PCR扩增技术,李琛琛2012330300611月13日,一、PCR定义 二、PCR原理 三、PCR反应体系 四、PCR扩增条件 五、PCR结果,一、PCR的定义,PCR(Polymerase Chain Reaction),聚合酶链式反应,是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法。,PCR是又称为基因的体外扩增法。,PCR是基因扩增技术的一次重大革新,它可将极微量的 靶DNA特异地扩增上百万倍。,二、PCR的原理,PCR(Polymerase Chain Reaction),变性:在加热或碱性条件下可使DNA双螺旋的氢键断裂,形成单链DNA。,三、反应体系,在0.5ml PCR管内配置25ul反应体系:,基因扩增仪,四、扩增条件,(1) 95变性5min, (2) 94变性30s, (3) 50退火30s,(4) 72延伸1min。(5) 重复(2)-(4)30次(6)72延伸10min。,琼脂糖凝胶电泳槽,凝胶成像系统,五、PCR结果,谢 谢!,