1、实验二 温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响温度、p H 对酶活性的影响一、实验目的了解温度对酶活性的影响。了解酶活性的最适 pH 及掌握一种检测最适 pH 的方法。二、实验原理(请同学们自已补充)三、实验步骤1、温度对酶活性的影响取 3 支试管,编号后按下表加入试剂试管编号试剂1 2 30.2%淀粉溶液(d) 1.5 1.5 1.5稀释唾液/ml 1 1 无煮沸过的稀释唾液/ml 无 无 1摇匀后,将 1、3 号两试管放入 37 摄氏度恒温水浴中,2 号试管放入冰水中。10min 后取出,将 2 号试管内的液体分为两半,用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3 号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度
2、。将 2 号试管剩下的一半溶液放入 37 摄氏度水浴中继续保温 10min 后,再用碘液检验,结果如何?记录并解释结果。注意事项:唾液制备时,先用蒸馏水漱口,以清除食物残渣,再含一小口蒸馏水,0.51min 后,使其流入量筒,并稀释到 50ml。2、pH 对酶活性的影响取 4 个标有号码的 20ml 试管。用吸管按下表添加 0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液和 0.1mol/L 柠檬酸溶液以制备 pH=5.08.0 的 4 种缓冲液。试管编号试剂1 2 3 40.2mol/L 磷酸氢二钠/ml5.156.057.729.720.1mol/L 柠檬酸/ml4.853.952.280.28pH 5
3、5.8 6.8 8从 4 个试管中各取缓冲液 3ml,分别注入到 4 支带有号码的试管中,随后于每个试管中添加 0.5%淀粉溶液 2ml 和稀释唾液 2ml。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为 1min。将各试管内容物混匀,并依次置于 37 摄氏度恒温水浴中保温。第 4 管加入唾液 2min 后,每隔 1min 由第 2 管取出一滴混合液,置于白瓷板上,加 1 滴碘化钾-碘溶液,检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时,向所有试管中依次添加 1 或 2 滴碘化钾-碘溶液。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第 1 管起,均为 1min。观察各试管内容物呈现的颜色,分析 pH 对唾液淀粉酶活性的影
4、响。注意事项:1)从第三管中取混合液,是因为它的 pH 接近唾液淀粉酶的最适 pH。2)间隔 1min,是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色,保证各试管反应时间相同。四、实验结果1、温度管号 1 2 32、pH1 2 3 4原因分析:激活剂和抑制剂对酶活性的影响一、实验目的了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。二、实验原理三、实验步骤取 4 支试管按下表加入试剂,观察现象并记录。试管编号试剂1 2 3 40.1%淀粉溶液/ml 1.5 1.5 1.5 1.51%CuSO4 溶液/ml 0.5 无 无 无1%NaCl 溶液 /ml 无 0.5 无 无1%Na2SO4 溶液/ml 无 无 0.5 无蒸馏水/ml 无 无 无 0.5稀释唾液/ml 0.5 0.5 0.5 0.537 摄氏度恒温水浴 5min碘化钾-碘溶液/滴 2 2 2 2四、实验结果1 2 3 4原因分析: