1、实验11 植物的组织培养,实验目的：1.进行菊花的组织培养 2.尝试植物激素的应用,快速繁殖,植物组织培养技术有何意义？,我国用花药培养法先后培育出优质高产的经济作物、粮食和蔬菜等新品种，广泛应用于果树和花卉的快速繁殖。借助于组织培养生产人工种子，解决某些作物品种繁殖力差、结子困难或发芽率低等问题。,生产药物、食品添加剂、香料、色素、和杀虫剂等。例如：紫杉醇，生物碱、紫草素等。转基因植物的培育植物去病毒,基础知识回顾（一）植物组织培养的基本过程 1.细胞全能性 2.细胞分化的概念； 3.离体植物细胞的脱分化和再分化。,植物组织培养的基本过程,基础知识回顾 （二）影响植物组织培养的因素培养基配制
2、 外植体的选取 消毒接种 培养 移栽和栽培等。,1、外植体的选取不同植物的组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基)大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 3、不同植物激素使用顺序和使用量,影响植物组织培养的因素,4、消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因： 5、pH、温度、光照 菊花： pH=5.8 温度控制在1822 每日光照12h,植物组织培养用的培养基，含有植物生长发育所需要的各种营养物质，这些营
3、养物质同样为细菌等微小的生物提供了适合的营养。在这种培养基上，细菌等微小的生物比植物细胞具有更强的新陈代谢能力，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此，植物组织培养要想取得成功，必须有效地防止细菌等的污染，保证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。为了达到这一要求，就要在植物组织培养过程中进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。,实验材料用具,培养瓶、镊子、超净台、灭菌锅、封口膜和橡皮圈、有棉球的广口瓶、酒精灯、三角漏斗、培养皿 MS培养基 萘乙酸、苄基腺嘌呤 发芽培养基 生根培养基,制备MS固体培养基,外植体消毒,接种,生芽,栽 培,实验过程,
4、移 栽,冲洗酒精无菌水冲洗氯化汞无菌水冲洗至少三次之上,生根,此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物体的光能自养。,在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程。,1、高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？,2、培养过程中为什么需要进行光照,思 考,？,1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。,3、在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？,4、激素使用的先后顺序对细胞分裂和分化的影响。,5、激素的用量比例对细胞分裂和分化的影响,结果分析与评价,（一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格,
