1、,动物细胞融合与 单克隆抗体,选修3:专题2 细胞工程,第二节 动物细胞工程,阅读课本并思考下列问题:,1、什么叫动物细胞融合?植物体细胞杂交技术与动物细胞融合有什么不同呢? 2、动、植物细胞在结构上有何区别?这与它们杂交或融合过程有什么影响? 3、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同?两者的融合过程是否也一样?,一、动物细胞融合,细胞融合是正常的生命活动,受精作用,动物细胞融合,过程,灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,不灭活的话会感染细胞,而不能诱导细胞融合。,物理法,化学法,生物法:,灭活的病毒,仙台病毒,丧失感染性,(不感染细胞)
2、,保留融合活性,(诱导细胞融合),诱导方法,仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒,细胞融合技术应用于细胞学、遗传学、免疫学及制备单克隆抗体。,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,B淋巴细胞与抗体的关系:,1 B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗体。动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。,所以传统的抗体的生产方法及缺陷是什么?怎样解决这个问题?,二、单克隆抗体,抗原,刺激,效应B,抗体,抗原不纯,抗体不纯,特异性差、纯度低;产量低、反应不够灵敏,动物体内,单克隆抗体,由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细
3、胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点:特异性强、灵敏度高,如何大量生产单克隆抗体?,利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞,如何筛选?,单克隆抗体制备过程,细胞融合、筛选,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,单克隆抗体的应用,与常规抗体相比,单克隆抗体产量高,特异性强,灵敏度高,优越性十分明显。,应用主要有:,1、临床诊断,2、作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹” 治疗肿瘤,小结,两个过程,动物细胞培养过程,单
4、克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法灭活病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势,1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( ) A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的淋巴细胞,A,巩固练习,、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是( )A结果是相同的B杂种细胞的形成过程基本相同C操作过程中酶的作用相同D诱导融合的手段相同,3、单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是-( ) A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞
5、融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成,D,4、单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞, 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( )淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞A B C D,C,下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌的实验方案,3、图中B为_过程,常用_作为诱导剂,该细胞继承_的遗传特性,既能_,又能_。,1、该实验方案的目的是_,2、A是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生_,4、C过程指细胞培养,该过程包括_培养和_培养两个阶段,其中_代以内的的细胞属于细胞株。,制备单克隆抗体,B细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌抗体,无限增殖,原代,传代,50,Good bye !,Good bye !,