1、实验名称： ABO 血型鉴定实验人员：实验日期： 年 月 日 室温：27 大气压：1 个标准大气压（一） 实验目的学习 ABO 型血的鉴定原理和方法。观察红细胞凝集现象，了解抗原抗体反应。（二）实验原理血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在 ABO 血型系统中，红细胞膜上抗原分 A 和 B 两种抗原，而血清抗体分抗 A 和抗 B 两种抗体。A 抗原加抗 A 抗体或 B 抗原加抗 B 抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准 A 型血清（含有抗 B 抗体）与标准 B型血清（含有抗 A 抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无 A 或/和 B 抗原。在 ABO 血型系
2、统，根据红细胞膜上是否含 A、B 抗原而分为 A、B、AB、O 四型。（三）实验材料消毒采血针；载玻片；消毒棉签；抗 A、抗 B 血型定型试剂；75%乙醇；受检者血液（四）实验步骤（1）取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明 A 及 B，并分别各滴入 A 及 B 标准血清一滴。 （2）细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴，加入含 1ml 生理盐水的小试管内，混匀，即得约 5红细胞悬液。采血时应注意先用 75酒精消毒指尖或耳垂。 （3）用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。 （4）竹签两头分别混合，搅匀。 （5） 1030min 后观察
3、结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。 （6）判断血型根据被试者红细胞是否被 A，B 型标准血清所凝集，判断其血型。（五）实验结果：表 1 实验情况标准 A 血清 标准 B 血清人血凝集情况 不凝集 凝集从上表可知：人血与标准 A 血清（含抗 B 抗体）混合后不发生凝集；人血与标准 B 血清（含抗 A 抗体）混合后发生凝集。（六）讨论：血型通常是指红细胞膜上特异性抗原的类型。若将血型不相容的两个人的血液滴加在玻片上并使之混合，则红细胞可凝集成簇，这一现象称为红细胞凝集。在补体的作用下
4、，可引起凝集的红细胞破裂，发生溶血。当给人体输入血型不相容的血液时，在血管内可发生红细胞凝集和溶血反应，甚至危及生命。红细胞凝集的本质是抗原-抗体反应。红细胞膜上抗原的特异性取决于抗原决定簇，这些抗原在凝集反应中被称为凝集原。能与红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体则称为凝集素。凝集素为 -球蛋白，存在于血浆中。发生抗原-抗体反应时，由于每个抗体上具有 210 个抗原结合位点，因此抗体可在若干个带有相应抗原的红细胞之间形成桥梁，使它们聚集成簇，从而发生凝血。根据红细胞膜上是否存在 A 抗原和 B 抗原可将血液分为四种 ABO 血型：红细胞膜上只含有 A 抗原者为 A 型；只含B 抗原者为 B 型
5、；含有 A 与 B 两种抗原者为 AB 型；A 和 B 两种抗原均无者为 O 型。不同血型的人的血清中含有不同的抗体，但不会含有与自身红细胞抗原相对应的抗体。在 A 型血的血清中，只含有抗 B 抗体；B 型血的血清中只含有抗 A 抗体；AB 型血的血清中没有抗 A和抗 B 抗体；而 O 型血的血清中则含有抗 A 和抗 B 两种抗体。表 2 ABO 血型中的抗原和抗体血 型 红细胞膜上所含的抗原 血清中所含的抗体O 无 A 也无 B 抗 A 和抗 BA A 抗 BB B 抗 AAB A 和 B 无抗 A 也无抗 B正确鉴定血型是保证输血安全的基础。常规 ABO 血型的定型包括正向定型和反向定型。正向定型是用抗 A 与抗 B 抗体检测来检查红细胞上有无 A 或 B 抗体；反向抗体是用已知血型的红细胞检测血清中有无抗 A 或抗 B 抗体，结果见表 10-3.同时进行正向定型和反向定型是为了相互印证。表 3 红细胞常规 ABO 定型（为发生凝集；为不凝集）正向定型 反向定型 血型B 型血清 A 型血清 O 型血清 A 型 B 型 O 型（抗 A） （抗 B） (抗 A，抗 B) 红细胞 红细胞 红细胞 O A B AB（七）结论：待检血液的血型为 A 型
