1、临床检验标本采集手册芜湖县中医院检验科临床检验标本采集指南及注意事项临床检验标本采集和处理问题已普遍引起了人们的重视。芜湖县中医院检验科每年参加省临床检验中心的室间质评活动,并取得较好成绩。为做到临床检验质量保证,必须做到对实验检查的全过程进行全面的质量控制和质量管理。这里包括:实验前(分析前) 、实验中(分析中)和实验后(分析后)三个阶段的质量控制,其中实验前质量控制尤其重要。分析前质量管理是一个最薄弱的环节,试验误差中 6070%来自实验前,而且实验前误差是仪器、试剂、质控品和标准品等再好也无法解决的。实验前质量控制主要包括:病人准备 标本采集 标本保存和运送 标本处理等。一 、 病 人
2、准 备1患者的状态:一般需在安静状态下采集标本,如患者处于激动、兴奋、恐惧状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。运动后,由于能量消耗、体液丢失、剧烈呼吸,可造成许多检验结果的变化,如谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶等一时升高,还可引起血中钾、钠、钙、白蛋白、血糖等成分的变化。2. 患者的饮食:2.1 多数试验要求空腹采血(空腹 12 小时左右),最好是早晨空腹采血。研究表明,餐后血液中 GLU、TG、ALT、ALP、BUN、Na 等均可升高。进食高蛋白或高核酸食物,可引起血中尿素(Urea)及尿酸(UA)的增高;进食高脂肪食物,可引起 TG 的大幅度增高。餐后采集的血液样本,其血清常出
3、现乳糜状,影响到许多检验测定的正确性。一些饮料如咖啡,也可使淀粉酶(AMY)、促甲状腺素(TSH)等升高。2.2 禁食过久也会影响检测结果。通常血糖浓度呈下降趋势;胆红素清除速率降低,引起血清胆红素浓度上升。绝食状态下脂肪酸和酮酸成为肌肉能量来源,因此血清中酮体、脂肪酸和甘油的浓度会显著增加。禁食 48 小时后,血清甘油三酯增加 20,此后又会下降。绝食使血清尿酸盐浓度显著上升。身体饥饿时醛固酮分泌增加,尿排钾增加引起血清钾降低。2.3 素食者:长期素食者低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)浓度都会偏低,总脂质和磷脂浓度也会减少,胆固醇和三酸甘油脂浓度可能只有杂食个体的三分之二。
4、2.4 咖啡因:咖啡、可乐、茶、以及多种药物都含有咖啡因,它是一种温和的刺激物和微弱的利尿剂。能刺激肾上腺髓质,促使儿茶酚胺分泌增加,使血糖浓度轻微上升、甘油三脂上升;但是血清胆固醇浓度会下降。2.5 乙醇:长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶(GGT)活性会上升,甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。中度酒精量会伤害骨骼肌细微结构,因此会使血清肌酸激酶(CK)活性上升。有报道喝酒会使 ALT 和 AST 测定值上升,不过少量饮酒的影响效应很低。2.6 吸烟:吸烟者会引起白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、红细胞数和血红蛋白增加、平均红细胞体积
5、偏高。抽烟者血浆 脂蛋白、胆固醇、甘油三脂等浓度高于未抽烟者,而高密度脂蛋白胆固醇低于未抽烟者。3药物的影响:药物对检验的影响非常复杂,在采样检查之前,以暂停各种药物为宜,如某种药物不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响。庆大毒素、氨芐青毒素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加、维生素 C 可使血糖、胆固醇、甘油三脂、尿酸严重降低。4体位变化:体位影响血液循环,由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆 ALB、TP、酶、Ca、胆红素、TC 及 TG 等浓度增高;Hb、HCT、RBC 等亦可增加。故采集标本时要注意保持正确
6、的体位和保持体位的一致性。二、标本采集标本采集是直接关系检验结果的基本要素,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。1、血液标本1.1 叮嘱病人采血前 4 小时勿喝茶或咖啡、勿吸烟饮酒。尽量了解病人对刺激物和成瘾药物的接触史,供评价检验结果时参考。1.2 采用正确采血方法,尽量统一采血姿势,输液病人在不能停输的情况下静脉采血一定要注意远端原则(输液病人要在对侧手静脉采血) 。当需要重复使用止血带时,应使用另一上臂。1.3 采血时间在上午 7:309:30 时进行,采血前病人应禁食 12 小时。采血尽量安排在其他检查和治疗前进行。1.4 标本采集后,必须将试管
7、上标签贴于检验申请单上并当场核对病人住院号、床号、姓名无误,然后填写采集时间。1.5 真空采血管使用方法检验项目 标本要求 真空采血管类别 和颜色 采血量 混匀放置送检要求血常规 静脉随机全血 紫红色管,EDTA-K2 抗凝管 2ml 立即混匀 5-8 次,竖置放入试管架,2 小时内送检ABO、RH 血型 静脉随机全血 紫红色管,EDTA-K2 抗凝管 2ml 立即混匀 5-8 次,竖置放入试管架,2 小时内送检交叉配血 静脉随机全血 紫红色管,EDTA-K2 抗凝管 2ml 立即混匀 5-8 次,竖置放入试管架,2 小时内送检糖化血红蛋白 静脉随机全血 紫红色管,EDTA-K2 抗凝管 2m
8、l 立即混匀 5-8 次,竖置放入试管架,2 小时内送检血凝检验 静脉无脂血全血 兰色管,枸椽酸钠1:9 抗凝 2ml 立即混匀 5-8 次,竖置放入试管架,2 小时内送检血沉检验 静脉随机全血 兰色管,枸椽酸钠1:4 抗凝 2ml 立即混匀 5-8 次,竖置放入试管架,2 小时内送检生化类检验 空腹静脉全血 红头管,无抗凝剂 3-5ml 竖置放入试管架,2 小时内送检输血前检查 空腹静脉全血 红头管,无抗凝剂 3-5ml 竖置放入试管架,2 小时内送检免疫类检验 空腹静脉全血 红头管,无抗凝剂 3-5ml 竖置放入试管架,2 小时内送检胰岛素功能、C 肽空腹 1 小时、2小时采血 红头管,无
9、抗凝剂 3-5ml竖置放入试管架,2 小时内送检甲状腺功能 空腹静脉全血 红头管,无抗凝剂 3-5ml 竖置放入试管架,2 小时内送检肿瘤标记物 空腹静脉全血 红头管,无抗凝剂 3-5ml 竖置放入试管架,2 小时内送检乙型肝炎 DNA 空腹静脉全血 红头管,无抗凝剂 3-5ml 竖置放入试管架,2 小时内送检血气分析 随机动脉全血 注射器抽肝素抗凝动脉血 2ml 立即混匀 5-8 次,隔绝空气立即送检采集静脉血样顺序:血培养红头管兰头管紫红头色头管黄头管2 . 尿液标本2.1 尿标本受饮食、运动、药物量等因素的影响,易于出现假阳性和假阴性结果,如饮食性蛋白尿、饮食性糖尿、维生素 c 干扰隐血
10、结果等。餐后尿(午餐后 2 小时收集的患者尿液)适用于尿糖,尿蛋白和尿胆原的检查。2.2 24 小时尿中化学物质的定量,应选择不同的防腐剂防腐。如甲醛:用于管型、细胞的防腐,按 05ml100ml(400g/L 甲醛)尿加入。甲苯(或二甲苯):用于尿糖、尿蛋白的防腐,按 05ml100m1 尿加入。2.3 清洁中段尿多用于尿细菌培养,要求无菌,冲洗外阴后留取标本。2.5 所有尿标本的收集都应足量,最少 12ml,最好 50ml,定时尿须全部收集,对女性患者应避免阴道分泌物、经血污染尿标本。3. 粪便标本采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便,对外观无异常的粪便须从表面、深
11、处等多处取材,一般以无滤漏容器留取 510g即可。采集后及时送检,如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度,且立即送检。4. 脑脊液、浆膜腔液、关节液均由临床医师穿刺采样,一般分装三个无菌管,第一管作细菌培养,第二管作化学分析和免疫学检查,生化检测管应用肝素钠抗凝。第三管作一般性状及显微镜检查。三管顺序不宜颠倒。标本采集后应立即送检,放置过久将影响检验结果。5. 阴道分泌物由妇产科医师采样后即时送检,运送过程中要求保温,否则影响滴虫动力,易于漏检。6. 微生物标本6.1 痰标本的采集:6.1.1 最好为清晨的第一口痰;在留取痰标本之前,用清水、冷开水反复漱口或牙刷清洁口腔和牙齿,有假牙者应取下,并尽
12、可能在使用抗生素之前采集标本。用力从气管深部咳出痰,直接吐入无菌痰杯中,标本量应1m1。支气管扩张患者,清晨起床后进行体位引流,可采集大量痰标本。6.1.2 小儿取痰法:由临床医生用弯压舌板或用手指叩胸骨柄诱发咳痰法采集。6.1.3 咽拭子标本的采集:嘱患者用清水漱口,由检查者将舌向外拉,使悬雍垂向外牵引,将咽拭子超过舌根到达咽后壁或悬雍垂的后侧,在咽部肉眼见明显发红或有假膜处局部反复涂抹棉拭,放入无菌拭管内立即送检。6.2 尿液标本的采集:常用中段尿采集法:女性病人以 1:1000 高锰酸钾冲洗外阴及尿道口后留取标本;男性病人应清洗阴茎头后留取标本。标本一般留取中段晨尿 23ml 于无菌容器
13、后立即(半小时以内)送检,不能立即送检者,应放在 4冰箱中保存。(注:送细菌培养的尿标本在膀胱内潴留超过 4 小时以上临床意义更大)。6.3 脓、创伤感染标本的采集:首先用无菌生理盐水拭净病灶表面的污染杂菌。对已破溃的脓肿先用无菌棉拭子把表面的脓粘干净后丢弃,再用无菌的棉拭子取底部的脓液和分泌物;未破溃的脓肿消毒皮肤后,用无菌注射器抽取脓液及分泌物立即送检。如深部脓肿在送需氧培养的同时应考虑送厌氧培养,厌氧培养标本应隔绝空气立即送检。6.4 穿刺液标本的采集:应在患者用药之前或停药 l2d 后进行穿刺,标本应立即送检或保存于4冰箱。脑脊液标本应保温,(2537C),并立即送检(用手心握住送检)
14、。6.5 大便标本采集:用无菌棉签挑取新鲜有脓血粘液部份的粪便 23 克置于无菌容器中立即送检。或用无菌肛拭子用甘油湿润后插入肛门 45cm(幼儿 23cm)处,轻轻在直肠内旋转,置于无菌容器内立即送检。三、标本保存和运送标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种因素的影响,可能使检验结果受或大或小的误差,因此必须正确掌握标本保存和运送。标本采集后尽量立即送检,如在室温放置时间过长会造成血液成分的变化(如血糖及酶活性降低),也可造成溶血现象。1.1 标本采集后连同检验申请单一起由专职护工或护士送检验科进行及时处理,并在合适的环境中存放。标本运送要注意防止标本外溢、蒸发和污
15、染(标本管要盖盖子)。1.2 标本送到检验科后,检验科将由专人负责标本的收集,核对和编号处理。标本上的姓名和编号一定要与检验申请单上病人姓名和编号相符,若不相符,要求重新采集标本或拒收此标本。检验科到临床各科收标本时间规定为每天早上 7:00 7: 30 收 集 血 液 标 本 (生 化 、 血 沉 、 血 凝 、 血 常 规 ), 错过收集时间请临床各科安排护士或护工将标本送到检验科进行检验。1.3 标本的保存:血液、大小便标本采集后必须在 1 小时内送到检验科进行检验,血沉、血气分析及各种细菌培养需立即送检。1.4 溶血对标本的影响:红细胞被破坏会严重影响实验结果的项目主要有:LDH、K、
16、Hb、ACP;有值得注意的影响的项目主要有:ALT、T4;有轻微影响的项目主要有:TP、ALB、ALP、AST、TBiL、WBC、Cr、Urea、UA、P、Mg、Ca。1.5 临床人员从病人采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验室人员接受临床标本,均应按标准化要求进行,并且一定要做到认真核对。包括标本来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等,标本送出人员和标本接受人员都要做认真的记录并签字。四、实验室标本处理实验室接受标本后应及时正确地予以处理,否则会影响检测结果的准确性。1.1 实验室接受标本后应尽快予以分类和离心。抗凝标本可采血后立即离心;促凝标本采血后 15min 后、非抗凝(无促凝)标本采血 3060min 后离心;1.2 一般标本为室温(最好是 2225)放置;冷藏标本(对温度依赖性分析物)应保持 28。1.3 采血管应管口(盖管塞)向上,保持垂直立位放置。五、关于实验室标本拒收规定实验室主班人员签字同意并有下列情况时可考虑标本拒收并及时与临床沟通:1、溶血、脂血严重者(视病情而定) 。2、血量不足或抗凝血中有凝块。3、标本采集与送检时间间隔过长。4、用错真空采血管。5、标本属性不清(唯一性标志错误或不清楚)。6、需要空腹抽血而未空腹的标本。