1、实验报告实验准备: 1、将组织置于水下冲洗 5min,水流需缓慢。2、组织脂肪处理:将组织上多余脂肪剔除。3、组织切块处理:根据各器官及观察重点的不同,对组织的体积和形状进行修整。刀片要锋利,不然会有褶皱。4、将组织和标签用纱布包裹,并用大头针封口,以区分组织。实验过程时间 实验步骤 操作过程 备 注脱水50%酒精 (过夜)12h,常温8:07-9:07 75%酒精 1h,常温9:09-10:09 85%酒精 1h, (60温箱)10:10-10:55 10:55-11:4295%酒精 45min2(60温箱)11:45-12:0012:02-12:17100%酒精 15min2(60温箱)1
2、.跨梯度脱水会引起组织皱缩2梯度越高,时间应适当减少,否则会引起组织过硬3尽量避免各梯度酒精之间的交叉混合 实验日期 2012 年 3 月 16 日 温度_15_实验者刘泽广 实验内容 石蜡包埋术实验目的1、了解石蜡包埋术每个步骤的实验原理2、掌握石蜡包埋术的实验步骤3、熟悉每个实验步骤的注意事项实验对象 已经过多聚甲醛固定的大鼠器官实验器材EG1160 型石蜡包埋机 DHP-9052 型电热恒温培养箱二甲苯 镊子刀片 剪刀包埋模具 纱布实验试剂50%酒精 75%酒精85%酒精 95%酒精2100%酒精2 (100%酒精+二甲苯)/2二甲苯2 (石蜡+二甲苯)/240-45石蜡 48-50石蜡
3、56-60石蜡透明12:18-12:53 二甲苯 30min, (60温箱)12:56-13:01 二甲苯 10min,常温1.二甲苯置换酒精,为浸蜡作准备2.在二甲苯中时间过短透明不彻底;时间过长,组织变脆浸蜡13:01-14:05 (二甲苯+石蜡)/2 1h, (60温箱)14:08-15:08 40-45石蜡 1h, (60温箱)15:08-16:08 48-50石蜡 1h, (60温箱)16:08-18:08 56-60石蜡 2h, (60温箱)1.石蜡熔点越高,溶解度越低,应按梯度依次浸蜡2.石蜡与二甲苯相置换,使石蜡浸入到组织中包埋实验步骤 备注1、抽出大头针,打开纱布 此步骤需在
4、石蜡液面下进行2、在石蜡模具中灌蜡 1/2 若全部灌蜡,某些组织会上浮3、将组织放入包埋模具中 注意组织的方位,切面需保持水平4、将包埋模具灌满石蜡 此步骤需快速,避免蜡块形成分层5、将包埋模具放在冷台上 加速是蜡块的冷却速度6、贴上标签 待蜡块半固体状时,放入标签7、取出石蜡块 待石蜡完全凝固后方可取出,防止石蜡变形8、修整石蜡块 切去不必要的石蜡,减少切片时刀片磨损9、保存石蜡块 将石蜡块放入袋中,置于-4环境保存实验结果:得到包埋完整的大鼠器官石蜡块若干实验小结:1、有腔器官放入石蜡模具中时,先将开口向上,使石蜡将器官中的空气挤出。可避免石蜡块中存在空气。2、包埋时应快速进行,避免在组织表面形成石蜡膜或石蜡块的分层。3、由于石蜡模具表面有残存的石蜡,会导致模具咬合不紧,出现石蜡漏出模具的现象。4、包埋过程应耐心仔细,起初会手忙脚乱,但练习到最后变会熟能生巧。5、包埋时,切忌用手按石蜡块中间,因为冷凝后,中间仍较软。