核仁组织者区(NOR)的银染显示法,实验目的实验原理实验步骤作业,一、实验目的,掌握核仁组织者区(NOR)的快速银染显示法,并了解NOR在细胞中分布情况。,二、实验原理,当NOR在间期转录时,产生一种与转录活动有关的酸性蛋白,此蛋白可保留至中期并能将染液中的银离子还原为金属银而显现为黑色。所以银染法可在中期染色体上显示具有转录活性的NOR数目。而且,染色的深黑程度,还可以反应出基因的活性高低。,三、实验步骤,快速银染法:在染色体标本上滴加含1%甲酸的2%明胶水溶液3滴,再加50%硝酸银3滴,混合后盖上盖片,将标本置于60恒温台上处理至液体为棕黄色为止,自来水冲洗,空气干燥,镜检。,实验结果,若染色适中,间期核及染色体为金黄色,油镜观察,可在某些染色体上看到成对的黑色小点,此即为银染NOR(Ag- NOR)。 若整张片子色淡,间期核及染色体都不易看清,为染色时间不足,在未滴过香柏油的情况下,可重新续染。 若染色时间偏长,则染色体为棕色,此时,仍可看到黑色的NOR,只是NOR与染色体间的反差较低。染色严重过度时,整张片子都布满黑色沉淀,这样的标本一般都丢弃不用。若标本珍贵,也可采用特殊方法褪色后重新染色。,四、作 业,在油镜下绘制一中期分裂相图(Ag-NOR的位置、数目和形态)。,