1、等的辅酶而参与自由基的清除 ， 同时 ， GSH 也具有直接清除自由基的作用 ， 与模型组比较 ， LW 能升高 GSH 的含量 ， 表明 LW 可能通过增加 GSH 的含量而清除自由基 ， 达到保护肝脏的作用 。肝组织病理学结果显示 ，LW 高 、中剂量组与模型组比较 ， 肝小叶结构清晰 、形态完整 ， 肝细胞变性 、坏死较轻 ， 这表明 LW 对肝脏可起到较好的保护作用 。总之 ， 实验结果表明 ， LW 可通过增强机体抗氧化能力 ， 加速自由基清除 ， 修复受损肝细胞 ， 从而达到对ANIT 所造成肝损伤的保护作用 ， 使肝功能得到改善 。 DOI 103870/yydb20110800
2、7 参考文献 1 徐雪钰 ， 于珊 ， 胡克章 ， 等 灵五颗粒对 D-半乳糖胺盐酸盐致小鼠肝损伤的保护作用 J 解放军药学学报 ， 2010， 26( 5) : 426427 2 方厚华 医学实验动物模型 M 北京 : 军事医学科学院出版社 ， 2001: 325 3 黄正明 ， 杨新波 ， 曹文斌 ， 等 水芹退黄降酶疗效的实验研究 J 中国药学杂志 ， 1989， 24( 2) : 8485 4 JEAN P A， ROTH R A Naphthylisothiocyanate disposition inbile and its relationship to liver glutat
3、hione and toxicity J Biochem Pharmacol， 1995， 50( 9) : 14691474 5 DAHM L J， SCHULTZE A E， ROTH R A An antibody toneutrophils attenuates alpha-naphthylisothiocyanate-inducedliver injury J J Pharmacol Exp Ther， 1991， 256: 412420 6 杨新波 ， 黄正明 ， 曹文斌 ， 等 CCl4、D-Gal、ANIT 对化学性肝损伤小鼠血清生化指标的影响 J 世界华人消化杂志 ， 199
4、8， 6 ( 1) : 19 7 黄正明 ， 杨新波 ， 曹文斌 ， 等 化学性及免疫性肝损伤模型的方法学研究 J 解放军药学学报 ， 2005， 21( 1) : 4246复方利多卡因乳膏体外透皮吸收实验舒成仁1， 葛苗苗2， 黄露2， 吴海燕3， 黎维勇2( 1 湖北省黄石市中心医院药剂科 ， 435000; 2 华中科技大学同济医学院附属协和医院药剂科 ， 武汉 430022;3 湖北省医药工业研究院 ， 武汉 430061) 摘 要 目的 比较复方利多卡因乳膏实验制剂和市售参比制剂的透皮吸收效果 ， 并考察复方利多卡因乳膏实验品存放不同时间的透皮吸收能力 。方法 以 Franz 扩散池
5、和体外大鼠皮肤进行体外渗透实验 ， 采用高效液相色谱法同时测定利多卡因和丙胺卡因的药物浓度 ， 计算累积透皮吸收量 ， 评价制剂的体外透皮吸收效果 。结果 两组制剂 8 h 内不同时段透皮吸收累积量差异无统计学意义 。有效期内不同存放时间实验制剂各批的透皮吸收累积量和释药速率差异无统计学意义 。结论 实验制剂和参比制剂的透皮吸收能力一致 ， 在有效期内 ， 不同存放时间的实验制剂透皮吸收能力基本一致 。 关键词 利多卡因 ; 丙胺卡因 ; 乳膏 ; 色谱法 ， 高效液相 ; 透皮吸收 中图分类号 R9712; R965 文献标识码 A 文章编号 10040781( 2011) 08099703
6、Percutaneous Absorption of the Compound Lidocaine Cream in VitroSHU Cheng-ren1， GE Miao-miao2， HUANG Lu2， WU Hai-yan3， LI Wei-yong2( 1 Department of Pharmacy，Huangshi Central Hospital， Hubei Province， Huangshi 435000， China 2 Department of Pharmacy， UnionHospital Affliated with Tongji Medical Colleg
7、e， Huazhong University of Science and Technology， Wuhan430022， China; 3 Hubei Provincial Institute Co Ltd Pharmaceutical Industry， Wuhan 430061， China)ABSTRACT Objective To compare the percutaneous absorbency of the compound lidocaine cream between the labmade and commercially available one during d
8、ifferent periods of storage Methods The permeation of the cream was studiedon rat skin with Franz diffusing cell Lidocaine and prilocaine was quantified by HPLC The percutaneous absorbency in vitro wasevaluated by transdermal absorption accumulation of lidocaine and prilocaine Results There were no
9、significant difference inthe transdermal absorption accumulation between the test cream and the reference one ( P005) And no significant differencewas found in the transdermal absorption and drug release whenever within the expiry date ( P0 05) Conclusion Thepercutaneous absorbency of the test cream
10、 is consistent with the reference cream， and which is stable during storing within theperiod of validityKEY WORDS Lidocaine; Prilocaine; Cream; HPLC; Percutaneous absorption复方利多卡因乳膏是一种浅表镇痛药 ， 主要由利多卡因和丙胺卡因组成 ， 能够渗透到达真皮层 ， 实现长时间的镇痛效果 。该药适用于浅表皮肤各种小手术的镇痛 ， 尤其对减轻儿童注射疼痛有显著作用 。为评价该制剂 ， 笔者采取药物对照的方法研究该制剂透皮吸收
11、效果并观察存放过程对其透皮吸收的影响 ， 现报道如下 。799医药导报 2011 年 8 月第 30 卷第 8 期1 材料11 仪器 Waters 高效液相色谱仪 ( Waters510 泵 ，486 检测器 ) ， TK-12A 透皮扩散实验仪 ( 上海偕凯科技贸易有限公司 ) ， 电子分析天平 AUW22OD ( 日本岛津 ) ， PHS-3B pH 计 ( 上海精科雷磁 ) 。12 试药 利多卡因标准品 ( 批号 : 1P000353) ， 丙胺卡因 ( 批号 : 1P000356) 。实验药 : 5% 利多卡因透皮乳膏 ( Lidiprine Cream， 成分 : 利多卡因 、丙胺卡
12、因 ， 中生生技制药股份有限公司淡水厂 ， 批号 : 91020， 81044，71071) ; 对照药 : 5%安麻乐乳膏 ( Emla， 批号 : LA4540，利多卡因 丙胺卡因 =11， 油 /水性乳剂 ， 这种制剂具有皮肤麻醉作用且适用于表皮处理 ， 台湾阿斯特捷利康股份有限公司生产 ) 。实验所用试剂甲醇为色谱纯 ， 磷酸二氢铵 、氢氧化钠为分析纯 。13 动物 SD 大白鼠 9 只 ， 购于华中科技大学同济医学院实验动物学部 ， 雄性 ， 体质量 250 300 g， 合格证号 : SCXK( 鄂 ) 2004-0007。2 方法与结果21 HPLC 测定方法211 色谱条件 色
13、谱柱 : Hypersil ODS2( 4 6 mm250 mm， 5 m) ; 流动相 : 05%磷酸二氢铵 ( pH70) 甲醇 ( 3070) 混合溶液 ; 流速 : 1 mLmin-1， 检测波长 : 254 nm; 进样量 : 20 L; 柱温为室温 。212 专属性实验 对照品溶液的制备 : 精密称取利多卡因 、丙胺卡因适量 ， 用流动相稀释成每毫升含利多卡因 、丙胺卡因各约 3125 g 的溶液 ， 摇匀 ， 作为对照品溶液 。样品溶液 : 取乳膏剂 1 0 g， 均匀地涂布于Franz 扩散池的鼠皮上 ， 1 h 取接收液适量 ， 经孔径045 m滤膜滤过 ， 取续滤液作为样品
14、溶液 。空白基质液 : 取空白基质 10 g 均匀地涂布于 Franz 扩散池的鼠皮上 ， 8 h 后取接收液适量 ， 经孔径 0 45 m 滤膜滤过 ， 取续滤液作为空白基质液 。分别取上述对照品溶液 、样品溶液 、空白基质液20 L 进样 ， 记录色谱图 。结果表明空白基质及皮肤不干扰测定 。213 标准曲线的绘制 精密称取利多卡因 、丙胺卡因各 10 mg， 分别置于 10 mL 量瓶 ， 加流动相溶解并稀释至刻度 ， 摇匀 ， 各精密量取 5 mL， 置于 10 mL 量瓶中 ， 得标准储备液 ( 利多卡因 、丙胺卡因的浓度均为500 gmL-1) 。制备利多卡因 、丙胺卡因对照品溶液
15、 收稿日期 20101002 修回日期 20101105 作者简介 舒成仁 ( 1974) ， 男 ， 湖北阳新人 ， 主管药师 ， 硕士 ， 主要从事临床药学工作 。电话 : 0714 6265539，E-mail: hopkins_shu163 com。浓度 均 为 250 00， 125 00， 62 50， 31 25， 25 00，1250 gmL-1的标准曲线溶液 ， 摇匀 ， 取 20 L 进样 ， 按峰面积 ( A) 对浓度 ( C) 进行回归 。线性范围均为 125 2500 gmL-1， 标准曲线方程为利多卡因 :A=1 7655C+3 052 7( r = 0 999 6
16、) ; 丙胺卡因 : A =10 203C+31 319( r=0999 4) 。214 相对回收率实验 将利多卡因 、丙胺卡因对照品溶液 ， 加入已知含量的透皮吸收溶液中 ， 分别制备对照品浓度为 125， 3125， 125 gmL-1的样品溶液 ， 每个浓度各 3 份样品 。被检测的样本的药物浓度减去透皮溶液的本底浓度与加入的已知对照品浓度的比值 ，即为本方法的加样回收率 。结果显示 ， 其中所含利多卡因的平均回收率为 101 9% ( RSD 为 1 58%) ， 丙胺卡因的平均回收率为 1002%( RSD 为 298%) 。215 精密度与稳定性实验 取相对回收率实验中的中浓度样本
17、 ， 连续进样 6 次 ， 观察波动性 。结果显示 ， 该检测方法精密度良好 ( 利多卡因 RSD 1 98%， 丙胺卡因 RSD 217%) ; 取相对回收率实验中的中浓度样本 ， 室温下放置 6 h， 进样分析 。结果显示 ， 在室温下放置 6 h 其中所含的药物浓度基本不变 ( 利多卡因和丙胺卡因的 RSD 分别为 076%和 057%) 。22 体外鼠皮的制备 大鼠断颈处死后 ， 用剪刀减去大鼠腹部的毛 ， 涂上脱毛膏 ， 放置 1 2 min 后刮去脱毛膏 ， 用水冲洗 ， 剪下腹部皮肤 ， 除净皮下脂肪 ， 洗净 ， 将其置于 09%氯化钠溶液中 ， 冷藏 ， 备用 ， 不超过 7
18、 d 1-2。23 体外透皮吸收实验 将大鼠皮肤固定在改进的Franz 扩散池的上 、下两室之间 ， 角质层朝上 ， 准确称取凝胶 10 g ， 均匀涂于皮肤表面 ， 接受池 ( 扩散面积 =3 cm2， 容积 7 mL) 中盛 pH74 的磷酸盐缓冲液为接受液 ， 且接受液与皮肤真皮层刚好接触 3。在恒温( 371) 下保持恒速 ( 300 rmin-1) ， 不断搅拌 。以后于涂药后的 1， 2， 3， 4， 5， 6， 7， 8 h， 分别取全部接受液同时补充等量接受液进行下一步实验 。取出各时段的透皮接受液 ， 样品用孔径 0 45 m 微孔滤膜过滤 ，取续滤液 20 L 进样 ( 必
19、要时加流动相定量稀释 ) ， 记录峰面积 ， 通过外标法计算释放液中药物浓度 ， 计算各时点的药物释放量 ， 再计算各时点的累计释放量 ( Q) ，以 Qt 作线性回归 ， 直线的斜率即为药物释放速率 4。24 统计学方法 采用软件 SPSS13 0， 对不同制剂和同制剂不同批次各时点药物累计释放量和释放速率进行方差分析 。以 P005 为差异有统计学意义 。25 实验结果 实验药物与对照药各时点及平均累积释药量对比结果 ， 以制剂丙胺卡因 、利多卡因平均累积释放量 -时间曲线图表示 ( 图 1A， 图 1B) 。方差分析各时899 Herald of Medicine Vol. 30 No.
20、 8 August 2011点丙胺卡因和利多卡因累积释药量均差异无统计学意义 。见表 1。图 1 两制剂丙胺卡因 ( A) 、利多卡因 ( B) 平均累积释放量 -时间曲线图Fig1 Prilocaine ( A ) and Lidocaine ( B ) averagetransdermal cumulant releasing curves ( 2 creams)3 批实验药 ( 批号 : 91020， 81044， 71071) 丙胺卡因 、利多卡因各时点累积释药量经方差分析 P 均 005， 说明各时点累计释放量均差异无统计学意义 ( 图 2， 表 2) 。图 2 3 批试验药丙胺卡因
21、 ( A) 、利多卡因 ( B) 各时点平均累积释放量 -时间曲线图Fig1 Prilocaine ( A) and Lidocaine ( B) averagetransdermal cumulant releasing curves表 1 实验药和对照药累积释药量方差分析结果Tab1 Variance analysis of cumulative release of test drugs and control drugs试药 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 7 h 8 h丙胺卡因 0868 0726 0841 0855 0798 0799 0801 0837利多卡因 0
22、977 0567 0696 0724 0690 0713 0720 0758表 2 3 批实验药物累积释药量方差分析结果Tab2 Variance analysis of cumulative release of 3 batches of drugs试药 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 7 h 8 h丙胺卡因 0102 0263 0214 0228 0203 0185 0175 0164利多卡因 0132 0231 0235 0281 0300 0317 0329 03423 讨论笔者在本实验中所用鼠皮由专人采集 ， 虽来源稳定 ， 但时间各异 ， 而且手工制备过程难免存在差
23、异 ， 透皮吸收实验中药物涂布的均匀性有差异 ， 可能会对单次实验结果产生偏倚 5-6。通过多次平行实验 ， 基本可以剔除系统误差 。虽然不同存放时间的实验药释药曲线有所差异 ， 但是释药累积量及释药速率经方差分析 ，均差异无统计学意义 ， 表明在一定时间内的存放对药物释药透皮吸收无影响 。以利多卡因和丙胺卡因制成经皮吸收的复方利多卡因乳膏 ， 局部用药方便 、安全 。本研究证实受试乳膏在有效期内的不同存放时间段 ， 其透皮释放稳定 ， 与对照药物的透皮释药效果相似 。 DOI 103870/yydb201108008 参考文献 1 官仕杰 ， 闫小平 ， 毛超一 ， 等 微米大黄痤疮乳膏的透
24、皮吸收研究 J 中国中药杂志 ， 2008， 33( 10) : 12151217 2 王勇 ， 贾晓斌 ， 李霞 ， 等 复方香黄巴布膏体外透皮吸收研究 J 中成药 ， 2006， 28( 9) : 1254 3 虞瑞尧 5%恩纳霜在皮肤科临床的应用 J 中国新药杂志 ， 2000， 9( 9) : 608610 4 FLEISCHER A B， FORD P G How to minimize adverse eff-ects of topical anesthetics J Skin Aging， 1998， 6( 3) : 5461 5 张峰 ， 杨媚 ， 毛德香 月桂氮酮对利多卡因喷雾剂中利多卡因透皮吸收的影响 J 医药导报 ， 2010， 29( 1) : 3133 6 周建平 ， 钟鸣 ， 黄建华 尼莫地平透皮制剂的研究 J 中国药科大学学报 ， 2000， 31( 5) : 348351999医药导报 2011 年 8 月第 30 卷第 8 期
