1、,肿瘤标志物临床应用,广州南方医院肿瘤科 季晨阳,1846 尿Bence-Jones蛋白 1928 人绒毛膜促性腺激素HCG 1932 促肾上腺皮质激素ACTH 1949 碱性磷酸酶(骨肉瘤) 1957 TPA 1959 放射免疫分析RIA 1960 Ph染色体 1965 CEA 1969 癌基因 1971 酶免疫测定 1975 单克隆抗体和杂交瘤技术 1982 双抗夹心免疫分析 1982-至今 糖蛋白、粘蛋白、糖脂、细胞因子、 生长因子和核酸探针,一、肿瘤标志物临床生物学意义,凡是肿瘤组织和细胞（肿瘤与宿主）产生的异常表达的生物活性物质，能反映癌的发生发展恶性生物学行为的标志都属于这个范围。
2、细胞癌变后，其生物学特性表现为永生化，无限制增殖、分化不良、浸润周围组织和向附近组织扩散、转移。,肿瘤基因表型标志 癌细胞基因表达和调控异常;蛋白质合成紊乱;产生异常酶和同工酶;胚胎性抗原;异位性蛋白和激素等。出现于癌细胞转化、临床进展阶段。可作为临床诊断、治疗监测、疗效判断、复发和转移监测、鉴别诊断等指标。在肿瘤病人的组织和细胞、血清、体液和排泄物中检出。,2. 细胞转化相关的标志物；细胞骨架 3. 肿瘤基因标志理想的肿瘤标志物应具备以下特点： 特异性； 灵敏度高； 产量与肿瘤组织大小（负荷）成正比； 含量与肿瘤组织的（增殖）活性成正比。,灵敏度与特异性； 假阴性与假阳性； 肿瘤个体差异，多
3、指标互补性，阶段性变化； 结合临床，多角度； 诊断依据，确诊条件；,肿瘤标志 特异性 灵敏度 临床应用可行性 肿瘤基因标志 与细胞转化有关的标志 肿瘤基因表型标志 ,肿瘤标志物类型在临床应用的评价,肿瘤标志物 诊断特异性 诊断敏感性 CEA+CA153+TPA 0.90 0.88 CEA+CA153+SA+TPA 0.90 0.89 CEA+CA153+SA 0.75 0.74 CEA+CA153 0.68 0.74 TPA组织多肽抗原 SA唾液酸 (Sialin Acid),乳腺癌肿瘤标志物诊断的有效性,自分泌 旁分泌 内分泌,二、肿瘤标志物分类,1.原位性肿瘤相关物质, 如Bence-Jo
4、nes蛋白，各种细胞内的酶。 2.异位性肿瘤相关物质, 由恶变肿瘤细胞产生，不是同类正常 细胞的组分，如异位性激素，肺癌时ACTH升高，小细胞肺癌 NSE升高。 3.胎盘和胎儿性肿瘤相关物质，包括癌胚性物质, 如CEA、AFP、 BFP和TPA；胎盘性物质, 如妊娠蛋白（SP）、激素（hCG， PL）；其他癌胚性和胎盘性物质。 4.病毒性肿瘤性相关物质 肿瘤病毒分RNA和DNA病毒，相关病 毒有HTL1病毒（成人T细胞白血病相关病毒）；EB病毒 （Burkitt淋巴瘤、鼻咽癌）；HPV病毒（宫颈癌、皮肤癌）； HBV病毒（肝癌）和人细胞病毒等。,5.受体 转铁蛋白受体，类固醇激素受体（ER、P
5、R ）, 激素受体,白细胞分化抗原。 6.人肿瘤抗原, 糖链抗原(单克隆抗体所识别), 如CA242、CA199、CA153、CA125、CA50等。 7.癌基因与抗癌基因及其产物，如p53基因失活，ras基 因激活, c-erbB-2过度表达等。 8.其他。,三、肿瘤标志物的临床意义,1.定性定量 2.定性、定位、定量(半定量) 3.免疫组化定性、半定量,肿瘤高危人群的普查筛选 原发灶的发现，如用PET技术，ECT免疫技术,肿瘤免疫显像 肿瘤的治疗选择 肿瘤治疗的化疗动态监测和疗效评价,手术、放疗和化疗后肿瘤复发转移的监测和追踪监测肿瘤的组织来源依据和肿瘤鉴别诊断 预后判断 免疫治疗、生物治
6、疗和基因治疗的靶点确定 其他,肿瘤标志物 内分泌治疗 化 疗 EGFR+ 差 无价值 IGF-1 好 HER-2/neu+ 差 好 细胞增殖率 差 好 ER 好 好 PR 好 好 uPA+ 差 ,乳腺癌肿瘤标志物的治疗选择意义,四、常用肿瘤标志物,2-MG(2-Microglobulin),人类2 MG 11.8KDa多肽 正常值：0-6g/ml 意 义： 淋巴源性恶性肿瘤，多发性骨髓瘤； 肾脏疾病，传染病、爱滋病、肾移植急性排斥标志。,2微球蛋白由浆细胞分泌与全身瘤细胞总数有显著相关性,血清2 MG蛋白水平与体内骨髓瘤细胞负荷水平密切相关。 I期 血清2 MG 30g/L II期 血清2 M
7、G6.0mg/L 血清白蛋白30g/L III期 血清2 MG6.0mg/L 血清白蛋白30g/L,CA242 （0-20U/ml）,CA242抗原决定簇在唾液酸化路易氏A抗原(CA19-9)Sialylewis(SLea)粘蛋白上。恶性肿瘤中，CA242抗原较SLea更有特异性，尤其肝、胆、胰疾病中，其高特异性引人注目。 胰腺癌 特异性 90%灵敏度 70-80% 结直肠癌Positive marker Specificity SensitivityCA242 87% 60CEA 86% 76%,CA199 肿瘤相关粘蛋白 胰腺癌、结直肠癌、胃癌、胆管癌。 （0-37U/ml）,意 义:1.
8、鉴别胰腺良恶性肿瘤；2.治疗病人追踪观察；3.监测肿瘤复发。,CA15-3,（0-30U/ml）MUC-1乳腺癌粘蛋白，分子量40万；乳腺癌的血清标志物（肿瘤细胞分泌）。乳腺癌灵敏度86%；相关性0.95。,CA125 （0-35U/ml）类似粘蛋白的高分子糖蛋白复合物，分子量 200-10000KDa CA125抗原有两个互不相关的抗原区域1.OC125单抗识别2.M11单抗识别 临床意义: 卵巢癌(浆液性)临床相关性0.95；90%特异性,CA72-4 正常值 0-6U/ml高分子粘蛋白 临床意义： 1.卵巢癌阳性率44.8%，特别粘液性癌 2.对胃癌有较高敏感性和特异性 3.与CA199
9、、CEA联合可提高胃癌检出率 4.与CA125联合使用对卵巢癌有较高特异性和灵敏度,胃癌抗原MG-Ag,胃癌 （3.6 0.7U/ml） MG-Ag 55%胃癌升高，假阳率5%; 与 CA125、CA153、CA19-9、AFP、 PSA不产生交叉反应。 CEA ： 20-30%升高； CA199： 80%升高(假阳率30%)； CA50、CA72-4：55-60%(假阳率30% )。,NSE (神经元特异性烯醇化酶)（0-13g/L）神经组织和外周神经内分泌组织糖酵解过程中的一种酶，与肿瘤细胞胺类代谢系统(APUD)有关。 意 义： 1.神经内分泌系统肿瘤2.SCLC3.神经母细胞瘤4.精原
10、细胞瘤5.中枢神经系统损伤,角 蛋 白,SCC 鳞状细胞癌抗原 TPS 角蛋白18-M3 Cyfra21-1角蛋白19 TPA角蛋白8、18、19,SCC (Squamous Cell Carcinoma)鳞状细胞癌抗原 1.5 ng/ml1977年Kato 从宫颈鳞状细胞癌肝转移细胞分 离,TA-4的14个亚片段之一，与角蛋白成份相关。特点： 对宫颈鳞癌、肺、头颈部鳞癌有临床意义，SCC下降治疗有效。首次治疗SCC升高表示进展。 较临床症状体征早七个月。 不能作为腺癌鳞癌的鉴别诊断依据。,TPA(Tissue Polypeptide Antigen)组织多肽抗原;角蛋白8、18、19片段。（
11、0-1g/L） 特点： 反映增生状态标志物，特异性相对低； 膀胱癌(唯一)治疗监测标志物； 乳腺癌、支气管癌、结直肠癌、宫颈癌、卵巢癌、TPA升高； 免疫组化：胆管癌阳性，肝细胞癌阴性。,组织特异性抗原TPS(Tissue polypeptide Special Antigens) (0-80g/ml) 细胞角蛋白18片段 M3抗原决定簇,特征： 肿瘤活性依赖型标志物，TPS升高与肿瘤分裂增殖转化活性有关；反映肿瘤细胞分裂和增殖活性的特异性指标。 分裂增殖活跃，虽瘤负荷小，但TPS可达到很高水平；瘤体大，瘤负荷亦大，分裂增殖相对减少，TPS相对低值 与肿瘤容量标志物CA153、CA125、CA
12、199、CEA和PSA联用，既反映增殖活性，亦反映瘤负荷。 乳腺癌、卵巢癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、胃肠道肿瘤。,Cyfra21-1 (0-6ng/ml) 细胞角蛋白19片段,特点： 鳞癌敏感性：76.5%；腺癌47.8%；SCLC42.1%。 肺鳞癌分期 ：I期60%；II期88.8%；III期80%；IV期100%。 Cyfra21-1+CA199：肺癌敏感性76%；特异性96%。 恶性胸水：敏感性78%；特异性80%。 间皮瘤： Cyfra21-1升高；CEA下降。,CEA 癌胎抗原 0-5ng/ml 分子量 180KDa糖蛋白,正常 胚胎发展期产生，出生后抑制 特征： 消化道肿瘤、乳癌
13、、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、原发灶和转移的肿瘤标志物； 恶性脑膜瘤 CSF 增高（100%）。,AFP 甲胎蛋白 25g/nl胚胎甲球蛋白 糖蛋白 特征： 肝细胞癌肿瘤标志物可达1000000g/ml； 生殖细胞肿瘤肿瘤标志物； 卵巢肿瘤和畸胎瘤、胃、胰、大肠、肺癌、肾肿瘤； AFP+HCG有助于生殖细胞肿瘤分类和分期；a.精原细胞瘤、无性细胞瘤、分化型畸胎瘤，HCG阳性，AFP阴性；b.卵黄囊肿瘤 AFP阳性；c.胆管源肿瘤 AFP阴性；d.胚胎性肿瘤 AFP与HCG均升高,PSA (0-4g/ml) ;f-PSA(0-1g/ml)前列腺癌筛选率的临床概率（%）,PSA F-PSA T-PSA
14、 F/T,两组患者血清FPSA、F/TPSA比值在诊断灰区的水平比较（ X SD),两组血清TPSA(ug/l)及F/T比值（%）分布比较X2-test P0.005,neu基因定位于17号染色体的17q11-q12，编码产物为p185neu，属受体型酪氨酸蛋白激酶。该蛋白质本质是截断的表皮生长因子受体(EGFR)，有富含半胱氨酸的胞外区，跨膜区及具有激酶活性细胞内区。,Neu(Her-2/c-erbB2)及P185neu,c-erbB2阳性的乳腺癌，对内分泌治疗的反应较差。肿瘤体积，淋巴结转移，临床分期，组织学分级和核分裂相计数与c-erbB2的表达呈正相关，与ER、PR状况与c-erbB2
15、的表达呈负相关，表明肿瘤生长分化和转移与c-erbB2表达密切相关。c-erbB2对化疗选择具有指导意义。,BRCA1为肿瘤抑制基因。编码1863 个氨基酸，完整人乳腺癌基因的BRCA1 cDNA长7.8kb，定位于17q12-21。此基因参与调节细胞生长和分化，如果发生突变、丢失或受损，细胞生长将失去控制而发生遗传性乳腺癌和卵巢癌,BRCA1和BRCA2基因,雌激素受体(ER)和孕激素受体( PR) 雌激素受体是一种糖蛋白，分子量约3500090000。雌激素受体存在于雌激素的靶器官，如乳腺、子宫、阴道、脑垂体等。雌激素受体在肿瘤细胞内分布并不均匀一致， （1）不一定是所有的细胞均含有受体；
16、 （2）并非所有能合成受体的细胞其合成能力均相同； （3）肿瘤组织内受体无绝对阴性或绝对阳性，只是富于 受体或贫乏受体； （4）除ER、PR外仍有雄激素受体（AR），糖皮质酮受体 羟孕酮或酚等的有效率仅20以下。,估计乳腺癌预后 预测或监测化疗和内分泌治疗敏感性,临床意义：,C-12多种肿瘤标志物蛋白芯片 检测系统临床应用介绍,生物芯片分为两大类： 基因芯片和蛋白芯片 微电子、微机械、计算机等 检测分析过程连续化、集成化、微型化,蛋白芯片 抗原抗体反应(放免法、萤光法、酶联法) 微点阵技术，(抗体)结合在固相基质 双抗体夹心法(放大信号),几种标志物检测方法比较,特点： 微点阵技术使多种肿瘤标志物同时检测； 灵敏度和特异性互补，减少局限性； 肿瘤个体化生物信息升高；,适 用 范 围,无任何症状人群的普查； 高危人群的检查； 高肿瘤家族史 体表出现逐渐增大的肿块 原因不明的疼痛及体重减轻 疣或黑痣发生明显变化 持续性消化不良、便血、血尿 持续性嘶哑、干咳及吞咽困难 月经期异常大出血、月经期外或绝经后出血,肿瘤病人(首次)治疗前检查 复发、转移监测(追踪),谢谢大家,
