1、 资料来源：中国教育在线 http:/ http:/ 2006 年攻读硕土学位研究生入学试卷生物化学与分子生物一、是非题:20 题,每题 1.5 分,共 30 分。答“是”写“+”,答“非”写“-”。1.蛋白质变性的实质是非共价键断裂,天然构象解体,但共价键未发生断裂。2.有些抗生素是多肽或其衍生物。3.“自杀性底物”是指在亲和标记法中使用的共价修饰剂。4.糖原磷酸化酶只催化 14 糖苷键的磷酸解。5.到目前为止发现的信号转导蛋白 G 蛋白都是由三种亚基构成的。6.红外光谱可用以研究蛋白质溶液构象。7.丙氨酸具有光学活性。8.线粒体内膜固有蛋白大多是由线粒体 DNA 编码的。9.转录因子A(T
2、FA)能与 5S RNA 以及 5S RNA 基因调控区结合,因而 5S RNA 能对自身的合成进行负反馈调节。10.酶催化的反应速度总是随着底物浓度升高而加快。11.线粒体呼吸链复合物 II 的三维结构已被我国科学家解析。这个复合物催化琥珀酸脱氢辅酶 Q 还原的同时产生跨膜质子移位。12.去垢剂是一类既有亲水部分又有疏水部分的分子。13.质量性状是由单个基因支配,而数量性状是由多个基因决定的。14.生物体的遗传性状完全是由基因序列决定的。15.脑细胞有 CD4 表面受体,所以 HIV 病毒也能感染脑细胞。16.线粒体基因采用的密码子与细胞的密码子有不同。资料来源：中国教育在线 http:/
3、http:/ mRNA 的翻译起始区有一个 SD 序列,它与 23S RNA 的 3端结合而起始翻译。18.葡萄糖 6磷酸脂酶是高尔基体的标志酶。19.孟德尔遗传定律和摩尔根遗传定律分别反映了位于不同染色体和相同染色体上的基因的遗传规律。20.限制性内切酶是识别同时切割某特定 DNA 序列的酶。二、选择题:30 题,每题 1.5 分,共 45 分。1.肌原纤维中的粗丝和细丝_。A、分别由肌动蛋白和肌球蛋白组成 B、分别由肌球蛋白和肌动蛋白组成 C、皆由肌动蛋白组成 D、皆由肌球蛋白组成2.参与蛋白质组成的氨基酸是 L型的,其多肽链折叠成的螺旋结构_。A、大多数是右手螺旋 B、大多数是左手螺旋
4、C、右手和左手螺旋各占 50% D、随机构成3.DNA 切口平移所用的酶为_。A、Klenow 酶 B、Taq 酶 C、DNA 聚合酶 I D、DNA 连接酶4.一个分子的人血红蛋白分子中,含有 Fe 离于的数目为_。A、一个 B、二个 C、三个 D、四个5.如果花的红色和黄色由一对等位基因决定,杂交子 代最不可能出现_的花。A、红色 B、黄色 C、橙色 D、白色6.胶原蛋白由若干原胶原分子组成,主要形成_结构。A、 螺旋 B、 折叠片 C、 折叠片和三股螺旋 D、三股螺旋7.柠檬酸循环的化学反应式为:资料来源：中国教育在线 http:/ http:/ H2OCoASH+3NADH+2H+FA
5、DH2+2CO2B、乙酰-CoA+3NADH+FAD+2H2OCoASH+3NAD+2H+FADH2+2CO2C、乙酰-CoA+3NAD+FAD+Pi+GDP+2H2OCoASH+3NADH+2H+FADH2+GTP+2CO2D、乙酰-CoA+3NADH+FAD+Pi+GDP+2H2OCoASH+3NAD+2H+FADH2+GTP+2CO28.蛋白质芯片技术基本上是基于_方法中的原理。A、Northern blot B、Western blot C、Southern bolt D、Eastern blot9.引起双倒数作图斜率与纵轴截距都改变的可逆抑制剂可以被判断为_。A、竞争性抑制剂 B、非
6、竞争性抑制剂 C、混合型抑制剂 D、非竞争性抑制剂或混合型抑制剂10.酶促合成 Ile-tRNA 的反应经过 Ile-AMP 中间体:Ile+ATPIle-AMP+PPi;Ile-AMP+TrnaIle-tRNA+AMP。若以此反应从 32p 标记的 PPi 合成32p 标记的 ATP,除了 aa-tRNA 合成酶外.还需要_。A、ATP 和 32PPi B、tRNA,ATP 和 32PPi C、Ile,ATP 和 32PPi D、Ile,AMP和 32PPi11.两株高矮不同的亲本进行杂交,子一代的株高比高的亲本还要高,决定株高的基因是_。A、显性基因 B、隐性基因 C、共显性基因 D、数量
7、性状基因12.用于氨基酸分析的双向纸层析属于_。A、交换层析 B、亲和层析 C、分配层析 D、薄层层析13.SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳用来测定蛋白质(酶)的表观分子量的依据是_。A、电泳迁移率与蛋白质的电荷性质(等电点)相关 B、电泳迁移率与蛋白质的分子构象相关C、电泳迁移率与蛋白质分子量的对数值线性相关 D、电泳迁移率与蛋白质资料来源：中国教育在线 http:/ http:/ B、蛋白质浓度变化和比活力变化 C、比活力变化和总活力变化 D、总活力变化和蛋白质浓度变化15.钠钾 ATP 酶催化 Na+与 K+的跨膜传送,每水解一分子 ATP 有_。A、2 个 Na+由细胞内到细胞外,2 个 K
8、+由细胞外到细胞内 B、2 个 K+由细胞内到细胞外,2 个 Na+由细胞外到细胞内C、3 个 Na+由细胞内到细胞外,2 个 K+由细胞外到细胞内 D、3 个 K+由细胞内到细胞外,2 个 Na+由细胞外到细胞内16.苍术苷是一种抑制剂,它抑制_。A、钠钾 ATP 酶 B、线粒体 ATP 合成酶 C、Ca2+ATP 酶 D、线粒体 ADPATP 传送载体17.在遗传病基因的定位克隆中,一般利用疾病基因和标记基因之间的_关系来定位目标基因。A、自由组合 B、相互分离 C、相互连锁 D、显隐性18.Dixon 作图法求可逆抑制剂的抑制常数是针对_。A、竞争性抑制剂 B、非竞争性抑制剂 C、反竞争
9、性抑制剂 D、混合型抑制剂19.硫胺素焦磷酸的主要作用是_。A、促进乙酰辅酶 A 生成 B、作为脱羧酶的辅酶 C、是辅酶 Q 的前体 D、促进脂肪酸 氧化20.细菌 ABC 转运蛋白的功能包括_。A、 促进药物扩散传送进入细菌 B、利用 ATP 的能量将药物传送到细菌外B、 C、将分泌蛋白传送到细胞外 D、促进脂多糖的分泌资料来源：中国教育在线 http:/ http:/ B、果糖-2,6-二磷酸是其一个调节剂,有效激活其活性C、ATP 是其底物,不会对其产生抑制效应 D、柠檬酸是其一个有效的激活剂22.青霉素的作用是抑制_。A、二磷脂酰甘油的合成 B、膜上磷脂交换蛋白 C、聚糖肽转肽酶 D、
10、D 氨基酸氧化酶23._不是证明核酸是遗传物质的研究.A、孟德尔的豌豆实验 B、艾弗里的肺炎球菌实验 C、贺希和切斯的噬菌体实验 D、康拉德的烟草花叶病毒实验24.由核 DNA 编码的膜蛋白是在_上合成的。A、核膜 B、高尔基体 C、内质网系 D、膜蛋白质合成小泡25. 噬菌体缺失突变体的 DNA 长度从 17 靘变成 15 靘,此突变件缺失了_碱基对。A、6.67103 B、5.88103 C 5.55103 D.5.2610326.端粒酶是一个核蛋白复合体。它能够_为模板合成 DNA。A、不用 DNA 或 RNA B、用核蛋白复合体中的 DNA C、用核蛋白复合体中的RNA D、用核糖体中
11、的 RNA27.反基因寡核苷酸(三螺旋形成寡核苷酸)抑制蛋白质表达是由于_。A、抑制靶基因的转录 B、抑制靶 mRNA 前体的加工 C、抑制靶 mRNA 的翻译 D、促进靶 mRNA 的降解28.用放射性同位素只标记细菌 DNA 而不标记 RNA,需在培养基中加_。A、 -32PdATP B、 -CATP C、3HTdR D、32P资料来源：中国教育在线 http:/ http:/ B、从葡萄糖合成糖原 C、从丝氨酸合成磷脂酰丝氨酸 D、从神经酰胺合成脑苷脂30.纯显性基因玉米穗长 20cm,纯隐性基因玉米穗长 4cm,每个基因的表现值为 4cm,则纯显性基因数有_个。A、3 B、4 C、5
12、D、6三、简答题:5 题,每题 5 分,共 25 分。1、一个多肽的一级结构为 LeuProSerTrpAla。试描述该多肽在20,0.01M Tris-HCl,pH 7.0 缓冲液中测得的紫外吸收光谱和荧光发射谱。2、请概述胰岛素如何调节糖原代谢以及胰岛素缺乏与糖尿病的内在关系。3、举出两种测定线粒体内膜细胞色素氧化酶活力的方法与原理。4、用 15N 同位素标记的 DNA 研究复制机制。如果 DNA 复制是全保的,则在普通的培养基中生长一代和二代后,15N 在预期的子代 DNA 中的分布将是如何的?5、从生物 A 中得到了一个基因的 DNA 序列和其编码的蛋白质的氨基酸序列;从生物 B 中得
13、到了一个不同基因的 DNA 序列和其编码的蛋白质的氨基酸序列。试从 DNA 序列和蛋白质序列的结构特点以及 DNA 和蛋白质的关系,说明生物是进化而来,而不是不同起源的。四、问答题:5 题,每题 10 分,共 50 分。1、蛋白质中硫水作用力主要由何驱动?疏水作用力与温度有何相关性,并解释之。2、某酶分别催化两种不同的底物发生同样的反应。如果该酶对底物 A 的Km 与 Vmax 值为 0.1mM 和 100 U/mg(1U 的酶为每分钟转换 1 靘 ol 底物的酶量),对底物 B 的 Km 与 Kcat 值为 5 霱和 50min-1,该酶的分子量为 50kDa。假设两种底物同时存在且浓度相同
14、,该酶催化两种底物的速度之比如何?3、试述胆固醇在人体中的三种生物学功能,列出胆固醇从乙酰辅酶 A 合成过程中的五个中间物,并说明 LDL 和 HDL 在胆固醇代谢中的作用。4、Thomas Cech 发现四膜虫核糖体 RNA (rRNA) 的前体能够自剪切为成熟资料来源：中国教育在线 http:/ http:/ Thomas Cech,如何设计实验证明这一发现。5、你克隆到的一个蛋白质,序列如下:001 MESADFYEVE PRPPMSSHLQ SPPHAPSNAR LWLSPGRGPR AAPSPTCRPG AAGRICEHET061 SIDISAYIDP AAFNDEFLAD LFQH
15、SRQQEK AKAAAGPAGG GGDFDYPGAP AGPGGAVMSA121 GAHGPPPGYG CAAAGYLDGR LEPLYERVGA PALRPLVIKQ EPREEDEAKQ LALAGLFPYQ181 PPPPPPPPHP HASPAHLAAP HLQFQIAHCG PTPPPTPVPS PHAAPALGAA GLPGPGSALK241 GLAGAHPDLR TGGGGGGSGA GAGKAKKSVD RDKAKQRNVE LTQQKVELTS DNDRLRKRVE301 QLSREADTLR GIFRQLPESS VKLAMATARL ARGCGTLAGR PPGLWR
16、PRGW FRVAGSGCPG361 RASQD根据已知的研究结果表明它是一个转录因子。从序列计算得到的分子量为40 kDa,但从蛋白质用离心沉降方法得到的分子量为 80 kDa,你认为最可能的原因是什么?请根据你提出的假说设计试验,并预测如果假说正确时的实验结果。根掘氨基酸的序列,你认为什么特点使得这个蛋白质发生了你所提出的假说中的现象,并设计实验加以验证。答案及解析一,是非题1 (-)如:变性有时包括二硫键(共价键)的断裂如经典牛胰 RNase 变性和复性,以及抗体2 + 如:杆菌肽3,- Kcat 型专一性不可逆抑制剂,这种抑制剂是根据酶的催化过程来设计的,它们与底物类似,既能与酶结合,
17、也能被催化发生反应,在其分子中具有潜伏资料来源：中国教育在线 http:/ http:/ reactive group),该基团会被酶催化而活化,并立即与酶活性中心某基团进行不可逆结合,使酶受抑制。此种抑制专一性强,又是经酶催化后引起,被称为自杀性底物。4 (+)5,- 反例 Ras 蛋白6, +用红外光谱研究血清白蛋白在水溶液中的二级结构构象的变化7,+8,-9,+10,-11,-12,+13,+14,-15,+ 单核巨噬细胞:因其表面也具有 CD4 受体,所以也易被 HIV 侵犯,研究发现被 HIV 感染的单核巨噬细胞有播散 HIV 感染的作用,它可以携带 HIV 进入中枢神经系统。在脑细
18、胞中受 HIV 感染的主要是单核 巨噬细胞,如小胶质细胞。16,+17,-与核糖小亚基 16sRNA 结合18,-19,+20,(+)二,选择题资料来源：中国教育在线 http:/ http:/ P3344,D5,D6,D7,C8,B9,D10,D11,D现代遗传学12,C13,C14,C15,C16,D17,C18,D19,B 上 P44120,B21, B资料来源：中国教育在线 http:/ http:/ )*1000*10.4/3.54=588026,C27,A 三链 DNA 结构在生物体内的存在意义和可能的生物学功能。如第三条寡聚核苷酸链(简称 ODN)可以通过作用于控制基因转录的转录
19、子、增强子和启动子区,增强或抑制基因的表达;28,C29,A30,B(20-4)/4=4三,简答题1, 该肽含有 Trp 是芳香族氨基酸,在近紫外区有吸收峰,雖 ax=280,会在280nm 左右波长下有吸收峰。由于吸收辐射能而被提升到激发电子态的分子通过激发能的非辐射转移即荧光发射。因此荧光的波长要比激发光长。芳香族氨基酸如 Trp,荧光发射光谱在 348nm 附近有发射峰,呈现较弱的荧光。2,答:。当胰岛素与其受即受体酪氨酸激酶体结合后,就激活胞内的酪氨酸蛋白激酶活性。激活一系列激酶,最终使蛋白磷酸酶 1 (PP1)活化。蛋白磷酸酶1 (PP1)使糖原合酶和糖原磷酸化酶去磷酸化。即糖原合酶
20、被激活而磷酸化酶失活。表现出的整体的生物学效应就是促进糖原合成,抑制分解。糖尿病的发生直接原因是由于血中胰岛素含量的不足。胰岛素缺乏,葡萄糖不能正常进入细胞,滞留在血液中。而此时胰高血糖素的浓度超过胰岛素的浓度,一方面导致肝脏中过果糖-2,6-二磷酸的浓度下降,使糖酵解受到抑制,又刺激了葡糖异生作用,另一方面又加速了糖原的降解,产生的过量葡萄糖也进入血液,这样就造成血液中的糖浓度很高,通过肾脏时,多余的糖无法被肾小管重吸收而排入尿中导致了糖尿病。(具体的途径见下 P192,P558 和上 P564)资料来源：中国教育在线 http:/ http:/ C 再还原和氧化型的光吸收不同。当细胞色素氧
21、化酶氧化细胞色素 C 时,测定光吸收的变化就可以测定酶的活力了方法二:同位素测定法。 用放射性同位素的底物,经酶作用所产生的产物,通过适当的分离,测定产物的脉冲数换算出酶的活力。用氧 18 标记的氧气作为底物,经酶作用后被还原为含氧 18 的水。反应后将底物产物分离,测定脉冲数换算成酶活力。(此外还有:在体外构建的系统中,一用膜片钳技术测膜两侧的膜电位变化;二是测 pH 计测酸碱度变化。pH 法,氧电极法 )4.如果是全保留复制机制,生长一代产生两种 DNA 分子各一个。一个分子双链是 N15,另一个双链是 N14。生长二代,产生 4 个分子两种 DNA,一分子全部含N15 和 3 分子全部含
22、 N14。没有杂合的。5 答: DNA 均有由含 ATCG 四种碱基的脱氧核糖核甘酸组成,蛋白质均由 20种氨基酸组成;在 DNA 序列与氨基酸组成对比上,三个 dNTP 对应一个氨基酸,且有些相同的氨基酸对应相同的三连密码子,可以推测 DNA 指导蛋白质合成基本上使用同一套遗传密码,两者 DNA 有相同的上游控制序列,相同的起始密码子和终止密码子。在这个意义上说明生物是由进化而来的,而不是不同起源。四,问答题:1 答:介质中球状蛋白质的折叠总是倾向与把疏水残基埋藏在分子的内部,这一现象称为疏水作用。它在稳定蛋白质的三维结构方面占有突出地位。疏水作用其实并不是疏水基团之间有什么吸引力的缘故,而
23、是疏水基团或疏水侧链出自避开水的需要而被迫接近。蛋白质溶液系统的熵增加是疏水作用的主要动力。当疏水化合物或基团进入水中,它周围的水分子将排列成刚性的有序结构,既所谓的笼形结构。与此相反的过程的过程(疏水作用)使排列有序的水分子被破坏,这部分水分子被排入自由水中,这样水的混乱度增加,既熵增加,因此疏水作用是熵驱动的自发过程。疏水作用在生理温度范围内随温度升高而加强,T 的升高与熵增加具有相同的效果,但超过一定的温度后 5060,又趋减弱。因为超过这个温度疏水基团周围的水分子有序性降低,因而有利于疏水基团进入水中。2.;在生理条件下,大多数的酶不被底物所饱和。且底物浓度与 Km 相比要小的多资料来
24、源：中国教育在线 http:/ http:/ =Kcat/Km E SKcat 指一定条件下,每个单位时间内每个酶分子转化的底物分子数。KcatA 可以用 Vmax 换算过来KcatA=100U/mg = 100umol/mg .min = 100umol . 50kDa /0.001mol;= 5000/minVa/Vb= KcatA/KcatB .KmA/KmB=53 答:胆固醇的功能:a 生物膜的组成成分,对调节膜流动性有很大作用。b作为激素的前体。 在体内转化为类固醇激素,例如:雌雄性激素,和肾上腺皮质激素等。c 形成胆汁盐促进脂类在小肠的消化吸收。胆固醇合成中的五个中间物:乙酸,甲羟
25、戊酸,异戊二烯衍生物(异戊酰焦磷酸,二甲烯丙基焦磷酸),角鲨烯,羊毛固醇。LDL 介导胆固醇的转运,将胆固醇从血液运送到靶组织细胞内;抑制靶组织的胆固醇及 LDL 受体的合成。HDL 可以减少胆固醇的沉积,防止血栓形成。HDL 可以回收从死亡,衰老细胞,更新的细胞膜被降解血浆脂蛋白等释放到血浆中的胆固醇。其上的蛋白将其酯化为胆固醇酯并将它转移到 LDL 中。4 先制备编码 rRNA 前体的 DNA 片段,可以将编码这个前体的 DNA 克隆到大肠杆菌质粒中,扩增后提取质粒。在体外构件一个 RNA 转录体系,转录出 RNA 前体。提取体系中 RNA, 在分有或无四膜虫蛋白质两组别, 其中一组用加热
26、,有机溶剂和蛋白酶来变性蛋白质,纯化前 rRNA。待反应充分后,电泳分离,分别观察结果,如果发现在有无蛋白质的条件下,前体 RNA 都被分成几个不同的条带而且带型一样,可以证明该前体 RNA 能自我剪接,而且不受四膜虫蛋白质影响.然后可以用电泳来检测条带,是否发生了自剪切.条带可剪切回收,分析 RNA 序列,得到剪接位点.5 答:最可能的原因是该转录因子是二聚体,且由相同的两个亚基构成。可以分离纯化蛋白质,用 SDS-PAGE 鉴定,如果凝胶上只有一条带且分子量为 40kDa,即可证明。根据氨基酸的序列,相互作用自 281 到 344,每七个氨基酸有一个亮氨酸,且在该蛋白序列中富含脯氨酸和谷氨酸,这些特点说明该转录因子可能是亮氨酸拉链,依赖亮氨酸侧链间的疏水相互作用形成二聚体。资料来源：中国教育在线 http:/ http:/ X 衍射测结构,直接分析)
