1、12 月 11 日 PCR 技术高考频度： 难易程度：下列关于 PCR 技术的叙述，正确的是A该技术应用体内 DNA 双链复制原理，也需要模板、原料、能量、酶等条件BPCR 技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上C该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的D该技术需要解旋酶和热稳定的 DNA 聚合酶【参考答案】A1标准的 PCR 过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是A92 、50 、72 B72 、50 、92 C 50 、92 、72 D80 、50 、72 2用 PCR 方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱。其中：1 号为
2、DNA 标准样液（Marker），10 号为蒸馏水，PCR 过程中加入的模板 DNA 如图所示。据此作出的分析不合理的是APCR 产物的分子大小在 250500 bp 之间B3 号样品为不含目的基因的载体 DNAC 9 号样品对应植株不是所需的转基因植株D10 号可确定反应体系等对结果没有干扰3 PCR（多聚酶链式反应）技术是一项在生物体外复制特定的 DNA 片段的核酸合成技术，如图表示合成过程。请据图分析回答下列问题：（1 ） A 过程高温使 DNA 变性解旋，对该过程的原理叙述，正确的是：_ 。A该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键B该过程用限制酶破坏磷酸二酯键C该过程不需要解旋酶的作用D该过
3、程与人体细胞内的相关过程完全相同（2 ） C 过程要用到的酶是 _。这种酶在高温下仍保持活性，因此在 PCR扩增时_（填“可以”或“不可以” ）一次性加入。PCR 反应的进行除需提供酶外，还需要满足的基本条件有_ 。（3 ）如果把模板 DNA 的两条链用 15N 标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“95 55 72 ” 温度循环 3 次，则在形成的子代 DNA 中含有 15N 标记的 DNA 占_。（4 ）如果模板 DNA 分子共有 a 个碱基对，其中含有胞嘧啶 m 个，则该 DNA 复制 10 次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸_个。1 【 答案】A【解析】标准的 PCR 过程一般分为变性、复性、延伸三大步，其中变性需要高温使DNA 解螺旋，故为 9096 ；而复性是在较低温度下，两种引物和 DNA 单链相结合，故温度为 4060 ；延伸是在 DNA 聚合酶的作用下合成新的 DNA 链，温度应为 DNA 聚合酶的最适温度 7075 ；故选 A。3 【 答案】（1）C（2 ） TaqDNA 聚合酶 可以 DNA 模板、引物、四种脱氧核苷酸、适当的温度（3 ） 25%（4 ）（2 101 ）（a m）
