1、实验十三:弧菌的鉴定,实验目的,掌握弧菌的基本特征和鉴定程序 掌握弧菌分类的鉴别试验,弧菌,弧菌属:非O1型霍乱弧菌,副溶血弧菌 气单胞菌属:亲水气单胞菌,弧菌的鉴定程序,见检验程序,实验内容,一、(做副溶血弧菌和亲水气单胞菌的染色,尤其是副溶血弧菌在3.5%琼脂上的多形态表现)、氧化酶试验。 二、接种弧菌生化反应管:,各种盐浓度的肉汤管(无盐, 3.5%,)。 三、观察霍乱弧菌和副溶血弧菌在弧菌选择性培养基TCBS上的生长表现。观察霍乱弧菌示教片。,霍乱弧菌,、培养特点和菌落观察:霍乱弧菌在碱性培养基上生长良好,因此常用碱性蛋白胨水(PH8.4)增菌,在选择性培养基TCBS(硫代硫酸盐-柠檬
2、酸盐-胆盐-蔗糖琼脂)上菌落中等大小,光滑,湿润,呈黄色,菌落周围也呈黄色。 形态观察:示教片 鉴定要点:临床水样便直接镜检可见“鱼群样”细菌运动,直接滴加霍乱抗血清,可见运动受限(制动试验),GS染色为阴性弧菌形态,在碱性蛋白胨水中生长良好,在TCBS上呈黄色菌落,血清学凝集鉴定到型。,副溶血弧菌,、培养特点和菌落观察:副溶血弧菌在普通平板上生长不良,在高盐琼脂上生长良好,菌落较大,在选择性培养基TCBS(硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂)上菌落中等大小,光滑,湿润,不发酵蔗糖,因此呈绿色或蓝绿色。 形态观察:挑取高盐培养基上的菌落做GS,可见革兰阴性多形态菌。 鉴定要点:氧化酶阳性,具有嗜盐性,在3.5%-7%的高盐培养基上生长良好。KIA上为K/A型。,亲水气单胞菌,、培养特点和菌落观察:亲水气单胞菌在普通平板上生长良好,在高盐琼脂和TCBS上不长,菌落中等大小,光滑,湿润。 形态观察:挑取普通培养基上的菌落做GS,可见革兰阴性杆菌形态。 鉴定要点:氧化酶阳性,在无盐肉汤中生长,在高盐肉汤中不长,KIA上为K/A型。,霍乱弧菌,