1、第五章 芳胺及芳烃胺类药物的分析 The Analysis of Aromatic amines and Aromatic alkylamines,芳胺类药物指氨基直接与苯环相连。,芳胺类* : 酰胺类、对氨基苯甲酸酯类苯乙胺类氨基醚衍生物,芳烃胺类药物指氨基在烃基侧链上。,1.结构特点：,苯胺酰基衍生物，酰胺基邻位 或对位有取代基。,第一节 芳胺类药物的分析,一、酰胺类,代表药物有：,对乙酰氨基酚,盐酸利多卡因,2性质：,利多卡因，酰胺基邻位上有两个甲基，有很大空间位阻，水解较为困难。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加热才能水解）, 水解后可发生重氮化反应 具有酰胺结构共性。 水解成芳伯氨基，
2、发生重氮化偶合反应。, 碱性 利多卡因侧链中具有叔氨N原子，显弱碱性，能与酸成盐，且能与生物碱沉淀试剂或重金属离子反应。, 与FeCl3反应 具有酚羟基或水解后能产生酚羟基（对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用呈色。, 紫外吸收 具有苯环结构，有紫外吸收。,二、对氨基苯甲酸酯类,具有对氨基苯甲酸酯基本结构。 具有游离的芳伯氨基。,1结构特点：,代表药物有：,盐酸普鲁卡因,苯佐卡因,盐酸丁卡因,2性质：, 具有芳伯氨基，发生重氮化 或重氮化-偶合反应, 碱性 具有脂烃胺侧链碱性，能与生 物碱沉淀试剂发生反应。, 具有酯的结构，容易水解。, 紫外吸收 具有苯环结构，有紫外吸收。,三、鉴别反应 1、重
3、氮化-偶合反应 具有芳伯氨基药物，如盐酸普鲁卡因等，在酸性溶液中与NaNO2TS发生重氮化反应，再与碱性-萘酚偶合产生红色偶氮化合物。具有潜在芳伯氨基，如对乙酰氨基酚，水解后可得芳伯氨基，能发生类似反应。, 盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与 NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物 沉淀。,2、三氯化铁反应 具有酚羟基（如对乙酰氨基酚），可与FeCl3TS作用显蓝紫色。,3、与生物碱沉淀试剂反应 具有烃胺侧链，与生物碱沉淀试剂反应. 根据沉淀颜色或测定沉淀熔点进行鉴别。常用生物碱沉淀试剂：氯化金试液,碘试液,碘化汞钾试液,苦味酸试液等。,4、与重金属离子反应,(1)与铜离子的反应,(2)与钴盐反
4、应,5羟肟酸铁的反应,具有酰胺结构，被H2O2氧化成羟肟酸，羟肟酸与FeCl3反应生成紫红色羟肟酸铁，随即变为暗棕色至棕黑色。如盐酸普鲁卡因胺。,具有酰胺结构的药物,羟肟酸,羟肟酸铁,6、水解产物的反应 (1)苯佐卡因的鉴别试验,(2).盐酸普鲁卡因的鉴别试验,三 杂质检查 1、对乙酰氨基酚杂质检查对乙酰氨基酚中除检查酸度、氯化物、硫酸盐、重金属、水分、炽灼残渣等一般杂质外，还需要检查：乙醇溶液的澄清度与颜色、有关物质（对氯乙酰苯胺） 、对氨基酚等特殊杂质。,对乙酰氨基酚以对硝基氯苯为原料合成。,(1)乙醇溶液的澄清度与颜色 对乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有颜色，则说明有杂质存在。
5、生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则导致对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。中间体对氨基酚有色氧化物在乙醇中显橙红色或棕色。,（2）有关物质（对氯乙酰苯胺）,对硝基氯苯为原料合成对乙酰氨基酚时，如发生这样的副反应就能够引入对氯乙酰苯胺。,副反应,TLC法 样品液, 对照液 对氯乙酰苯胺乙醚溶液（50g/ml）, 分离系统 硅胶GF254 氯仿-丙酮-甲苯（1352）, 限量:, 点样量 样品液：200l点于硅胶GF254薄层板上 对照液：40l, 判断 在254nm波长紫外灯下观察，供试品与对照品主斑点Rf值相同的斑点比较,不得超过其大小与颜色。,(3)对氨基酚 制备中乙酰化不完全或贮存不当发生水
6、解都能引入对氨基酚 检查原理： 对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较判断对氨基酚的限量。,检查方法：,限量：0.005%,四、含量测定 1亚硝酸钠滴定法 原理 具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与NaNO2反应生成重氮盐，根据消耗NaNO2量，计算出含量。潜在芳伯氨基药物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或还原，得芳伯氨基后，再进行测定。, 操作中的主要条件重氮化反应属于分子反应滴定液NaNO2及反应生成的重氮 盐都不稳定反应速度受多种因素影响,第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比较快。,反应速度与药物结构的关系,重氮化反应机制：,a. 当苯环上特别是氨基邻位
7、或对位上有吸电基时,如,吸电基通过诱导效应使氨基上电子云密度降低，从而碱性降低，游离芳伯胺浓度增大，所以反应速度就快。,等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速 度加快。,b. 当在苯环上有供电基时，则使反应速度降低。如 等。,供电基能使氨基碱性增强，这样氨基成盐的机会就增大，游离芳伯胺的浓度就减小，所以反应速度就慢。,反应速度与酸及酸度的关系 a. 酸的种类 重氮化反应在HBr、HCl、H2SO4中反应速度是 HBrHClH2SO4,K1比K2大300倍,用HBr时，生成NOBr量大，反应速度快。 但HBr价格贵，用盐酸代替，为加快反应速度，需加入KBr（催化剂）。,产生HBr与HNO2反应，可生
8、成大量NOBr，加快反应速度。,b. 盐酸的用量 理论上: 芳胺盐酸11mol 实际上: 芳胺盐酸12.56mol,原因： 强酸性可加速反应 重氮盐在酸性下稳定 酸性下避免副反应发生。,如盐酸量增加，则反应向左进行。 如盐酸浓度太大，反到会使游离芳伯氨的量减小（成盐），而影响重氮化反应速度，使反应速度减慢。,如酸度不足则没反应的芳胺与生成的重 氮盐产生偶氮氨基化合物，而影响测定 结果。,反应速度与滴定时温度的关系一般，温度升高反应速度加快。 但重氮化反应所生成的重氮盐不稳定，温度升高重氮盐分解速度也加快。另外，温度高时，滴定液亚硝酸钠也容易分解逸失，而影响测定结果。 所以，重氮化反应应在低温条
9、件下进行。,中国药典规定：在30C以下，把滴定管尖端插入液面下处进行滴定。在滴定时一边搅拌一边加入大部分标准溶液。,到近终点时把滴定管提出液面， 用水冲洗后再继续滴定至终点。,标准溶液在液面下加入，可避 免NaNO2挥发。,反应速度与滴定速度的关系 重氮化反应属分子反应，反应速度比较慢，滴定速度不能过快。尤其是近终点时，更要慢慢地滴定。近终点时，游离芳伯胺浓度非常低，反应速度就更慢了。所以，每加一滴标准液后，要搅拌15分钟后再判断终点。, 指示终点的方法 重氮化滴定法指示终点的方法有:永停法电位法外指示剂法内指示剂法,我国药典主要采用永停滴定法指示终点,永停法 原理： 在被测溶液中插入两个相同
10、铂电极，在两个电极间加10200mV电压，并且在回路中串联一个灵敏的检流计（10A9/格）。 当用NaNO2滴定时，在终点前回路中没有电流，电流计指针指零。 当到达滴定终点时，由于溶液中有微过量的NaNO2，使得在两个电极上发生氧化还原反应,阳 极：,导致在两电极间有电子流动，从而回路中有电流产生，使得电流计指针发生偏转并且不再返回零点。,阴 极：,电位法 在被测溶液中插入甘汞-铂电极， 到达滴定终点时，溶液中稍过量的NaNO2使电位产生突跃，从而指示终点。 USP采用这个方法指示终点。,外指示剂法 淀粉-KI糊剂或试纸,原理：当达到滴定终点时，溶液中稍过量的NaNO2在酸性条件下氧化KI析出
11、I2，I2遇淀粉显蓝色。,使用方法： 滴定时，把淀粉-KI试液滴在白磁板上，用玻璃棒蘸取少量被滴定的溶液，在白磁板上划，如果立即出现蓝色即已到滴定终点。,外指示剂法的缺点： 由于滴定的溶液是强酸性，KI遇光能被空气氧化析出碘，所以，在没有达到终点时，就有可能呈现蓝色，而造成误判。 由于经常蘸取溶液进行试验，可造成滴定液的损失而带来误差。 方法难掌握。,内指示剂法 内指示剂法指示终点，操作简便，但生成重氮盐一般都带有颜色，干扰指示剂颜色变化的观察，尤其是颜色很深时，更是这样。在重氮化滴定法中，内指示剂法应用不是很广泛。,第二节 苯乙胺类药物分析 一结构特点,具有烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。 多数
12、在苯环上有12个羟基取代基。 如在苯环3、4位上有羟基取代，则为儿茶 酚胺类药物。,代表药物,肾上腺素,去甲肾上腺素,二性质： 1. 易被氧化 邻苯二酚或苯酚结构，易被氧化呈色。,3. 具有旋光性具有手性碳原子，具有光学活性。,2. 显碱性具有烃胺侧链，显弱碱性。能与酸成盐。,三鉴别试验1.氧化反应,区别肾上腺素和去甲肾上腺素。,2. 三氯化铁反应：在0.1mol/L盐酸中与Fe3+显翠绿色，加氨试液后，显紫色或紫红色,四、肾上腺素中肾上腺酮的检查（讲过）,五、含量测定 （一） 非水溶液滴定法 （二） 溴量法,第三节 氨基醚衍生物类药物的分析,盐酸苯海拉明,一. 代表药物,1.结构,2. 性质 白色结晶性粉末 水中极易溶解,醇或氯仿中易溶,乙醚或苯中极微溶. 见光分解 酸性溶液中易分解. 紫外吸收,二、鉴别1、与硫酸反应：显色2、水解反应：3、与硝酸银反应形成白色凝乳状沉淀4、紫外、红外特征吸收,三、含量测定（一） 非水溶液滴定法（原料）（二） 酸性染料比色法（片剂，见生物碱章）（三）阴离子表面活性剂滴定法（其注射液）（四）HPLC （片剂）,
