1、精子染色质扩散实验检测精子 DNA 碎片与宫腔内人工授精妊娠率的关系作者：曹晓敏 苏园园 何茜冬 郑轶群 林仲秋【摘要】 目的：探讨精液 DNA 碎片与宫腔内人工授精妊娠率的关系。方法：收集分析70例不育不孕患者共88个 IUI 治疗周期，精子染色质扩散(SCD) 实验分析精子 DNA 碎片，苯胺蓝染色法评价精子核成熟度，并按妊娠结局分成妊娠组与非妊娠组，比较各组间精子DNA 碎片比值、精子核成熟度和 IUI 妊娠率的关系。结果：非妊娠组 SCD 小光晕和无光晕精子(精子 DNA 碎片) 比值平均为(28.310.6) % , 非妊娠组明显高于对照组(12. 0 5. 9)%( P1/4 ，而
2、精子头直径 2/3;大光晕精子头直径2/3。精子 SCD 实验显示大、中、小光晕和无光晕精子的比例，见表1。非妊娠组患者 SCD 小光晕和无光晕精子比值平均为28.3 10.6%，对照组(12. 0 5.9) %，两组比较差异有统计学意义(P0. 05)。大光晕和中光晕精子比值在 IUI 妊娠组和对照组分别为 (72. 6 5. 3)%和(60.712.5)%，两组比较差异有统计学意义(P0. 05)。A 为妊娠组：12为大光晕的精子，A3 5为中光晕的精子 B 为非妊娠组：12为小光晕的精子，B35为无光晕的精子图1 SCD 实验检测两组精子 DNA碎片结果表1 两组 SCD 大、中、小光晕
3、和无光晕精子的比例3.2 精子核蛋白组型检测对两组70例标本进行苯胺蓝染色，非妊娠组苯胺蓝染色阳性率明显高于对照组，两组差异具有统计学意义(P0. 05)，见表2。表2 两组苯胺兰染色阳性率平均值比较4 讨论目前关于女方因素对 IUI 妊娠率影响的研究比较深入并形成一些共识。而精子质量与IUI 妊娠率的研究通常是在常规精液分析水平上进行。虽然常规精液分析为我们了解精液质量提供了一些重要信息,然而这些信息不能完全评估男性的生育能力，临床上约有15%的男性不育患者精液常规检查是正常的，所以常规的精液分析对评价精子的质量存在缺陷和不完善之处，对预测妊娠结局方面的价值十分有限。因此我们需要寻找新的、敏
4、感的评估精液质量的指标，深入分析 IUI 失败的原因，以便帮助临床医生进行诊断和制定治疗方案，是当前急需解决的问题。本课题通过对两实验组患者精子 DNA 碎片和精子核成熟度的检测，发现非妊娠组患者精子 DNA 碎片比例增高。精子 DNA 损伤常常是多个因素作用的结果,但其确切机制现在还不清楚,一般认为有如下3种：凋亡; 异常氧化应激;精子染色质组装缺陷。在精子形成过程中,正常情况下,赖氨酸丰富型组蛋白被鱼精蛋白替代,这是随后发生去凝缩作用形成精原细胞的必要条件。精子核成熟度直接影响精子的受精能力和受精后原核的形成及胚胎的发育7。精核蛋白分子中一般不含赖氨酸 ,而组蛋白和过渡蛋白中则有众多赖氨酸
5、。本研究利用苯胺蓝可与富含赖氨酸的蛋白结合,呈蓝色,检测精子精子核的成熟度。我们发现非妊娠组苯胺蓝染色阳性率明显高于对照组，说明非妊娠组可能是由于精子核成熟度异常，精子核蛋白转换障，导致 DNA 不稳定及受损，妊娠失败。据此可以对就诊的不孕夫妇进行合理的筛查，使那些质量不佳通过 IUI 受孕机会较小的病例，直接求助疗效更为可靠的其他辅助生殖技术，就可以避免不必要的 IUI 治疗对患者身体、精神和经济上的损害。再次对精子质量好适应于 IUI 治疗的患者，我们建议至少应进行 34 次 IUI 治疗周期，避免使用体外受精-胚胎移植(IVFET) 和单精子显微注射(ICSI) 等技术难度更大、费用更高
6、、侵袭性强的其他辅助生殖技术。另外通过本研究对 IVF 前的常规精液分析结果正常但反复 IVF 失败的患者继续治疗提供方向和理论指导。但是关于精子核成熟异常与 DNA 受损与妊娠失败发生的机制、响因素及其治疗，还需大量深入详细的研究。【 参考文献】1 卢伟英，刘西茹，等.718周期夫精宫腔人工授精临床因素分析.海南医学院学报，2006,12(4):310313.2Aboulghar M,Mansour R,Serour G.精神障碍护理学EB/OL.http:/www.whdaiyun.org,2008-08-16/2008-10-04.3Vermesh M,Kletzky OA,Davaja
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