1、第一章 绪论授课时数：2 学时教学目标掌握医学遗传学概念及其研究对象掌握遗传病概念及分类教学重难点 遗传病概念及分类授课内容一、医学遗传学概述医学遗传学是运用遗传学的原理和方法研究人类遗传性疾病的病因、病理、诊断、预防和治疗的一门学科，是遗传学的一个重要分支。医学遗传学的研究对象是遗传病，与其它临床学科类似，医学遗传学是研究遗传病的诊断、发病机理、防治及预后，但由于遗传病的特殊性，其研究重点主要在发病机理和预防措施。本课程主要介绍医学遗传学的三个主干分支（医学分子遗传学、医学细胞遗传学和医学群体遗传学）的原理和应用。二、遗传病概念及分类（一）遗传病概念及其特征1. 遗传病概念：遗传病(gene
2、tic diseases)是由于遗传物质改变而导致的疾病。遗传物质是存在于细胞内的、决定特定性状的基因。2遗传病的特征：在有血缘关系的个体间，由于遗传继承，有一定的发病比例；在无血缘关系的个体间，尽管属于同一家庭，但无发病者；有特定的发病年龄和病程；同卵双生发病一致率远高于异卵双生。（二）遗传病与下列疾病的关系：1. 先天性疾病：出生前即已形成的畸形或疾病。先天性疾病可以是遗传病，例如先天愚型是由于染色体异常引起的，出生时即可检测到临床症状，是先天性疾病；但先天性疾病又不都是遗传病，有些先天性疾病是由于孕妇在孕期受到外界致畸因素的作用而导致胚胎发育异常，但并没有引起遗传物质的改变，因而不是遗传
3、病。2后天性疾病（acquired diseases）：出生后逐渐形成的疾病。后天性疾病也可以是遗传病，有些遗传病患者尽管在受精卵形成时就得到了异常的遗传物质，但要到一定年龄才表现出临床症状，如假性肥大型肌营养不良症患者通常要到 4-5 岁才出现临床症状。因此，先天性疾病不一定都是遗传病， 后天性疾病不一定不是遗传病。3家族性疾病（familial diseases）：表现出家族聚集现象的疾病，即在一个家庭中出现一个以上患者。由于遗传病的遗传性，通常能观察到家族聚集现象；但家族性疾病并不都是遗传病，因为同一家庭成员生活环境相同，因此，可以因为相同环境因素的影响而患相同疾病。如由于缺碘引起的甲状
4、腺功能低下。4散发性疾病（sporadic diseases）：无家族聚集性的疾病，即在家系中只出现一名患者。尽管遗传病具有遗传性，但由于特定遗传病在子代当中有一定的发病比例，加之遗传病患者可以是由于新发生的遗传物质改变所致，所以遗传病也可以是散发性疾病。因此，家族性疾病不一定都是遗传病，散发性疾病不一定不是遗传病。（三）遗传病分类：经典医学遗传学将遗传病分为染色体病、单基因病和多基因病三大类。现代医学遗传学将遗传病分为染色体病、单基因病、多基因病、线粒体遗传病和体细胞遗传病 5 类。 1染色体病（chromosomal disorders）：由于染色体数目或结构异常所引起的疾病，如先天愚型。
5、2单基因病（single gene disorders）：由于单个基因突变所引起的疾病。这类疾病的遗传符合 Mendel 遗传规律。单基因病又可根据致病基因所在的染色体及致病基因的性质分为：常染色体显性遗传病（autosomal dominant diseases，AD）：致病基因位于常染色体上，致病基因为显性基因；常染色体隐性遗传病（autosomal recessive diseases，AR）：致病基因位于常染色体上，致病基因为隐性基因；X-连锁显性遗传病（X-linked dominant disorders，XD）：致病基因位于 X 染色体上，致病基因为显性基因；X-连锁隐性遗传病（
6、X-linked recessive disorders，XR）：致病基因位于 X染色体上，致病基因为隐性基因；Y 连锁遗传病（Y-linked diseases）：致病基因位于 Y 染色体上。3多基因遗传病（polygenic diseases）：由多个微效基因与环境因素共同作用所引起的疾病。4线粒体遗传病（mitochondrial diseases）：由于线粒体基因突变所引起的疾病，呈母系传递。5体细胞遗传病（somatic cell genetic disorders）：由于体细胞遗传物质改变所引起的疾病。小结一、医学遗传学概述二、遗传病概念及分类第二章 人类染色体授课时数：2 学时教
7、学目标1、掌握人类染色质的组成和结构2、掌握人类染色质与染色体的对应关系3、掌握细胞分裂中的染色体行为教学重难点1、人类染色质与染色体的对应关系2、人类染色质的组成和结构授课内容一、人类染色质的组成及结构（一）染色质的概念：细胞核内能被碱性染料染色的物质，称为染色质（二）染色质组成：染色质由 DNA、组蛋白、非组蛋白和少量 RNA 组成。DNA 与组蛋白的重量比比较稳定，接近于 11，非组蛋白的种类及含量随不同细胞而异。（三）染色质结构：染色质是间期核中遗传物质的存在形式，由许多重复的结构单位组成，这些结构单位称为核小体。核小体是由一条 DNA 双链分子串联起来，形似一串念珠。每个核小体分为核
8、心部和连接区二部分。核心部是由组蛋白 H2A、H2B、H3和 H4 各二个分子形成的组蛋白八聚体及围绕在八聚体周围的 DNA 组成，这段DNA 约 146bp，绕八聚体外围 1.75 圈。两个核心部之间的 DNA 链称为连接区。这段 DNA 的长度变异较大，组蛋白 H1 位于连接区 DNA 表面。（四）核小体包装成染色质与染色体由直径为 2nm 的双链 DNA 分子形成直径为 10nm 核小体细丝后，DNA 的长度已压缩了 7 倍。核小体进一步螺旋化，形成外径为 30nm 的染色质纤维（螺线管），其长度为 DNA 的 1/42。当细胞进入分裂期，染色质进一步螺旋折叠，形成染色体。中期染色体长度
9、约为 DNA 长度的 10-5。二、细胞分裂过程中的染色体行为（一）有丝分裂：有丝分裂是体细胞增殖方式，分为间期和分裂期，分裂期又分为前、中、后和末四个时期。（二）减数分裂：是生殖细胞发生过程中的一种特殊分裂方式，DNA 复制一次，细胞连续分裂两次，因此，由一个细胞形成 4 个子细胞，子细胞的遗传物质是母细胞的一半。减数分裂由两次连续分裂构成：1、减数分裂 I：2、减数分裂 II：间期很短，不进行 DNA 复制，在第二次减数分裂中期，着丝粒纵裂，两条姊妹染色单体分开，分别移向细胞两极。三、细胞分裂中期染色体形态结构及分类：四、人类染色体核型和组型：（一）染色体核型1、 概念：是一个细胞内的全部
10、染色体按其大小和形态特征排列所构成的图像。对这种图像进行分析称为核型分析。2、 核型描述： （二）人类染色体分组：根据着丝粒位置和染色体大小，将 22 对常染色体由大到小依次命名为 1 至 22 号，并将人类染色体分为 7 组，分别用大写字母A-G 表示。A 组：包括 1-3 号染色体，1 号和 3 号为中央着丝粒染色体，2 号为亚中着丝粒染色体；B 组：包括 4-5 号染色体，均为亚中着丝粒染色体；C 组：包括 6-12 号和 X 染色体，均为亚中着丝粒染色体，X 染色体大小界于 7 号和 8 号染色体之间；D 组：包括 13-15 号染色体，为近端着丝粒染色体，可以有随体；E 组：包括 1
11、6-18 号染色体，16 号为中央着丝粒染色体，17 和 18 号为亚中着丝粒染色体；F 组：包括 19-20 号染色体，为中央着丝粒染色体；G 组：包括 21-22 号和 Y 染色体，为近端着丝粒染色体，21、22 号染色体可以有随体。Y 染色体的大小变异较大，大于 21 和 22 号染色体，其长臂常常平行靠拢。五、性染色质与性染色体（一）X 染色体失活女性细胞中含有两条 X 染色体，而男性细胞中只含有一条 X 染色体，但女性 X 染色体基因的产物并不比男性多。对此，英国遗传学家 Mary Lyon 在 1961年首先提出了“X 失活假说” ，或称为“Lyon 假说” ，其要点是：1） 在间
12、期细胞中，女性的两条 X 染色体中，只有一条 X 染色体有转录活性，另一条 X 染色体无转录活性，呈固缩状，形成 X 染色质。这样，在含有 XX 的细胞和 XY 的细胞中，其 X 染色体基因产物的量基本相等，此称为剂量补偿。不论细胞内有几条 X 染色体，只有一条 X 染色体是具有转录活性的，其余的 X 染色体均失活形成 X 染色质。2） 失活发生在胚胎发育早期。3） 失活是随机的，即失活的 X 染色体可以来自父方也可以来自母方，但一个细胞中的某条 X 染色体一旦失活，由该细胞增殖而来的所有子细胞都具有相同的失活 X 染色体。X 染色体的失活在遗传上和临床上有三个意义：1） 剂量补偿：由于只有一
13、条 X 染色体有活性，故男女 X 染色体基因产物的量相同。2） 杂合子表型的变异：由于 X 染色体失活是随机的，因此，在杂合子的女性中具有活性的某一特征等位基因的比例就可能是不同的，结果显示出不同的表型。3） 嵌合型：由于女性 X 染色体中有一条失活，所以在每一细胞中特定位点上的两个等位基因只有一个表达。结果杂合子表现为只表达两个等位基因之一的细胞嵌合分布。在小鼠中，X 染色体上带有白色和黑色毛色基因的个体表现为白色和黑色镶嵌现象。Lyon 假说可以解释许多遗传现象，但经典的 Lyon 假说不能解释何以 XO 的Turner 综合征患者会有各种异常；又何以多 X 患者还会有各种异常，而且 X
14、染色体越多症状越严重。可见为保证正常的发育，至少在胚胎发育的某一时期需要双份 X 染色体基因。近几年的研究结果对 Lyon 假说可以作如下补充：1、局部失活：并非所以 X 染色体基因都失活，例如：位于 X 染色体短臂末端的基因在 Y 染色体上有相同的基因，该区称为拟常染色体区，存在于 PAR 的基因不失活。另外，在 X 染色体长、短臂上都有一些基因不失活，如 Xg 血型基因，STS（类固醇硫酸酯酶）基因等。2、非随机失活：1）正常的两条 X 染色体在胚胎外膜中父方的 X 染色体优先失活；2）当 X 染色体存在缺失时，缺失的 X 染色体优先失活；3）当 X 与常染色体平衡易位时，正常的 X 染色
15、体优先失活。3、在生殖细胞发生过程中，失活 X 染色体恢复活性。（二）X 染色质1、形态：正常女性间期细胞的核膜边缘大小约 1um 的浓染染色质块。2、来源：失活的 X 染色体3、数目：X 染色体数-14、临床应用：作为快速性别鉴定的手段之一。（三）Y 染色质1、形态：男性间期细胞被荧光染料染色后在细胞核内出现的强荧光小体。2、来源：Y 染色体长臂远端部分异染色质。3、数目：与 Y 染色体数相同。4、临床应用：快速性别鉴定。（四）性别决定与性分化1、性别决定基因2、性分化性分化包括许多受遗传因素调节的发育步骤。性腺、生殖管道和外生殖器均从未分化的原始状态而来。在人类孕期第 6 周末，在胚胎的原
16、基生殖细胞迁移形成初期未分化的性腺，此期的性腺可分为内部的髓质和外部的皮质。小结一、人类染色质的组成及结构二、细胞分裂过程中的染色体行为三、细胞分裂中期染色体形态结构及分类：四、人类染色体核型和组型：第三章 人类染色体畸变授课时数：2 学时教学目标1、掌握人类染色体数目畸变的类型2、掌握三体和单体发生机制3、掌握常见结构畸变的发生机制及描述方式教学重难点1、人类染色体数目畸变的类型2、三体和单体发生机制授课内容第三章 人类染色体畸变 一、染色体数目畸变正常生殖细胞中的染色体称为一个染色体组（n） ，在人类 n=23。正常体细胞含有两个染色体组，称为二倍体（2n） 。正常二倍体在数量上（整组或整
17、条）的增加或减少，称为染色体数目畸变。其中整组染色体的增减称为整倍性变异，个别染色体数目的增加或减少称为非整倍性变异。（一）整倍性变异多倍体：如果体细胞的染色体不是由两个染色体组，而是由两个以上染色体组组成，称为多倍体。1、三倍体：细胞中有三个染色体组，核型为 69，XXX 或 69，XXY 或69，XYY。三倍体的形成原因一般认为可能是由于：1）双雄受精，即同时有两个精子与卵子受精，可形成 69，XXX、69，XXY 和 69，XYY 三种类型的受精卵；2）双雌受精，即第二次减数分裂时，次级卵母细胞由于某种原因未形成第二极体，因此，原来应分给第二极体的那一组染色体仍留在卵子内，这样的卵子与一
18、个精子受精后，即可形成核型为 69，XXY 或 69，XXX 的受精卵。2、四倍体（：细胞内具有 4 个染色体组，临床上更罕见。四倍体形成的原因，一是核内复制，一是核内有丝分裂。核内复制是指在一次细胞分裂中，染色体不是复制一次，而是复制两次，每条染色体形成四条染色单体。这时染色体两两平行排列在一起，其后经过正常的分裂中期、后期和末期，形成的两个子细胞均为四倍体细胞。核内有丝分裂是体细胞染色体正常复制一次，但至分裂中期时核膜仍未破裂消失，也无纺锤丝形成和无后期和末期的胞质分裂，结果细胞内的染色体不是二倍体而成为四倍体。（二）非整倍性变异1、 亚二倍体：体细胞内染色体数目少于 46 条。最常见的亚
19、二倍体是单体（monosomy） ，即某号染色体只有一条。如 21 单体的细胞内只有一条第 21 号染色体，核型表示为：45，XX，-21 或 45，XY，-21。2、 超二倍体：细胞内染色体数目大于 46 条。最常见的超二倍体是三体，即某号染色体有三条。如 21 三体的体细胞内含有三条 21 号染色体，核型表示为：47，XX，+21 或 47，XY，+21。3、 非整倍体形成机理： 非整倍体的产生原因多数是在细胞分裂时，由于染色体不分离、丢失而引起的。1） 染色体不分离：在细胞分裂进入中、后期时，如果某一对同源染色体或两姐妹染色单体未分别移向两极，却同时进入一个子细胞核中，结果细胞分裂后形成
20、的两个子细胞中，一个染色体数目增多，另一个则染色体数目减少。这一过程即称染色体不分离。染色体不分离可发生于配子形成时的减数分裂过程中，称减数分裂不分离，也可发生于体细胞有丝分裂过程中，称有丝分裂不分离。减数分离不分离：减数分裂包括两次分裂。如果后期 I 发生染色体不分离，所形成的成熟配子中，1/2 将有 n+1 条染色体，1/2 将有 n-1 条染色体，这种染色体异常的配子与正常配子受精，可产生三体（2n+1）和单体（2n-1） 。如果后期 II 发生不分离，所形成的成熟配子中，1/2 将有 n 条染色体，1/4 将有 n+1条染色体，1/4 将有 n-1 条染色体。受精后，1/2 将为二倍体
21、（2n） ，1/4 将为三体（2n+1） ，1/4 将为单体（2n-1） 。 有丝分裂不分离：受精卵在胚胎发育的早期阶段卵裂期的细胞分裂中，如果发生某一染色体的姐妹染色单体不分离，将导致嵌合体的产生。嵌合体）是指一个个体同时存在两种或两种以上核型的细胞系。嵌合体个体中各细胞系的类型和数量比例，取决于发生染色体不分离的时期。如果染色体不分离发生在受精卵的第一次卵裂时期，则将形成一个细胞系为超二倍体（47）和一个细胞系为亚二倍体（45）的嵌合体。如果染色体不分离发生在第二次卵裂以后，将形成三个细胞系的嵌合体（47/46/45 嵌合体） ，而且染色体不分离发生的时期越晚，正常二倍体细胞所占比例越大，
22、异常细胞系比例就越小，临床症状就相对较轻 2）染色体丢失：染色体丢失是细胞分裂时在中、后期过程中，某一染色体的着丝粒未与纺锤丝相连，不能被牵引至某一极参与新细胞核的形成；或某一染色体在向一极移动时，由于某种原因引致行动迟缓，发生后期延迟，也不能参与新细胞核的形成，滞留在细胞质中，最后分解消失，结果某一细胞即丢失了一条染色体而成为亚二倍体。二、染色体结构畸变（一）染色体结构畸变产生基础导致染色体发生结构畸变的基础是断裂及断裂后的重接。如果一条染色体发生了断裂，随后在原位重接，称为愈合或重建，将不引起遗传效应。如果染色体发生断裂后，未在原位重接，这就引起染色体结构畸变。（二）染色体结构畸变的描述方
23、法：染色体结构畸变的表示方法有两种 1、简式：在这一方式中，染色体的结构畸变只用断裂点来表示。2、繁式： 在这一方式中，对染色体的结构畸变用改变了的染色体的带纹组成来描述。（三）常见的染色体结构畸变 1、末端缺失2、中间缺失3、环状染色体，在中、后期就会形成带有两个着丝粒的大的环状染色体。因后期着丝粒向不同的方向迁移，染色体环就会被拉断。如果断裂是不对称的，则两个子细胞中某些区段或是丢失或是重复。4、相互易位5、罗伯逊易位。6、臂内倒位：某一染色体臂内发生两次断裂后，所形成的中间片段旋转180 度后重接。如 2 号染色体短臂上的 1 区 3 带和 2 区 4 带处分别断裂，此二带之间的片段旋转
24、 180 度后重接，尽管没有带的增加或减少，但带的顺序发生了改变。7、臂间倒位：一条染色体的长臂和短臂各发生一处断裂后，断裂点之间的片段旋转 180 度后重接。如断裂和重接发生在 2 号染色体短臂的 2 区 1 带和长臂的 3 区 1 带。8、等臂染色体：等臂染色体一般是由于着丝粒分裂异常造成的。在正常的细胞有丝分裂中期时，连接两姐妹染色单体的着丝粒进行纵裂，形成两条各具有长、短臂的染色体。如果着丝粒发生横裂，就将形成两条等臂染色体。如 X染色体着丝粒发生横裂形成 X 染色体的等长臂和等短臂染色体。小结一、染色体数目畸变二、染色体结构畸变第四章 人类染色体病授课时数：2 学时教学目标1、掌握人
25、类染色体病的共有表型2、掌握先天愚型的发生机制教学重难点先天愚型的发生机制授课内容第四章 人类染色体病由于染色体异常所引起的疾病，称为染色体病或称为染色体畸变综合征。人类染色体病包括常染色体病和性染色体病，现已明确的染色体综合征有百余种。此类遗传病有下列特征：1） 带有染色体异常的个体，其生长发育和智力发育通常均落后，一般均有多发性先天畸形。2） 带有染色体异常的个体，其亲代的染色体可为正常，这种异常是由于生殖细胞形成过程中发生了染色体畸变。3） 带有染色体畸变但表型正常的个体，可以将畸变染色体传给子代，子代染色体可能会出现不平衡而导致患病。4）带有染色体异常的个体，可在产前利用羊水细胞或绒毛
26、细胞培养作出诊断。一、常染色体病由于常染色体异常所导致的疾病，称为常染色体病。先天愚型：先天愚型是一种常见的常染色体病，人群中的发病率约为 1/650。1866 年Down 首先发现该病，1959 年 Lejeune 等证实本综合征由于多一条 21 号染色体所致。Down 综合征的主要临床特征为：智力低下，身体发育迟缓，有特殊面容，鼻跟低平，眼间距宽，眼裂小，外眼角上斜，内眦赘皮，腭弓高尖，新生儿患者常有第三囟门，舌大常外伸，故又称伸舌样痴呆。50%有先天性心脏病，并有唇裂、腭裂及多指（趾） 、并指（趾）等畸形。患者肌张力低，关节可过度屈曲。患者 IgE 降低，易患肺炎等呼吸道感染。皮肤纹理特
27、征常有通贯手，三叉点高（t ） ，径侧弓形纹和第 5 指只有一条褶纹。先天愚型有三种不同核型：三体型、易位型和嵌合型，不同核型患者产生原因及遗传情况不同。三体型：绝大部分先天愚型患者为三体型，核型为：47，XX（XY） ，+21。三体型患者的产生原因为减数分裂过程中染色体不分离，通过患者额外染色体起源分析表明，大多数三体型先天愚型患者的额外染色体来源于母方，其发生率与母亲生育年龄有关，高龄孕妇生出 21 三体患者的比例明显增高。三体型先天愚型患者的父母通常核型正常，这样的夫妇再生先天愚型患儿的风险同同年龄的一般群体。男性先天愚型多为不育，女性虽能生育，但对于三体型患者而言，理论上其子代有 50
28、%机率患相同疾病。易位型：大约 5%的先天愚型患者额外的 21 号染色体是易位到其它近端着丝粒染色体上形成罗伯逊易位。如 21 号染色体易位到 14 号染色体上，其核型为：46，XX（XY） ，-14，+t（14；21） （p11；q11） 。易位型先天愚型可以为新发突变，其亲代核型正常，也可以来自平衡易位携带者亲代。如果患者父母一方为非同源染色体罗伯逊易位（即 21 号染色体易位到除 21 号染色体以外的其它近端着丝粒染色体上）携带者如：45，XX，-14，-21，+t（14；21）（p11；q11），根据前面所讲的平衡易位携带者配子形成规律，其子代可能会出现六种类型：一种为正常，一种为平衡
29、易位携带者，一种为易位型先天愚型患者，一种为 21 单体患者，另两种胚胎不能存活。如果亲代之一为 21/21 易位携带者45，XX，t（21；21） （p11；q11），可产生两种类型的生殖细胞，与正常生殖细胞受精后可产生两种类型的子代，一种为易位型先天愚型，一种为21 单体患者。嵌合型：大约 3%的先天愚型患者为嵌合型，其核型为：46，XX（XY）/47，XX（XY） ，+21。这种先天愚型患者是由于受精卵卵裂过程中有丝分裂不分离所致。患者的临床症状取决于其异常细胞系所占比例。患者的父母通常核型正常，其下个孩子的再发风险同群体发病率。嵌合型患者能否遗传给子代取决于其原始生殖细胞的核型。二、性
30、染色体病由于性染色体异常所引起的疾病，称为性染色体病。(一) 先天性睾丸发育不全综合征1942 年 Klinefelter 等发现此征。1956 年 Bradbury 等及 Plunkett 和 Barr在这类病人中发现性染色质 X 小体为阳性。1959 年 Jacobs 和 Strong 证实患者的核型为 47，XXY。此后，在 Klinefelter 综合征病人中还发现有嵌合型，如46，XX/47，XXY 或 47，XXY/48，XXXY；或有更多的 X 染色体，如 49，XXXXY。本症 X 小体和 Y 小体均为阳性。本症患者的主要临床症状是：表型为男性，在儿童期无任何症状，青春期开始后
31、症状即逐渐明显。患者体高一般在 180cm 以上，具男性外生殖器，但呈去势体征，阴茎短小，睾丸小或为隐睾，睾丸组织切片可见曲细精管玻璃样变，不能产生精子，故不能生育。患者体毛稀少，无须，无喉结，常见男性乳房发育。皮下脂肪发达，皮肤细腻如女性，其性情体态表现为趋向女性化。少数患者有智力落后现象。本症的产生主要是由于患者双亲之一在生殖细胞形成过程中发生了性染色体不分离。患者额外染色体起源分析表明，患者的额外染色体 40%来自父亲，60%来自母亲，5/6 的不分离发生在第一次减数分裂，1/6 发生在第二次减数分裂。由于本症患者不育，不会将多余的性染色体传给后代。（二）性腺发育不全（Turner 综合
32、征）1930 年 Ullrich 首先发现一女孩有蹼颈、肘外翻及其它一些临床症状。1938 年 Turner 发现有蹼颈、肘外翻的成年妇女，并伴有性发育幼稚，这些症状构成本综合征。1954 年 Polani 等和 Wilkins 发现 Turner 综合征许多病例 X小体阴性，1959 年 Ford 等观察到患者的核型为 45，X。目前发现 Turner 综合征的核型可以为：45，X；46，XXq-；46，X，i（Xq） ；46，X，i（Xp） ；45，X/46，XX；45，X/47，XXX。其中 45，X 较常见。患者的主要特征为：表型为女性，体矮（身高 120-140cm 左右） ，后发际
33、低，50%有蹼颈，肘外翻，乳间距宽，青春期乳腺仍不发育，乳头发育不良。性腺发育不全，虽有卵巢基质但无滤泡，原发闭经，外生殖器发育差等，并常并发肾畸形，色素斑，指（趾）甲发育不良。性腺发育不全症患者可因其异常 X 染色体结构改变部位的不同，而表型有差异，即只有性腺发育不全的某些症状。例如：核型为 46，X，i（Xp）的患者和 X 染色体长臂缺失的患者具有一些性腺发育不全体征，但身高正常； 而46，X，i（Xq）和 X 染色体短臂缺失的患者具有体矮和其它性腺发育不全的体征。根据 X 染色体失活原则，如果导致性腺发育不全的基因为可失活基因，以上核型的个体的表现型可能相同，因此认为导致性腺发育不全的基
34、因为逃脱失活基因。通过比较不同 46，XY 患者 Y 染色体缺失情况和性腺发育不全表型，在X 染色体短臂上克隆出一个导致性腺发育不全综合征的基因RPS4X，该基因编码一个高度保守的 40S 核糖体 S4 蛋白。当然从 X 长臂缺失可导致出现一些性腺发育不全症状的事实说明 X 染色体长臂上也存在与性腺发育有关的基因。小结一、常染色体病二、性染色体病第五章 人类基因组组成及表达授课时数：2 学时教学目标1、掌握人类基因组组成、结构2、掌握人类基因的转录教学重难点1、人类染色体数目畸变的类型2、三体和单体发生机制授课内容第五章 人类基因组组成及表达一、人类基因结构基因是具有生物学功能的核酸分子片段，
35、是遗传物质突变、重组和具有特定遗传功能的基本单位，是遗传信息传递、表达和生物性状形成的基础。大多数真核生物基因的编码序列不是连续排列的，被非编码序列隔开，因此，称为断裂基因。1、外显子与内含子1）外显子：出现在成熟 mRNA 中的基因序列，外显子序列可以是编码氨基酸的编码序列，也可以是非编码序列，如存在于起始密码之前和终止密码之后的外显子序列，这些序列出现在成熟 mRNA 中，但并不编码氨基酸，所以称为非翻译区，在基因 3端非翻译区内存在 RNA 加尾信号，其序列为 5-AATAAA-3。2）内含子：位于两外显子之间的序列。2、外显子内含子接头序列：在外显子与内含子接头有一段高度保守的序列，是
36、 RNA 剪接的信号，称为接头序列。每个内含子的 5端以 GT 开始，在 3端以 AG 结束，所以又称为 GT-AG 法则。3、侧翼序列：在基因的两侧不被转录的非编码序列，这些序列在转录调控中起重要作用。它们包括位于转录起始点上游的启动子序列、位于转录终止点下游的终止子序列和位置不固定的转录调控序列，如增强子、静止子等。1）启动子：是一段特异的核苷酸序列，通常位于基因转录起始点上游的100bp 范围，是 RNA 聚合酶的结合部位，能启动和促进转录过程。启动子决定了双链 DNA 中的转录链，常见序列有：TATA 框：位于转录起始点上游大约-20-30bp 处，是高度保守的一段序列，由 7 个碱基
37、组成，即 TATAA（T）AA（T） ，其中只有两个碱基可以有变化。TATA框能够与转录因子 TF结合，再与 RNA 聚合酶形成复合物，从而准确地识别转录的起始位置，对于转录水平有着定量效应。CAAT 框：位于转录起始点上游-70-80bp，也是一段保守序列，由 9 个碱基组成，其序列为 GGC（T）CAATCA，其中只有一个碱基可以变化。转录因子CTF 能够识别 CAAT 框并且与之结合，其 C 端有着激活转录的功能。所以 CAAT框有促进转录的功能。GC 框：其顺序为 GGCGGG，有两个拷贝，位于 CAAT 框两侧。转录因子 Sp1能识别 GC 框并且与之结合，其 N 端有激活转录的作用
38、。所以，GC 框有激活转录的功能。2）增强子：增强子能增强启动子发动转录的作用，从而明显地提高基因转录的效率。增强子的位置不固定，可以位于启动子上游，也可以位于启动子下游，可以距离启动子很远，也可以距离启动子较近。3）终止子：终止子为反向重复序列，是 RNA 聚合酶停止工作的信号，反向重复序列转录后，可以形成发夹式结构，并且形成一串 U。发夹式结构阻碍了RNA 聚合酶的移动，一串 U 的 U 与 DNA 模板中的 A 结合不稳定，从模板上脱落下来，转录终止。综上所述，人类基因结构可图示如下：AGGTAGGTIntron 2Exon1 Exon2 Exon3Intron 1非翻译区侧翼序列二、人
39、类基因组组成基因组是细胞内全部遗传物质的总称。细胞内遗传物质包括存在于细胞核内的全部 DNA 和存在于线粒体内的 DNA，前者称为核基因组，后者称为线粒体基因组。（一）核基因组的组成：1、组成基因组的 DNA 序列：核基因组包括 3109bp，约含 3-5 万基因。根据 DNA 出现的拷贝数可以将组成基因组的 DNA 序列分为三类：1）单一序列：在一个基因组中只出现一次或很少几次，约占基因组 DNA的 60%，大多数结构基因属于单一序列；2）高度重复序列：约占基因组 DNA 的 10%，重复单位的长度小于 200bp，在基因组中出现的拷贝数在 106-108，如组成端粒和着丝粒的序列属于高度重
40、复序列；3）中度重复序列：约占基因组 DNA 的 30%，重复单位的长度在 200bp 以上，在基因组的拷贝数在 102-105，少数基因属于中度重复序列。2、多基因家族：指由一个祖先基因经过重复和突变所形成的一组基因，其中至少有一个功能基因。多基因家族有两类：一类串联排列在同一条染色体上，称为基因簇，如 基因簇；另一类是不同成员分布在不同染色体上。3、假基因：多基因家族中不能产生有功能的基因产物的成员，它们与功能基因同源，因突变而失去活性。4、人类核基因组组成：1、为环状 DNA，长度为 16569bp，双链 DNA 中，富含 G 的称为重链，富含C 的为轻链；2、能自主复制，在细胞内具有多
41、拷贝；3、编码序列占 93%，编码 37 个基因，其中 13 个编码蛋白质基因，2 个rRNA 基因和 22 个 tRNA 基因；28 个基因由重链编码，9 个基因由轻链编码；4、基因内无内含子，基因排列紧凑，基因之间间隔极短或无间隔，有些甚至重叠；5、部分密码子不同于核基因组密码子。三、基因表达：储存在 DNA 中的遗传信息通过在细胞核内转录形成 mRNA，并由 mRNA 在细胞质内经过翻译转变成具有生物活性的蛋白质分子的过程，称为基因表达。（一）转录：在细胞核内，以 DNA 链为模板合成 mRNA 的过程称为转录。在双链 DNA 中，做为转录模板的 DNA 单链称为模板链或反义链，不作为模
42、板的 DNA 单链称为非模板链或有义链。双链 DNA 解旋后，RNA 聚合酶沿着 DNA 模板移动，到达转录起始点后，即开始合成 RNA。DNA 转录后的初级产物为 hnRNA，初级产物需要经过加工后成为成熟的 mRNA。加工过程包括：1、加帽：在 RNA 的 5端接上一个甲基化帽，即 7-甲基鸟嘌呤核苷酸。2、剪接：是指在酶的作用下，将初级 RNA 中的内含子序列切掉，并将各外显子序列拼接起来；3、加尾：在腺苷酸聚合酶的作用下，在 RNA 的 3端加接一连串腺苷酸，形成多聚腺苷酸（poly A）尾。（二）翻译（：在细胞质中，以 mRNA 为模板，tRNA 为运载工具，将活化氨基酸在核糖体上装
43、配成多肽链的过程，多肽链经过修饰加工成为有生物学活性的蛋白质。（三）人类基因表达调控：如前所述，每个体细胞内都含有全部基因，但各种类型的细胞行使不同的功能，这是通过控制不同基因在特定时期表达来实现的。因而，人类基因表达的调控是一个非常复杂的问题，基因表达调控可以在不同水平来进行：1、转录前调控：组蛋白与 DNA 结合后，可以抑制基因表达。非组蛋白可以解除组蛋白对 DNA 转录的抑制，促进 DNA 转录，是转录前调控的重要方式。2、转录水平调控：是人类基因表达调控的关键，可以通过启动子、增强子等特异序列与相应的蛋白质结合激活或抑制转录过程而到达调控基因表达的目的。3、转录后调控：主要是初级 RN
44、A 加工过程受到调控。通过不同的加工可以由一个基因的转录产物产生出不同的成熟 mRNA，从而翻译出不同的蛋白质。4、翻译水平调控：核糖体数量、mRNA 的成熟度、启动因子、延伸因子、释放因子和各种酶等均能影响蛋白质合成。5、翻译后调控：多肽链合成后要通过修饰、加工，才能成为具有一定生物活性的蛋白质。小结一、人类基因结构二、人类基因组组成第六章 常用基因分析方法授课时数：2 学时教学目标1、掌握核酸分子杂交的原理2、掌握 PCR 技术的原理及其应用3、了解核酸提取的原理及常用材料教学重难点1、核酸分子杂交的原理2、PCR 技术的原理及其应用授课内容第六章 常用基因分析方法一、核酸提取基因分析的材
45、料是核酸，即 DNA 或 RNA。在基因分析之前，首先必须获得基因分析的材料。 （一）DNA 提取：1、提取 DNA 的常用材料：DNA 存在于细胞核中，由于同一个体的所有体细胞中所含的 DNA 相同，因此，在提取 DNA 时可以采用任何有核细胞。在选择材料时，一般以易获得、再生能力强和对机体损伤最小为前提。根据以上原则，临床上通常以外周血作为提取 DNA 的材料。下面以从外周血中提取 DNA 说明DNA 提取的原理，从其它组织细胞中提取 DNA 的原理类似。2、DNA 提取的原理：如果以外周血为 DNA 提取材料，在外周血中提取 DNA就是从有核的白细胞中提取 DNA。因此，从外周血中提取
46、DNA 包括以下几个关键步骤：第一，破坏红细胞，通常利用红细胞与白细胞膜结构的差异，先使红细胞裂解，经离心后收集白细胞；第二，白细胞裂解：使膜蛋白和核蛋白变性，游离 DNA，通常是采用离子型表面活性剂使蛋白质变性；第三，除去变性蛋白质：通常采用蛋白沉淀剂沉淀变性蛋白质，使 DNA 留在上清液中；第四，在高盐环境下使 DNA 从有机溶剂如无水乙醇中析出。（二）RNA 提取：1、提取 RNA 的材料：RNA 是基因转录产生的，由于不同组织在不同时期有特定的基因表达，因此，提取 RNA 的材料取决于所分析基因表达的组织。如要分析肝脏中表达的基因，就需要用肝脏为材料，要分析脑组织中表达的基因，就需要用
47、脑组织为材料。对于在多种组织中表达的基因，应选择较容易获得且对个体损伤最小的材料。2、RNA 提取方法的原理：提取 RNA 过程中要严格防止 RNA 酶的污染，所用的试剂和器皿都要经过去 RNA 酶处理。提取 RNA 方法很多，目前最常用的是异硫氰酸胍/酚法。该法应用 RNA 与胍盐形成可溶性复合物的特点，极大地简化了RNA 的纯化步骤，获得高质量的 RNA。其主要步骤包括：将新鲜或冷冻的组织块切碎称重，迅速加入异硫氰酸胍/酚溶液中匀浆，再加入 1/10 体积氯仿，剧烈混合，通过离心分离有机相和水相，RNA 存在于上清液中，再用异丙醇沉淀RNA。二、重组 DNA 技术重组 DNA 技术 就是在
48、体外将目的基因与载体连接形成重组 DNA 分子，再用一定的基因转移方法将重组 DNA 转入另一细胞或生物体内，以达到扩增和表达目的基因的目的。重组 DNA 技术是现代分子生物技术发展中的最重要的成就之一。它的产生使人类能根据自己的需要改良生物品种和治疗人类疾病。重组DNA 技术涉及多个步骤：第一，需要分离目的 DNA；第二，在体外切割或扩增获得目的片段；第三，选择用来携带目的片段的载体 DNA；第四，将目的 DNA 片段与载体连接起来，形成重组 DNA 分子；第五，将重组 DNA 分子输入细胞内，使之进行扩增和表达。（一）限制性内切酶限制性内切酶的发现是对重组 DNA 技术的一个主要贡献，可以
49、说没有限制性内切酶的发现，就没有重组 DNA 技术。限制性内切酶存在于原核生物体内，能识别 DNA 双链的特定序列并在识别位点或其附近将 DNA 切断。例如，限制性内切酶 Eco RI 可以识别 6 个碱基对的特定序列 5-GAATTC-3，并在识别序列的 G 与 A 之间切割。现已发现的限制性内切酶有数百种，每种限制性内切酶识别并切割特定 DNA 序列。限制性内切酶的识别序列大多为 4-6 个碱基对，有些为比较长的序列，限制性内切酶的识别序列通常为回文对称序列，即以对称轴按 53方向阅读时，两条链从 5到 3有相同的序列。如果切割点在对称轴上，所产生的限制性片段（由限制性内切酶切割所产生的 DNA 片段称为限制性片段）为平末端；如果切割点不在对称轴上，所产生的限制性片段为粘性末端，即 5或 3末端突出。 （二）载体载体是将外源目的 DNA 导入受体细胞，并能自我复制和增殖的工具。载体具有以下特征：1）分子量小，便于与较大的 DNA 片段结合，能进入宿主细胞并在其中增殖；2）有多种限制性内切酶切点，各种限制性内切酶切点最好只有单一切点；3）被切割载体 DNA 插入外源 DNA 后，不影响其复制能力，并有可选择的标记基因（如抗药基因）
