1、1,气相色谱讲座 第一节 基础知识,2,气相色谱是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数（溶解度）的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配，使原来只有微小的性质差异产生很大的效果，而使不同组分得到分离。,1、气相色谱的分离原理,3,2、气相色谱的特点,气相色谱是色谱中的一种，就是用气体做为流动相的色谱法，在分离分析方面，具有如下一些特点： 、高灵敏度：可检出- 克的物质，可作超纯气体、高分子单体的痕迹量杂质分析和空气中微量毒物的分析。 、高选择性：可有效地分离性质极为相近的各种同分异构体和各种同位素。 、高效能：可把组分复杂的样品分离成单组分。,4
2、,2、气相色谱的特点,、速度快：一般分析、只需几分钟即可完成，有利于指导和控制生产。 、应用范围广：即可分析低含量的气、液体，亦可分析高含量的气、液体，可不受组分含量的限制。 、所需试样量少：一般气体样用几毫升，液体样用几微升或几十微升。 、设备和操作比较简单，仪器价格便宜。,5,凡是以气相作为流动相的色谱技术，通称为气相色谱。一般可按以下几方面分类： 、按固定相聚集态分类： （）气固色谱：固定相是固体吸附剂， （）气液色谱：固定相是涂在担体表面的液体。,3、气相色谱的分类,6,、按过程物理化学原理分类： （）吸附色谱：利用固体吸附表面对不同组分物理吸附性能的差异达到分离的色谱。 （）分配色谱
3、：利用不同的组分在两相中有不同的分配系数以达到分离的色谱。 （）其它：利用离子交换原理的离子交换色谱：利用胶体的电动效应建立的电色谱；利用温度变化发展而来的热色谱等等。,3、气相色谱的分类,7,、按固定相类型分类： （）柱色谱：固定相装于色谱柱内，填充柱、空心柱、毛细管柱均属此类。 （）纸色谱：以滤纸为载体， （）薄膜色谱：固定相为粉末压成的薄漠。 、按动力学过程原理分类：可分为冲洗法，取代法及迎头法三种。,3、气相色谱的分类,8,气相色谱法简单分析装置流程基本由四个部份组成： 、气源部分，、进样装置，、色谱柱，、检测器和记录器：FID（氢火焰离子化检测器）ECD（电子捕获检测器）TCD（热导
4、检测器）,4、气相色谱的分析装置,9,5、气相色谱基本概念和术语,、相、固定相和流动相：一个体系中的某一均匀部分称为相；在色谱分离过程中，固定不动的一相称为固定相；通过或沿着固定相移动的流体称为流动相。 、色谱峰：物质通过色谱柱进到鉴定器后，记录器上出现的一个个曲线称为色谱峰。 、基线：在色谱操作条件下，没有被测组分通过鉴定器时，记录器所记录的检测器噪声随时间变化图线称为基线。 、峰高与半峰宽：由色谱峰的浓度极大点向时间座标引垂线与基线相交点间的高度称为峰高，一般以h表示。色谱峰高一半处的宽为半峰宽，一般以 x表示。,10,5、气相色谱基本概念和术语,、峰面积：流出曲线（色谱峰）与基线构成之面
5、积称峰面积，用表示。 、死时间、保留时间及校正保留时间：从进样到惰性气体峰出现极大值的时间称为死时间，以td表示。从进样到出现色谱峰最高值所需的时间称保留时间，以tr表示。保留时间与死时间之差称校正保留时间。以d表示。 、死体积，保留体积与校正保留体积：死时间与载气平均流速的乘积称为死体积，以d表示，载气平均流速以c表示，d=tdxFc。保留时间与载气平均流速的乘积称保留体积，以r表示，r=trxFc。,11,5、气相色谱基本概念和术语,、保留值与相对保留值：保留值是表示试样中各组分在色谱柱中的停留时间的数值，通常用时间或用将组分带出色谱柱所需载气的体积来表示。以一种物质作为标准，而求出其他物
6、质的保留值对此标准物的比值，称为相对保留值。 、仪器噪音：基线的不稳定程度称噪音。 10、基流：氢焰色谱，在没有进样时，仪器本身存在的基始电流（底电流），简称基流 。,12,6、气相色谱的载气,1、作为气相色谱载气的气体，要求要化学稳定性好；纯度高；价格便宜并易取得；能适合于所用的检测器。 2、常用的载气有氢气、氮气、氩气、氦气、二氧化碳气等等。,13,7、载气的净化,1.所谓净化：就是除去载气中的一些有机物、微量氧、水分等杂质，以提高载气的纯度。 2.不纯净的气体作载气，可导致柱失效，样品变化，氢焰色谱可导致基流噪音增大，热导色谱可导致鉴定器线性变劣等，所以载气必须经过净化。 3.一般均采用
7、化学处理的方法除氧，如用活性铜除氧；采用分子筛、活性碳等吸附剂除有机杂质；采用矽胶，分子筛等吸附剂除水分。,14,8、试样的进样方法,色谱分离要求在最短的时间内，以“塞子”形式打进一定量的试样，进样方法可分为： 、气体试样：大致进样方法有四种： （）注射器进样，（）量管进样，（）定体积进样，（）气体自动进样。 一般常用注射器进样及气体自动进样。注射器进样的优点是使用灵活，方法简便，但进样量重复性较差。气体自动进样是用定量阀进样，重复性好，且可自动操作。 、液体试样：一般用微量注射器进样，方法简便，进样迅速。也可采用定量自动进样，此法进行重复性良好。 、固体试样：通常用溶剂将试样溶解，然后采用和
8、液体进样同样方法进样。也有用固体进样器进样的。,15,9、气相色谱的影响因素,、柱长，柱内径：一般讲，柱管增长，可改善分离能力，短则组分馏出的快些；柱内径小分离效果好，柱内径大处理量大，但柱内径过大，将导致担体不能均匀地分布在色谱柱中。分析用柱管一般内径为毫米，柱长为米。,16,、柱温：是一个重要的操作变数，直接影响分离效能和分析速度。选择柱温的根据是混合物的沸点范围，固定液的配比和鉴定器的灵敏度。提高柱温可缩短分析时间；降低柱温可使色谱柱选择性增大，有利于组分的分离和色谱柱稳定性提高，柱寿命延长。一般采用等于或高于数十度于样品的平均沸点的柱温为较合适，对易挥发样用低柱温，不易挥发的样品采用高
9、柱温。,9、气相色谱的影响因素,17,、载气流速：载气流速是决定色谱分离的重要原因之一。一般讲流速高色谱峰狭，反之则宽些，但流速过高或过低对分离都有不利的影响。流速要求要平稳，常用的流速范围每分钟在亳升之间。,9、气相色谱的影响因素,18,、固定相：固定相是由固体吸附剂或涂有固定液的担体构成。 （）固体吸附剂或担体粗细：一般采用目、目、目。当用同等长度的柱子，颗粒细的分离效率就要比粗的好些。 （）固定液含量：固定液含量对分离效率的影响很大，它与担体的重量比一般用。比例过大有损于分离，比例过小会使色谱峰拖尾。,9、气相色谱的影响因素,19,9、气相色谱的影响因素,、进样：一般讲进样快，进样量小，
10、进样温度高其分离效果好。对进液体样，速度要快，汽化温度要高于样品中高沸点组分的沸点值，一次汽化，保证色谱峰形不致展宽、使柱效高。当进样量在一定限度时，色谱峰的半峰宽是不变的。若进样量过多就会造成色谱柱超载。一般讲柱长增加四倍，样品的许可量增加一倍。对于常规分析，液体进样量为微升；气体进样量为、毫升。,20,第二节 气相色谱的操作规程,单位：福建省三明天泰制药有限公司 作者：殷勤红 QQ：7553556 日期：2005/03/21 E-mail:,21,一、 FID的操作步骤,1、按照所用色谱柱的老化条件充分老化色谱柱。 2、将色谱柱安装到FID检测器。 3、打开净化器上的载气开关阀，然后用检漏
11、液检漏，保证气密性良好 4、打开电源开关，根据分析需要设置柱温、进样温度和FID检测器温度（FID温度应大于100）。 5、打开净化器的空气、氢气开关阀，分别调节空气和氢气的流量为适当值。,22,一、 FID的操作步骤,6、待FID检测器的温度升高到100以上，按FIRE键，点燃FID检测器的火焰。 7、设定检测器的量程和衰减值。一般默认即可。 8、打开N2000工作站，待其电压值逐渐下降到0AU的时候即可进样。 9、进样结束后关机：先关闭氢气和空气的开关阀，然后降温，待柱箱温度低于80后才关闭氮气和电源开关。,23,二、 ECD的操作步骤,1、按照所用色谱柱的老化条件充分老化色谱柱。 2、将
12、色谱柱安装到ECD检测器。 3、打开净化器上的载气开关阀，然后用检漏液检漏，保证气密性良好 4、打开电源开关，根据分析需要设置柱温、进样温度和ECD检测器温度。,24,谢谢大家！,25,第三节 气相色谱注意事项及常见问题的处理方法,单位：福建省三明天泰制药有限公司 作者：殷勤红 QQ：7553556 日期：2005/03/21 E-mail:,26,一、 注意事项,(1)仪器应在规定的环境条件下工作，在某些环境条件不符合或不具备时，必须采取相应的措施。仪器按操作规程认真细心地进行操作。 (2)用任意一种检测器，启动仪器前应先通上载气，特别是在开热导池电源开关时，必须检查气路是否接在热导上，否则
13、当打开开关时，就有把钨丝烧断的危险。 (3)仪器的汽化加热电路接线内直接接有220V电压，因此只有在主机关闭时才能装接插头座，否则将烧毁接线及电子元件。,27,一、 注意事项,(4)使用“氢焰”时在氢火焰已点燃后，必须将点火开关拨至下面，不然放大器将无法工作。 (5)由于仪器出厂时，层析柱内担体所涂固定液为邻苯二甲酸二壬脂，其使用温度不得超过130。因此在开机测试时，应特别注意，防止温度过高使固定液蒸发而影响检测器工作。 (6)仪器测温是用镍铬铐铜热电偶和测温毫伏表完成的，层析室或汽化器的实际温度应为毫伏表指示温度加上室温的和。由于环境温度的变化及仪器壁板温度的变化，会造成测温的误差，仪器在高
14、温工作时，误差就较大。仪器长期工作时，由于仪器内部温度的升高，也会造成误差。为此，在仪器的左边侧面备有测温孔，以便用水银温度计直接测得层析室精确温度。,28,一、 注意事项,(7)稳压阀和针形阀的调节须缓慢进行。稳压阀只有在阀前后压差大于4.9104Pa（0.5kgf/cm2）的条件下才能起稳压作用。在稳压阀不工作时，必须放松调节手柄(顺时针转动)，以防止波纹管因长期受力疲劳而失效。针形阀不工作时则相反，应将阀门处于“开”的状态(逆时针转动)，防止阀针密封圈粘贴在阀门口上。,29,一、 注意事项,(8)气体钢瓶压力低于1.47106 Pa（15kgf/cm2）时，应停止使用。氢气和氮气是检测器
15、常用的载气，它们的纯度应在99.99以上。 (9)主机及记录仪要接地良好，记录笔走动时，不要改变衰减，以免线路过载。仪器使用完毕要用仪器罩罩好。 (10)仪器的预热，稳定时间约为四小时，能适应24小时连续工作，一般在正常情况下，能连续工作一周以上。,30,二 、 毛细管常见问题的解决,一、峰丢失 可能的原因及应采用的排除方法 1.注射器有毛病，用新注射器验证。 2.未接入检测器，或检测器不起作用，检查设定值 3.进样温度太低，检查温度，并根据需要调整 4.柱箱温度太低，检查温度，并根据需要调整 5.无载气流，检查压力调节器，并检查泄漏，验证柱进品流速 6.柱断裂，如果柱断裂是在柱进口端或检测器
16、末端，是可以补救的，切去柱断裂部分，重新安装,31,二 、毛细管常见问题的解决,二、前沿峰 1.柱超载，减少进样量 2.两个化合物共洗脱，提高灵敏度和减少进样量，使温度降低10-20度，以使峰分开 3.样品冷凝，检查进样口和柱温，如有必要可升温 4.样品分解，采用失活化进样器衬管或调低进样器温度,32,二 、毛细管常见问题的解决,三、拖尾峰 1.进样器衬套或柱吸附活性样品：更换衬套。如不能解决问题，就将柱进气端去掉12圈，再重新安装 2.柱或进样器温度太低：升温（不要超过柱最高温度）。进样器温度应比样品最高沸点高25度 3.两个化合物共洗脱：提高灵敏度，减少进样量，使温度降低1020度，以使峰
17、分开 4.柱损坏：更换柱 5.柱污染：从柱进口端去掉12圈，再重新安装,33,二 、毛细管常见问题的解决,四、只有溶剂峰 1.注射器有毛病：用新注射器验证。 2.不正确的载气流速（太低）：检查流速，如有必要，调整之 3.样品太稀：注入已知样品以得出良好结果。如果结果很好，就提高灵敏度或加大注入量。 4.柱箱温度过高：检查温度，并根据需要调整 5.柱不能从溶剂峰中解析出组分：将柱更换成较厚涂层或不同极性 6.载气泄漏：检查泄漏处（用肥皂水） 7.样品被柱或进样器衬套吸附：更换衬套。如不能解决问题，就从柱进口端去掉12圈，并重新安装,34,二 、毛细管常见问题的解决,五、宽溶剂峰 1.由于柱安装不
18、当，在进样口产生死体积：重新安装柱。 2.进样技术差（进样太慢）：采用快速平稳进样技术。 3.进样器温度太低：提高进样器温度。 4.样品溶剂与检测相互影响（二氯甲烷/ECD）：更换样品溶剂。 5.柱内残留样品溶剂：更换样品溶剂 6.隔垫清洗不当：调整或清洗 7.分流比不正确（分流排气流速不足）：调整流速,35,二 、毛细管常见问题的解决,六、假峰 1.柱吸附样品，随后解吸：更换衬管，如不能解决问题，就从柱进样口端去掉12圈，再重新安装。 2.注射器污染：用新注射器及干净的溶剂试一试，如假峰消失，就将注射器冲洗几次。 3.样品量太大：减少进样量。 4.进样技术差（进样太慢：采用快速平稳的进样技术
19、,36,二 、毛细管常见问题的解决,七、过去工作良好的柱出现未分辨峰 1.柱温不对：检查并调整温度 2.不正确的载气流速：检查并调整流速。 3.样品进样量太大：减少样品进样量 4.进样技术水平太差(进样太慢)：采用快速平稳进样技术。 5.柱和衬套污染：更换衬套。如不能解决问题，就从柱进口端去掉12圈，并重新安装,37,二 、毛细管常见问题的解决,八、基线不规则或不稳定 1.柱流失或污染：更换衬套。如不能解决问题，就从柱进口端去掉12圈，并重新安装。 2.检测器或进样器污染：清洗检测器和进样器 3.载气泄漏：更换隔垫，检查柱泄漏。 4.载气控制不协调：检查载所源压力是否充足。如压力500psi，
20、请更换气瓶。,38,二 、毛细管常见问题的解决,5.载气有杂质或气路污染：更换气瓶，使用载气净化装置清洁金属管。 6.载气流速不在仪器最大/最小限定范围之内（包括FID用氢气和空气）：测量流速，并根据使用手册技术指标，予以验证。 7.检测器出毛病：参照仪器使用手册进行检查。 8.进样器隔垫流失：老化或更换隔垫,39,二 、毛细管常见问题的解决,九、同一根柱保留时间长短不一 1.柱温太低或太高，检查并调整柱温。 2.载气流速太低或太高，在柱出口处用适当的，经标定气源测量流速。 3.样品器隔垫或柱泄漏，如必要，请检查并修复。 4.柱污染或损坏，重新老化或更换柱,40,二 、毛细管常见问题的解决,5.样品超载，减少样品进样量。 6.记录仪出毛病，检查记录仪。 7.载气控制不协调，检查载气源，看压力是否足够。如压力500psi，请更换。,41,谢 谢！,
