1、药品检验基础知识 （化学部分）讲座,XX市食品药品检验所2012.07,讲座内容,（一）药品质量标准 （二）药品检验常用的分析方法(三）容量分析法 （四）仪器分析法 （五）滴定液（标准溶液）,（一）药品质量标准,国家标准中国药典药典会颁布，2010年版（第九版）第一版（1953年）；第二版（1963年） 第三版（1977年）；第四版（1985年）第五版（1990年）；第六版（1995年） 第七版（2000年）；第八版（2005年）,（一）药品质量标准,国家标准部颁标准原卫生部和现（食）药监局颁布卫生部部颁标准（包括医院制剂规范）国家药品标准新药转正标准 国家药品标准地标升国标标准进口药品注册标
2、准补充检验方法,（一）药品质量标准,地方标准省级（食）药监局颁布的标准主要是补充的医院制剂品种只在本地区有效,（一）药品质量标准,2010年版凡例总则的修订 一、中华人民共和国药典简称中国药典，依据中华人民共和国药品管理法组织制定和颁布实施。中国药典由一部、二部、三部及其增补本组成，内容分别包括凡例、正文和附录。本部为中国药典二部。 二、国家药品标准由凡例与正文及其引用的附录共同构成。本部药典收载的凡例、附录对药典以外的其他化学药品国家标准具有同等效力。 五、正文中引用的药品系指本版药典收载的品种，其质量应符合相应的规定。,（一）药品质量标准,2010年版凡例总则的修订 六、正文所设各项规定是
3、针对符合药品生产质量管理规范的产品而言，任何违反GMP或有未经批准添加物质所生产的药品，即使符合中国药典或按照中国药典没有检出其添加物质或相关杂质，亦不能认为其符合规定。 七、中国药典的英文名称为Pharmacopeia of the Peoples Republic of China；英文简称为Chinese Pharmacopeia；英文缩写为Ch.P. 。,（一）药品质量标准,2010年版凡例总则的修订 正文 八、正文系根据药物自身的理化与生物学特性，按照批准的处方来源、生产工艺、贮藏条件等所制定的，用以检测药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否稳定均一的技术规定。 附录 十、附录主要
4、收载制剂通则、通用检测方法和指导原则。制剂通则系按照药物剂型分类，针对剂型特点所规定的基本技术要求；通用检测方法系各正文品种进行相同检查项目的检测时所应采用的统一的设备、程序、方法及限度；指导原则系为执行药典、考察药品质量、起草与复核药品标准等所制定的指导规定。,（一）药品质量标准,2010年版凡例总则的修订 项目与要求 十四、制法项下主要记载药品的重要工艺和质量管理要求。 （1）所有药品的生产工艺应经验证，并经国务院药品监督管理部门批准，生产过程均应符合药品生产质量管理规范的要求。 （2）直接用于生产的菌种、毒种、来自人和动物的细胞、DNA重组工程菌及工程细胞，来源途径应经国务院药品监督管理
5、部门批准并应符合国家有关的管理规定。 （3）来源于动物组织提取的药品，其所用动物种属要明确，所用脏器均应来自经检疫的健康动物，涉及牛源的应取自无牛海绵状脑病地区的健康牛群；来源于人尿提取的药品，均应取自健康人群。上述药品均应有明确的病毒灭活工艺要求以及质量管理要求。,（一）药品质量标准,2010年版凡例总则的修订 项目与要求 十七、（第二段）对于生产过程中引入的有机溶剂,应在后续的生产环节予以有效去除。除正文已明确列有“残留溶剂”检查的品种必须依法进行该项检查外，其他未在“残留溶剂”项下明确列出的有机溶剂与未在正文中列有此项检查的品种，如生产过程中引入或产品中残留有机溶剂，均应按本版药典附录“
6、残留溶剂测定法”检查并应符合相应溶剂的限度规定。,（一）药品质量标准,药品质量标准的侧重点：1.鉴别真伪2.制剂通则项目的检查3.安全性检查4.有效性检查5.含量测定6.非法添加（进几年得到重视）,中国药典2010年版二部的修订特点 特点一：收载品种增加，修订品种多2010年版与2005年版二部比较表,其中：因未收集到样品而未修订的品种有345个，占保留上版品种的17.5%,（一）药品质量标准,特点二：药品安全性得到进一步保障对高风险药品注射剂重点提高增加了安全性检查法应用指导原则，渗透压摩尔浓度为静注输液的必检项目 大幅增加了有关物质（杂质）检查共有565个品种增加了HPLC杂质检查，有些标
7、准已超过了EP、BP 加强了残留溶剂的控制有92个品种在各论中检查 对动物来源的品种增加了制法要求 增加安全性检查增加了细菌内毒素、异常毒性和过敏反应检查,（一）药品质量标准,特点三：药品有效性和可控性大幅提升检测方法专属性更强新增了离子色谱法和毛细管电泳法，新增了335个品种的HPLC法以取代原有方法 红外光谱的应用进一步扩大共有50种原料，72种制剂增加了IR鉴别，为打击假药提供了科学有效的手段 溶出度、含量均匀度检查项进一步增加新增99个品种溶出度，59个品种含量均匀度,（一）药品质量标准,特点四：技术现代化与国际化明显加强扩大了对成熟新技术方法的收载附录新增了离子色谱法、核磁共振波谱法
8、、拉曼光谱法指导原则；液/质联用、DNA分子鉴定、薄层-生物自显影技术等 扩大了对新技术的应用附录中扩大收载新技术，各论中也进一步扩大了对新技术的应用 部分品种的控制标准已高于欧美药典部分生化品种,（一）药品质量标准,品种收载情况,化学药中因未收集到样品而未修订的品种有306个，占保留上版品种的21.8%,（一）药品质量标准,主要项目收载情况2010年版与2005年版收载情况比较表,（一）药品质量标准,（二）药品检验常用的分析方法,（1）重量分析法（2）容量分析法（3）电化学法（4）比色法（5）紫外-可见分光光度法（6）红外分光光度法（7）荧光分光度法,（二）药品检验常用的分析方法,（8） 原
9、子吸收分光光度法（9） 薄层色谱法（10）高效液相色谱法（11）气相色谱法（12）旋光度测定法（13）不溶性微粒检查法（14）渗透压摩尔浓度测定法,（二）药品检验常用的分析方法,（15）溶出度测定法（16）热分析法（17）总有机碳测定法（18）熔点测定法,（三）容量分析法,一种已知浓度的标准溶液与被测物质作用，根据所消耗的体积来计算被测物质含量的方法。直接滴定法间接滴定法 置换法 回滴法,（三）容量分析法,具备的条件：1.化学反应迅速（加催化剂或回滴法）2.化学反应完全（99.9%）3.有合适的指示剂指示滴定终点4.不能产生副反应或其他物质不与滴定液反应,（三）容量分析法,优点：方法经典、准确
10、度高、结果准确、实验误差小（0.1%）、方法简单、反应机理明确缺点：选择性差、反应机制不合理、干扰因素多、操作人员的经验和熟练性原料药的含量测定还是以容量分析法为主,（三）容量分析法,1.中和滴定（水溶液滴定）酸量法和碱量法酸中的H+离子与碱中的OH-离子反应生成水弱酸或弱碱盐的电离常数直接或间接滴定选择合适变色范围的指示剂电化学法指示终点,（三）容量分析法,2.非水滴定（有机溶剂）用于水中不溶解，弱酸或弱碱物质的滴定酸碱的质子理论电离H+为酸，OH-为碱（所有溶剂中）常用于有机碱盐的滴定常用溶剂：冰醋酸滴定液：高氯酸(0.1mol/L),（三）容量分析法,3.永停滴定（亚硝酸钠法）亚硝酸与有
11、机胺的氨基发生重氮化反应 外指示剂法：过量的亚硝酸与碘化钾在酸性条件下反应生成碘并与淀粉显蓝色。2NO2-+2I-+4H+ I2+2NO+2H2O 电化学法（永停滴定法）：铂-铂电极间加50mV极化电压，过量的亚硝酸使去极化，溶液有电流通过，电流计指针偏转并不回复。（卡氏水分）,（三）容量分析法,4.沉淀滴定（银量法）滴定液与被测物生成难溶性沉淀物。 指示剂法：铬酸钾Ag2CrO4（砖红色）荧光黄（有机弱酸染料，阴离子），开始沉淀表面为Cl-，终点时为Ag+，吸附荧光黄。 电化学法：Ag+离子选择电极,（三）容量分析法,5.络合滴定（络量法）络合剂(EDTA-2Na)与金属离子形成络合物的反应
12、。 金属指示剂：有机染料，大都为络合剂，与金属离子络合生成有色络合物。 要求：颜色差别、pH值、终点颜色变化明显、专属性、稳定性、其络合物的稳定性应小于金属离子与EDTA-2Na形成的络合物。 电化学法：要求特殊电极。,（三）容量分析法,6.氧化还原滴定以氧化还原反应为基础的容量分析，实质是物质间发生了电子转移。失去电子还原剂得到电子氧化剂如：碘量法、溴量法、溴酸钾法、高锰酸钾法、重铬酸钾法、铈量法、高碘酸盐法、碘酸钾法等。 指示剂法：自身指示或指示剂（淀粉等） 电化学法：铂-铂电极，电位滴定,（三）容量分析法,2010年版含量测定的修改 原料药含量测定变化的主要特点 非水滴定法：革除汞盐 终
13、点变色不明显的指示剂法：电位滴定法例：丙硫氧嘧啶（指示剂法改为电位滴定法） 紫外或滴定或重量法：HPLC法例：荧光素钠（重量法改为HPLC法）,（三）容量分析法,2010年版含量测定的修改 含量测定（原料药）：容量分析 原料药的纯度达到98.5%以上时，首选容量分析法。 在非水滴定法中革除汞盐。有机碱氢卤酸盐，因氢卤酸在冰醋酸中显酸性，影响滴定终点的判断，所以加入醋酸汞使氢卤酸生成难离解的卤化汞，以排除氢卤酸的干扰；引发汞污染问题，故应少用高氯酸滴定法测定有机碱氢卤酸盐类药物含量，以避免汞污染。,（三）容量分析法,2010年版含量测定的修改 含量测定（原料药）：容量分析 革除汞盐的替代方法：（
14、1）加乙酸酐的高氯酸电位滴定法通过溶剂的选择，使终点突跃增大从而取代汞盐的使用。加入适量的乙酸酐时溶剂的碱性增强，使滴定突跃明显增加，结果即革除了汞盐，又排除了人为因素的干扰。该方法使用的较多，如盐酸二甲双胍等31个品种修改。关键是溶剂的筛选，常用冰醋酸-乙酸酐的溶剂组合，通过调整两者的比例，达到终点易观察的要求。当样品在冰醋酸中溶解性差时，也有使用甲酸为溶剂的。,（三）容量分析法,2010年版含量测定的修改 含量测定（原料药）：容量分析 革除汞盐的替代方法：（2）以醇类为溶剂的氢氧化钠电位滴定法可溶于或略溶于醇类溶剂的品种，优先使用该方法，有一定的局限性。分子结构中含2个分子盐酸的药物，电位
15、滴定时通常用两个突跃点，第一个突跃是滴定游离酸根，第二个突跃是滴定键合酸根。在标准中加以了说明，以避免误操作。,（三）容量分析法,2010年版含量测定的修改 含量测定（原料药）：容量分析 革除汞盐的替代方法：在2010年药典中还有28个品种保留了原方法。原因：替代方法与原方法的测定结果不一致，有的结果相差1.5%，这对容量分析来讲差异是显著的，在没有更好的解决办法之前仍保留了原方法，有待进一步研究和探讨。,（四）仪器分析法,1.紫外-可见分光光度法通过测量单色光被样品吸收的程度计算含量。仪器要求：波长精度：紫外光区1nm500nm附近2nm吸光度准确度：60mg/L的重铬酸钾溶液杂散光：碘化钠
16、，亚硝酸钠溶液溶剂：,（四）仪器分析法,1.紫外-可见分光光度法仪器的组成,光源,单色器,样品室,检测器,记录仪,显示系统和数据处理系统,光源,氘灯200-400nm，一般换灯在360nm碘钨灯400-850nm,（四）仪器分析法,1.紫外-可见分光光度法单色器组成：进光狭缝、出光狭缝、平行光装置色散元件、聚焦透镜、反射镜,（四）仪器分析法,1.紫外-可见分光光度法,色散元件,棱镜（波长不等距，精度不符合）光栅（波长等距，常用）,结构：单光束、双光束、双波长双光束,（四）仪器分析法,1.紫外-可见分光光度法测定原理用于测定UV的药物绝大部分是由具有不饱和结构的化合物的外层电子跃迁引起的。如：共
17、轭双键、三键，芳香族化合物等不饱和化合物引入Cl、O、S、N、等元素时，外层电子更容易跃迁，使吸收波长变长（长移）,（四）仪器分析法,1.紫外-可见分光光度法定量原理：朗伯-比尔（Lamber-Beer）定律A=log1/T=ECL,（四）仪器分析法,1.紫外-可见分光光度法药典要求：溶剂：以空气为空白（空杯）220-240nm，0.40241-250nm，0.20251-300nm，0.10300nm以上，0.05波长：规定波长2nm吸光度范围：0.3-0.7之间,（四）仪器分析法,1.紫外-可见分光光度法应用：鉴别：光谱特性；max；min；比值检查：纯度；杂质；颜色含量：对照品比较（包括
18、比色法）百分吸收系数（100以上）计算分光光度法比色法 *导数光谱法（计算，不推荐）,（四）仪器分析法,2.红外分光光度法（IR、FT-IR）结构分类：付立叶变换红外光谱仪光栅型红外光谱仪原理：化合物受红外辐射照射后，使分子的振动和转动运动由较低能级向较高能级跃迁，从而导致对特定频率红外辐射的选择性吸收。,（四）仪器分析法,2.红外分光光度法（IR、FT-IR）红外区分为3个区域：近红外区：780-2500nm，0.78-2.5m，12800-4000 cm-1中红外区：2500-25000nm，2.5-25m，4000-400 cm-1远红外区：25-1000m，400-10 cm-1应用的
19、是中红外区,（四）仪器分析法,2.红外分光光度法（IR、FT-IR）波长范围：2.5-25m；以波数表示：cm-1 ;范围：4000-400 cm-1仪器要求：波数精度：3000 cm-1附近，5 cm-11000 cm-1附近，1 cm-1分辨率：用聚苯乙烯薄膜3110-2850 cm-1 ，分辨出7个峰,（四）仪器分析法,2.红外分光光度法（IR、FT-IR）制备：固体分散剂（KBr，KCl）压片液体池，溶剂（四氯化碳，二甲基亚砜）糊状物 固体粉末应用：鉴别：对照品和对照光谱比较一致性晶型检查异构体检查含量测定（个别）,（四）仪器分析法,3.电化学法（pH值，电位滴定）是容量分析中用以确定
20、终点或核对指示剂变色域的方法。用于：氧化还原法 中和法（水溶液、非水溶液）沉淀法 重氮化法 卡氏水分 电极系统：指示电极：随被测离子浓度的变化而变化；参比电极：电极电位固定不变。 终点时被测离子浓度急剧变化的电位突跃（曲线拐点）,（四）仪器分析法,3.电化学法（pH值，电位滴定）常用电极组合：铂-饱和甘汞，氧化还原法玻璃-饱和甘汞，中和法（水溶液、非水溶液）银-玻璃，银量法铂-铂，重氮化法（永停滴定）与指示剂法相比，电位滴定是首选,（四）仪器分析法,4.旋光度测定法测定具有光学活性化合物。使平面偏振光产生偏转的现象，记录偏转的角度。光源：单色光，通常为钠光灯，589.3nm仪器精度：0.01（
21、满足药检要求）测定温度：20“+”-右旋，顺时针方向“-”-左旋，逆时针方向,（四）仪器分析法,4.旋光度测定法应用：比旋度：浓度为1g/ml的溶液，在1dm的光路中的旋光度。物理常数检查纯度检查杂质检查消旋体-旋光度测定含量-缺乏专属性，少用,（四）仪器分析法,4.旋光度测定法：2010年版要求 区别比旋度与旋光度两个项目。比旋度作为光学异构体的物理性质，列在“性状”项下；旋光度作为检查外消旋体混合物中两对映异构体的比例的简易方法，列在“检查”项下，限度一般为-0.1+0.1 比旋度测定时所选择的溶剂应尽量与欧美药典或相关文献一致，使最终限度具备可参考性；另关于测定温度，附录规定为20，如果
22、测定温度不同于20，应在各论项下明确测定温度，如：葡萄糖的测定,（四）仪器分析法,5.渗透压摩尔浓度测定法溶剂通过半透膜（人体细胞膜、毛细血管壁）由低浓度溶液向高浓度溶液扩散的现象（渗透），阻止扩散的压力为渗透压。测定原理：冰点下降原理。仪器组成：制冷系统、 热敏探头、样品室、振荡器和数据处理系统。单位：毫渗透压摩尔浓度，mOsmol/kg2010年版增加了渗透压控制的品种数量大容量注射剂，部分滴眼剂,（四）仪器分析法,5.渗透压摩尔浓度测定法人体血液的渗透压摩尔浓度： 285-310mOsmol/kg0.9%氯化钠溶液：286mOsmol/kg（等渗）应用：直接测定渗透压摩尔浓度：氯化钠注射
23、液：260-320mOsmol/kg计算渗透压摩尔浓度比：供试品溶液与0.9%氯化钠溶液的比值滴眼液:比值应为0.9-1.1(258-314mOsmol/kg),（四）仪器分析法,6.高效液相色谱法仪器的组成,溶剂,恒流泵,进样器,色谱柱,检测器,显示系统和数据处理系统,脱气装置,自动、手动,柱温箱,UV DAD 荧光 电化学 蒸发光散射 示差,（四）仪器分析法,6.高效液相色谱法测定原理正相-固定相的极性大于流动相的极性反相-固定相的极性小于流动相的极性吸附色谱法分配色谱法离子交换色谱法分子排阻色谱法,（四）仪器分析法,6.高效液相色谱法性能指标恒流泵：流速的精度和稳定性进样系统：定量环（忽
24、略误差）、自动、手动色谱柱：差别较大（选择、使用、保养、贮存）检测器：灵敏度、精度、重复性,（四）仪器分析法,6.高效液相色谱法测定条件：固定相（色谱柱）种类、品牌（特定应注明） 、规格（粒径、 尺寸）检测器（类型、波长、灵敏度）流动相（组分、比例、 流速）温度（根据柱压）进样量（根据检测灵敏度）溶液浓度（根据进样量）,（四）仪器分析法,6.高效液相色谱法色谱评价（系统适用性试验）：理论板数：评价色谱柱分离效能分离度： 评价色谱柱分离程度重复性： 评价色谱系统响应值的重复性脱尾因子：评价色谱峰的对称性，与测量精度有关峰面积计算时影响不大峰高计算时有影响，0.95-1.05,（四）仪器分析法,6
25、.高效液相色谱法应用：鉴别：保留时间一致检查：杂质、异构体、其他检查的含量测定含量测定：计算：峰面积、峰高内标法 外标法 面积归一化法主成分自身对照法加校正因子的主成分自身对照法,6.高效液相色谱法 2010年版二部，色谱柱的使用情况,（四）仪器分析法,6.高效液相色谱法 2010年版二部，采用检测器情况,（四）仪器分析法,（四）仪器分析法,7.气相色谱法仪器的组成,载气,进样器,色谱柱,柱温箱,检测器,色谱数据处理系统,高纯氮,直接进样 顶空进样,控制加热器,FID TCD ECD FPD NPD MS,（四）仪器分析法,7.气相色谱法原理：吸附和分配与液相不同，流动相为气体（固定），更换固
26、定相 吸附色谱法 气-固分配色谱法 气-液,（四）仪器分析法,7.气相色谱法性能指标气源：N2、H2等，要求高纯（99.99%以上）进样系统：自动进样器手动进样-误差大、需要经验色谱柱：差别较大（选择、使用、保养、贮存）检测器：灵敏度、精度、重复性,（四）仪器分析法,7.气相色谱法测定条件：固定相（色谱柱）种类、规格（粒径、 尺寸）检测器（类型、灵敏度）流动相（气体种类、分流比、流速）温度（气化室、柱相、检测器）进样量（根据检测灵敏度）溶液浓度（根据进样量）色谱评价：同液相,（四）仪器分析法,7.气相色谱法应用：鉴别：保留时间一致检查：杂质、异构体、残留溶剂含量测定：计算：峰面积、峰高内标法
27、外标法 面积归一化法主成分自身对照法加校正因子的主成分自身对照法,（四）仪器分析法,7.气相色谱法应用常识：（1）色谱柱的老化：固定液涂层时使用了有机溶剂，使用前应在其最高使用温度20以下进行老化；平时使用后也应高温吹扫。（2）温度：气化室和检测器温度一般高于柱温30-50 ，且检测器温度不低于150。（3）气体流速比率：例如FID氮气：氢气：空气=1：1：10,8.总有机碳测定法 通过测定水中的二氧化碳，间接测量水被有机物污染的程度 方法与原理氧化：燃烧、氧化剂、光照检测：直接电导、薄膜电导、非色散红外 对TOC仪器的要求能区分水中的有机碳和无机碳，能排除无机碳的干扰满足系统适用性试验要求（
28、易氧化和不易氧化试剂的能力）满足灵敏度的要求 仪器选择：视用途选择,（四）仪器分析法,（四）仪器分析法,8.总有机碳测定法仪器要求：1.能区分无机碳和有机碳并能排除其干扰2.能满足系统适用性试验(响应效率)的要求3.检测灵敏度：含碳量0.05mg/L(50ppm)一般进口仪器都能达到1ppm以下,（四）仪器分析法,8.总有机碳测定法对照品溶液：1.蔗糖：易氧化的有机物，含碳0.50mg/L2.1,4-对苯醌：难氧化的有机物，含碳0.50mg/L总有机碳检查用水：25时含碳量0.10mg/L，电导率1.0S/cm,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)药用明胶空心胶囊中铬超标事件
29、全国性监督检验生产企业批批检自查国家局公告2012年10月1日后具备自检能力仪器选型、采购（价格）人员培训、检验能力,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 原子吸收:当待测元素灯发出的特征谱线通过供试品经原子化产生的原子蒸气时，被蒸气中待测元素的基态原子所吸收，通过测定辐射光强度减弱的程度，求出供试品中待测元素的含量方法。 原子发射(火焰光度法)：供试品溶液以气溶胶的形式，靠火焰的热能将供试品元素原子化并激发出特征光谱，通过光电检测系统测量出待测元素的谱线强度，求出供试品中待测元素的含量方法。,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 仪器组成：,火焰型 电热型
30、（石墨炉） 氢化物型（As） 冷蒸气发生型（Hg）,光源,原子化器,电源、自动进样器、循环水冷却机,单色器,检测器,显示系统和数据处理系统,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 原子化器-火焰原子化器:由雾化器及燃烧灯头组成。将供试品溶液雾化成气溶胶后，再与燃气混合，进入燃烧灯产生的火焰中，使供试品中的待测元素经干燥、蒸发、离解形成基态原子。燃气：乙炔助燃气：空气（空压机）、氧化亚氮、氧气检出限：ppm级,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 原子化器-石墨炉原子化器:由电热石墨炉及电源组成，通常配自动进样器。将供试品溶液干燥、灰化，再经高温原子化使待测元素
31、形成基态原子。 保护气：氩气（石墨为发热体，通入保护气防氧化并能输送试样蒸气） 辅助设备：循环水冷却机；耗材：石墨管检出限：ppb级,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 原子化器-氢化物发生原子化器（As,Sb,Sn,Se等）:由氢化物发生器和原子吸收池组成。将待测元素在酸性介质中还原成低沸点、易受热分解的氢化物，再由载气导入由石英管、加热器组成的原子吸收池，在吸收池中氢化物被加热分解并形成基态原子。 载气：氩气 还原剂：硼氢化钠检出限：ppb级,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 原子化器-冷蒸气原子化器（测Hg）:还原装置通常由氢化物发生器代替。在汞
32、蒸气发生器中，汞离子被还原成汞，将汞蒸气直接导入原子吸收池中测定。 载气：氩气 还原剂：硼氢化钠检出限：ppb级,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 测定法:第一法（标准曲线法）对照品溶液至少3个点+对照空白；n=3以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。供试品溶液+空白；n=3测定值应在标准曲线范围内。,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 测定法:第二法（标准加入法）制备至少4份供试品溶液，其中1份不加标准溶液，制备从零开始的对照品溶液至少4个点；n=3以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。供试品溶液+空白；n=3仅适用于第一法标准曲线呈
33、线性并通过原点的情况。,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 测定法:第二法（标准加入法）,0.1,0.2,0.3,(1),(2),(3),(4),吸光度,待测元素加入量,供试品溶液取用量 中待测元素的含量,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 测定法:第二法（标准加入法-杂质限度检查）制备2份供试品溶液供试品溶液+标准溶液（对照品溶液）；a值供试品溶液；b值b值应小于（a-b）,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 应用：（根据需求选配仪器）火焰法（大部分金属元素，以2价为主）鉴别：发射光谱/通过特征谱线鉴别/Na,589.6nm检查：限
34、度检查、含量测定含量测定：,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 应用：（根据需求选配仪器）石墨炉法（大部分金属元素）检查：限度检查、含量测定含量测定：,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 应用：（根据需求选配仪器）氢化物法（主要测砷等非金属元素）检查：限度检查、含量测定含量测定：冷蒸气法（测汞）检查：限度检查、含量测定,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 应用：（根据需求选配仪器）无机物原辅料分析：具备火焰法和石墨炉法中药材：重金属及有害元素检查Pb、Cd:石墨炉法As：氢化物法Hg：冷蒸气法Cu：火焰法ICP-MS:电感耦合等离子体
35、质谱法（条件不具备）,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 前处理方法及设备：一、微波消解法微波消解仪、聚四氟乙烯消解罐、赶酸器二、湿法消解凯氏烧瓶、电加热或直火加热三、干法消解瓷坩埚、电加热或直火加热、高温炉,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 例：明胶空心胶囊中铬的测定取本品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸5-10ml，混匀，浸泡过夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波消解炉内，进行消解。消解完全后，取消解内罐置电加热板上缓缓加热至红棕色蒸气挥尽并近干，用2%硝酸转移至50ml量瓶中，并用2%硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。同法制备试剂空白溶
36、液；另取铬单元素标准溶液，用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0g的铬标准贮备液，临用时，分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬0-80ng的对照品溶液。取供试品溶液与对照品溶液，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法（第一法），在357.9nm的波长处测定，计算，即得。含铬不得过百万分之二。,（四）仪器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 例：明胶空心胶囊中铬的测定为解决应急检验中遇到的问题，中检院下发了明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则胶囊壳中铬测定方法答疑汇总,（四）仪器分析法,10.薄层色谱法(薄层扫描)11.不溶性微粒检查法12.溶出度、释放度测定法
37、13.热分析法14.荧光分析法15.电泳法（毛细管）16.离子色谱法,（五）滴定液（标准溶液）,滴定液：指在容量分析中用于滴定被测物质含量的标准溶液，具有准确的浓度（取4位有效数字）；浓度以“mol/L”表示；滴定液的浓度值与名义值之比，称为“F”值，常用于容量分析中的计算 标定：指根据规定的方法，用基准物质或已标定的滴定液准确测定滴定液浓度（mol/L）的操作过程，要严格按照药典中各滴定液项下的方法进行标定,（五）滴定液（标准溶液）,标准溶液标定过程中的量值传递过程（或朔源）,国家标准,基准物质,天平、珐码,容量器具,滴 定 液,滴 定 液,（五）滴定液（标准溶液）,标定标准溶液的规定 配制
38、滴定液的水（纯化水）应符合规定 配制滴定液的试剂最好用分析纯（AR） 用于标定的试剂必须是基准试剂，有证书 基准试剂如是颗粒或结晶，应先研细，恒重 3个月内应用（最多不得过6个月）过期应重新标定（除另有规定外）,（五）滴定液（标准溶液）,标定标准溶液的规定 盛滴定液的容器（质量好，密封好，注意避光） 所用容量仪器必须校正 滴定管中的溶液每次必须从零开始 标定与使用的温度相差未超过10，浓度值可不加温度修正值；超过10，应加温度修正值 移取滴定液应倾出后吸取，不能直接取用,（五）滴定液（标准溶液）,标定标准溶液的规定 低浓度（0.02mol/L以下）的滴定液，用稀释法 部分滴定液应先配制储备液，备用 滴定液存放于干燥，阴凉处，使用前摇匀 两人以上参加标定 每人各做平行试验3份以上,（五）滴定液（标准溶液）,标定标准溶液的规定 3份平行试验结果的相对平均偏差，不大于0.1% 每人平均值之间的相对偏差，不大于0.1%,（五）滴定液（标准溶液）,相对平均偏差（%）=,平均绝对偏差,算数平均值,100%,=,X1-X+X2-X+.+n,n X,100%,相对偏差（%）=,测得值-算数平均值,算数平均值,100%,（五）滴定液（标准溶液）,谢谢!,
