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慢病毒的浓缩与纯化——PEG-8000浓缩法.docx

上传人:HR专家 文档编号:5599146 上传时间:2019-03-09 格式:DOCX 页数:1 大小:16.15KB
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慢病毒的浓缩与纯化PEG-8000 浓缩法心得 (0)实验试剂1. NaCl2. PEG8000实验设备1. 高压灭菌锅2. 0.45m 滤头3. 高速离心机4. 低温冰箱实验步骤1. 5X PEG8000 NaCl 配制称取 NaCl 8.766 g; PEG8000 50g 溶解在 200ml Milli-Q 纯水中;121 摄氏度 30min 湿热灭绝 30min;保存在 4。2. 使用 0.45m 滤头过滤慢病毒上清液;3. 每 30ml 过滤后的病毒初始液,加入 5X PEG-8000 NaCl 母液 7.5 ml;4. 每 2030min 混合一次,共进行 3-5 次;5. 4 度放置过夜;6. 4 度,4000 g,离心 20min;7. 吸弃上清,静置管子 12 分钟,吸走残余液体;8. 加入适量的慢病毒溶解液溶解慢病毒沉淀;9. 集中后的病毒悬液分装成 50 l 每份,保存在成品管中。用碎干冰速冻后储存在-80 。

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