1、 第 1 页 共 12 页 课题 1 DNA 的粗提取与鉴定一、单项选择题1下列各项不适宜选作 DNA 提取材料的是( )A洋葱表皮细胞 B鲜豌豆种子C人的成熟红细胞 D猪肝解析:人的成熟红细胞不含 DNA,不适宜用来提取 DNA。答案:C2DNA 在下列浓度的 NaCl 溶液中,溶解度最低的是 ( )A2 molL 1 B0.015 molL 1C0.14 molL 1 D5 molL 1答案:C3在混合物中提取 DNA 分子的基本思路是( )A根据各种大分子的理化性质的差异B根据各种大分子的理化性质的共性C根据各种大分子在细胞内的功能D根据各种大分子的结构和在细胞内的位置解析:提取生物大分
2、子的基本思路是选用一定的物理或化学方DNA 和蛋白质技术第 2 页 共 12 页 法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。就 DNA 分子的粗提取而言,就是利用了 DNA 与 RNA、蛋白质 和脂质等在物理和化学性质方面的差异进行分离的。答案:A4在利用鸡血进行“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述正确的是( )A用蒸馏水将 NaCl 溶液的物质的量浓度调至 0.14 mol/L,滤去析出物B调节 NaCl 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质C将丝状物溶解在物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色D用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤
3、相同解析:用蒸馏水将 NaCl 溶液物质的量浓度调至 0.14 mol/L,使DNA 析出;调节 NaCl 溶液的物质的量浓度 为 2 mol/L,过滤可除去不溶的杂质,木瓜蛋白酶能够分解蛋白质;在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺试剂会被染成蓝色;如果实验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂瓦解细胞膜。答案:B5在 DNA 析出与鉴定实验中加入酒精的目的是( )A溶解 DNAB除去 DNA 中所含的杂质第 3 页 共 12 页 C析出蛋白质D稀释溶液,降低浓度解析:DNA 不溶于体积分数为 95%的酒精溶液而蛋白质可溶,从而把蛋白质和 DNA 分开。答案:B6下列叙述中错误的是( )A改变 NaCl
4、溶液的浓度只能使 DNA 溶解而不能使其析出B在沸水浴中,DNA 遇二苯胺试剂会呈现蓝色C加盐和加酒都能抑制微生物的生长D密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防杂菌污染解析:当 NaCl 溶液的浓度低于 0.14 mol/L 时,随浓度的升高,DNA 的溶解度降低;当 NaCl 溶液的浓度高于 0.14 mol/L 时,随浓度的升高,DNA 的溶解度升高; NaCl 溶液的浓度为 0.14 mol/L 时,DNA 的溶解度最低。因此,改 变 NaCl 溶液的浓度可以使其析出。答案:A7下列关于“DNA 粗提取与鉴定实验”的叙述,正确的是( )第 4 页 共 12 页 A洗涤剂能瓦解细胞膜并增加 DN
5、A 在 NaCl 溶液中的溶解度B将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C常温下菜花匀浆中有些酶类会影响 DNA 的提取D用玻棒缓慢搅拌滤液会导致 DNA 获得量减少解析:洗涤剂可瓦解植物细胞膜,有利于释放 DNA,但不能增加 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度,A 项错误 ;含 DNA 的丝状物应先溶解在物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液中,再用二苯胺试剂在沸水浴条件下检测,冷却后变成蓝色,B 项错误;常温下菜花匀浆中某些酶如 DNA 水解酶 ,其活性 较高,会影响 DNA 的提取,C 项正确;用玻棒缓慢搅拌滤液可防止 DNA 分子断裂,但不影响 DNA 的提取
6、量,D 项错误 。答案:C8下列操作中,对 DNA 的提取量影响最小的是( )A使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出 DNA 等核物质B搅拌时,要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌C在“析出 DNA 黏稠物 ”时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中黏稠物不再增加第 5 页 共 12 页 D在用酒精沉淀 DNA 时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却解析:DNA 存在于细胞核中, B 选项中的操作对 DNA 几乎没有影响,而其他 3 项的操作对象直接是 DNA,自然相比起来 B 的影响最小。答案:B9DNA 粗提取的实验材料中有三次过滤:(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液;(2) 过滤含黏稠物的 0.
7、14 mol/L NaCl 溶液;(3)过滤溶解有 DNA 的 2 mol/L NaCl 溶液。以上三次过滤分别为了获得( )A含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA 的滤液B含核物质的滤液、滤液中 DNA 黏稠物、含 DNA 的滤液C含核物质的滤液、滤液中 DNA 黏稠物、纱布上的 DNAD含较纯的 DNA 滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA 的滤液解析:用蒸馏水稀释鸡血细胞液,使血细胞的细胞膜、核膜破裂,释放出核物质,此时过滤只能得到含 DNA 和其他物质如蛋白质的滤液,这种滤 液必须经过实验中其他步骤得相继处理,方能得到较纯的DNA。DNA 在 0.14 mol/L NaCl 溶液中溶
8、解度最低,成丝状黏稠物,可经过滤留在纱布上。答案:A第 6 页 共 12 页 10若从植物细胞中提取 DNA,发现实验效果不好,如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等。其不可能的原因是( )A植物细胞中 DNA 含量低B研磨不充分C过滤不充分D95%冷酒精的量过少解析:研磨不充分会使细胞核内的 DNA 释放不完全,提取的DNA 量变少;过滤不充分,也会 导致提取的 DNA 量过少;若用于沉淀 DNA 的酒精量过少,也会导致 DNA 的沉淀量少。 DNA 量过少,则实验效果就差。答案:A二、双项选择题11下列与析出 DNA 黏稠物有关的叙述,错误的是( )A操作时向物质的量浓度为 2
9、 mol/L 的 NaCl 溶液中缓缓滴加蒸馏水,降低 DNA 的溶解度B加蒸馏水后,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证 DNA 分子完整第 7 页 共 12 页 C加蒸馏水可同时降低 DNA 和蛋白质的溶解度,两者均可析出D当丝状黏稠物不再增加时,此时 NaCl 的物质的量浓度相当于 0.2 mol/L解析:DNA 在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最小,而蛋白质的溶解度随 NaCl 溶液浓 度的减小而增大。向物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液中加蒸馏水能降低 DNA 的溶解度和析出 DNA,能增加蛋白 质的溶解度。答案:CD12 “DNA 的粗提取和鉴
10、定”实验的叙述,不正确的是( )A利用 DNA 能溶于酒精溶液,而蛋白质不溶于酒精溶液,可将 DNA 与蛋白质直接分离B利用高温能使蛋白质变性,却对 DNA 没有影响的特性,可将 DNA 与蛋白质分离C在 DNA 滤液中加入一定量蛋白酶,可将 DNA 与蛋白质分离第 8 页 共 12 页 D在溶有 DNA 的 2 mol/L NaCl 溶液中缓缓加入蒸馏水,搅拌后取析出物进行以后实验解析:根据 DNA 不溶于酒精溶液,某些蛋白质则溶于酒精的特点可以将 DNA 与蛋白 质进一步分离,而不是直接分离开。在溶有DNA 的 2 mol/L NaCl 溶液中缓缓加入蒸馏水,能使 DNA 析出。温度过高不
11、但使蛋白质变性,而且也能使 DNA 变性,利用高温分离DNA 与蛋白质时,必 须严 格控制温度范围。答案:AB三、非选择题13下图为“DNA 的粗提取与鉴定”实验装置:(1)实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡全血,主要原因是鸡血细胞液中有较高含量的_。(2)在图 A 所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是_,通过图 B 所示的步骤取得滤液,再在溶液第 9 页 共 12 页 中加入 2 mol/L 的 NaCl 溶液的目的是_;图C 所示实验步骤中加蒸馏水的目的是_。解析:图 A、B、C 所示 为本实验的三个关键 步骤。图 A 通过添加蒸馏水,使血细胞大量吸水而致最终破裂,并释放出胞内物。图 B通过纱布
12、过滤使血细胞释放出的 DNA 滤入收集的滤液中( 将大量胶状物滤出),再在滤液中加入 2 mol/L 的 NaCl 溶液使 DNA 的溶解度增加。图 C 在 DNA 浓盐 溶液中加入蒸馏水( 大量) ,可使溶液的 NaCl浓度降至较低,由于 DNA 在较低浓度的 NaCl 溶液中溶解度很低(在0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低,浓度再变小则 DNA 溶解度将增大) ,使 DNA 低渗析出,经过滤等手段可以收集到 DNA。答案:(1)DNA (2)使血细胞破裂 使滤液中的 DNA 溶于浓NaCl 溶液 使 DNA 析出14某生物兴趣小组开展 DNA 粗提取的相关探究活动。具体步
13、骤如下:材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各 2 份,每份 10 g。剪碎后分成两组,一组置于 20 、另一组置于20 条件下保存24 h。DNA 粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入 15 mL 研磨液,第 10 页 共 12 页 充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。第二步:先向 6 只小烧杯中分别注入 10 mL 滤液,再加入 20 mL 体积分数为 95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步:取 6 支试管,分别加入等量的 2 mol/L NaCl 溶液溶解上述絮状物。DNA 检测:在上述试管中各加入 4 mL 二苯胺试剂。混合均
14、匀后,置于沸水中加热 5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如表。材料保存温度 花菜 辣椒 蒜黄20 20 (注:“ ”越多表示蓝色越深)分析上述实验过程,回答下列问题:(1)该探究性实验课题名称是_。第 11 页 共 12 页 (2)第二步中“缓缓地”搅拌,这是为了减少_。(3)根据实验结果,得出结论并分析。结论 1:与 20 相比,相同实验材料在20 条件下保存,DNA 的提取量较多。结论2:_。针对结论 1.请提出合理的解释:_。(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和 DNA 均不相溶,且对 DNA 影响极小。为了进一步提高 DNA 纯度,依据氯仿的特性,在 DNA
15、粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是:_ 。然后用体积分数为 95%的冷酒精溶液使 DNA 析出。解析:根据步骤中选择了不同的材料,在不同条件下的处理,可判断出本实验的目的是探究不同材料和不同条件对 DNA 提取量的影响,是 DNA 粗提取与 鉴定实验的应用;缓缓搅拌能够有效防止因DNA 断裂而影响实验结 果;结论可以从表格得到的提取量得出,低温下获得的 DNA 含量较 多是因为低温抑制了相关酶的活性,使 DNA第 12 页 共 12 页 降解速度减慢;依据氯仿的特性,可以在第三步获得的溶液中加入等量氯仿,静置并吸取蛋白质含量较少的 DNA 上清液,获得纯度更高的 DNA。答案: (1)探究不同材料和不同保存温度对 DNA 提取量的影响(2)DNA 断裂(3)等质量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄提取的 DNA 量最多低温抑制了相关酶的活性,DNA 降解速度慢(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液