨基甲酸乙酯 4mL/kg(理论估计值) 由耳缘静脉缓慢注入,观察麻醉指征。背交叉固定2.颈部手术:a.剪毛,气管插管b.分离右侧颈部迷走神经,减压神经c.分离双侧颈总动脉(carotid artery)d.左侧颈总动脉插管,先结扎远心端,在近心端夹动脉夹,向近心端插入动脉插管。3.观察项目a.正常血压曲线,向上为血压升高,向下为血压降低。b.用动脉夹夹闭右侧颈总 5-10s c.电刺激右侧减压神经,观察d.结扎右侧迷走神经,并剪断,观察e.电刺激右侧迷走神经外周端,观察f.注射 1:10000 去甲肾上腺素 0.10.5mL1一项实验后,须
7、持血压基本恢复后再进行下一项实验。2.随时注意动脉套管的位置,特别是动物挣扎时,避免扭转插管阻塞血流或裁穿血管。3.随时注意动物麻醉的深度,如实验时间过长,动物经常挣扎,可补注少量麻醉剂。4.刺激神经之前,应先检查是否有刺激电流输出。5.神经需刺激时才拉出,不要一直由保护电极勾住,防止神经干燥。实验六 减压神经、膈神经放电目的要求1、学习哺乳类动物在体神经干(减压神经和膈神经)动作电位引导的方法。2、观察减压神经放电特点以及血压升降时神经冲动的变化 3、观察膈神经放电的特点以及与呼吸的关系。4、观察神经体液因素对减压神经和膈神经放电的影响。实验器材1、仪器与材料哺乳类动物手术器械、引导电极、电
8、极固定架、BL 410 生物机能实验系统、监听器 。2、药品25氨基甲酸乙酯、1:10000 去甲肾上腺素、CO23、动物健康家兔,体重 1.52.5Kg方法与步骤(一)手术操作1、称重、麻醉、固定2、颈部手术,气管插管3 、先分离一侧减压神经,引导放电(滴加石蜡油)4、后分离膈神经,引导放电(滴加石蜡油)(二)仪器连接把减压神经或膈神经搁置在悬空的引导电极上,注意勿使神经牵拉太紧;引导电极不可触及其它组织;在创口内滴入温液体石蜡,防止神经干燥。 (三)实验观察项目1、正常减压神经放电(监听到类似于火车开动声)观察显示器屏幕上减压神经群集放电的节律、波形和振幅,及其与血压的关系。其节律与心律同
9、步,幅度约为 30100V,大小随血压高低而变化。一簇群集放电的波形为先大后小的三角形。 2、耳缘静脉注射 10-4 去甲肾上腺素 0.5ml观察膈神经放电实验七 生理、病理因素及药物对家兔泌尿功能的影响 (综合实验)实验目的1、学习输尿管(膀胱)插管、颈总动脉插管的方法。2、掌握用 BL-420E 生物机能实验系统记录血压和尿滴的方法。3、观察影响尿生成和血压的因素,观察血压变化与尿量之间的关系4、用酚红排泄实验检测肾小管的分泌和排泄功能。5、观察利尿药、垂体后叶素对尿量和血压的影响6、学习尿糖定性的检测方法 7、加强学生实践能力和知识综合运用能力 实验器材1、仪器与材料BL-420E 生物
10、机能实验系统,哺乳类动物手术器械、压力传感器、受滴传感器、动脉夹、动脉插管、输尿管插管、培养皿、保护电极、尿糖定性试纸、输液器、铁架台2、药品25氨基甲酸乙酯、肝素溶液、0.01去甲肾上腺素溶液、呋塞米注射液、垂体后叶素注射液、25葡萄糖溶液、0.9氯化钠溶液、酚红注射液。3、动物健康家兔,体重 1.52.5Kg方法与步骤(一)手术操作1、称重、麻醉、固定2、耳缘静脉输液。3、颈部手术,气管插管,分离右侧迷走神经,左侧颈总动脉插管。4、下腹部手术,左(或右)侧输尿管插管或膀胱插管。(二)仪器连接(三)实验观察项目1、正常血压和尿量;正常尿液颜色2、耳缘静脉注射 25葡萄糖溶液 10 ml,观察血压和尿量变化,并在注药前后做尿糖定性实验。3、耳缘静脉注射 104 去甲肾上腺素 0.3ml,观察血压和尿量变化。4、耳缘静脉注射酚红溶液 1 ml,记录尿液变红颜色的时间。5、耳缘静脉注射呋塞米 1 mL , 观察血压和尿量 变化。6、结扎并剪断右侧迷走神经,电刺激迷走神经外周端,观察血压和尿量变化。7、耳缘静脉注射垂体后叶素 3u, 观察血压和尿量变化。1大量饮水、静脉注射生理盐水和高渗葡萄糖所引起的多尿,其机制有何不同,为什么?2静脉注射垂体后叶素后,尿量常常会出现先多后少的现象,如何解释?3静脉注射速尿后,尿量增加的机制是什么?