1、2018/10/5,pharmaceutical analysis-仁济药学,1,第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析,2018/10/5,pharmaceutical analysis,2,2018/10/5,pharmaceutical analysis,3,理想的局麻药具备条件： 麻醉作用强，吸收快，作用时间长 无明显毒性，安全范围大 选择性作用于神经组织，穿透神经组织能力强 性质稳定 作用可复性,局部麻醉药,2018/10/5,pharmaceutical analysis,4,优卡因,优卡因,一、局部麻醉药的发展普鲁卡因的发现,可卡因 （1890）,爱康宁,托哌可卡因,20
2、18/10/5,pharmaceutical analysis,5,苯佐卡因,阿索方,新阿索方,普鲁卡因-1904,2018/10/5,pharmaceutical analysis,6,二、局部麻醉药的结构类型 对氨基苯甲酸酯类 普鲁卡因苯环上有其它基团取代，空间位阻增大而使酯基水解慢，局麻作用增强。, 苯环氨基引入烷基，局麻作用增强；苯环氨基以烷氧基取代，保持局麻作用。,丁卡因,乙氧卡因,氯普鲁卡因,羟普鲁卡因,2018/10/5,pharmaceutical analysis,7, 侧链碳链改变，可使麻醉作用延长，稳定性增加。, 羧酸酯中的氧被硫置换，脂溶性增大，起效快。,徒托卡因,二甲
3、卡因,硫卡因,2018/10/5,pharmaceutical analysis,8,2. 酰胺类,甲哌卡因（卡波卡因）,罗哌卡因,丙胺卡因,三甲卡因,布比卡因,利多卡因,Isogramine 生物碱,2018/10/5,pharmaceutical analysis,9,对氨基苯甲酸酯类药物,苯佐卡因（benzocaine）,2018/10/5,pharmaceutical analysis,10,盐酸普鲁卡因,芳伯氨基,酯键,易水解,脂烃胺,Cl反应,2018/10/5,pharmaceutical analysis,11,盐酸丁卡因,芳仲氨基,脂烃胺,Cl反应,酯键,2018/10/5,
4、pharmaceutical analysis,12,对乙酰氨基酚,酰胺键，易水解 杂质对氨基酚,潜在芳伯氨基,酚羟基,酰胺类药物,2018/10/5,pharmaceutical analysis,13,盐酸利多卡因,脂烃胺,Cl反应,酰胺键 潜在芳伯氨基,2018/10/5,pharmaceutical analysis,14,结构特点与理化性质：,具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色 酯键或酰胺键易水解,2018/10/5,pharmaceutical analysis,15,具脂烃胺侧链，弱碱性可与生物碱沉淀试剂发
5、生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量 重金属离子（如酚羟基）的反应 UV、IR,2018/10/5,pharmaceutical analysis,16,第二节 鉴别试验（Identification）,重氮化偶合反应 与重金属离子反应 水解产物的反应 制备衍生物测熔点 UV、IR,2018/10/5,pharmaceutical analysis,17,（一）重氮化偶合反应 （diazotization-coupling method）,具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基,HCl,2018/10/5,pharmaceutical analysis,18,HCl,重氮盐,偶氮化合物,2018/10
6、/5,pharmaceutical analysis,19,直接：盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺、对氨基水杨酸钠,间接：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜、利多卡因、布比卡因,2018/10/5,pharmaceutical analysis,20,盐酸普鲁卡因 ChP（2000） 鉴别 （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。,2018/10/5,pharmaceutical analysis,21,对乙酰氨基酚 ChP（2000）
7、鉴别 （2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。,2018/10/5,pharmaceutical analysis,22,水解后重氮化-偶合反应,对氨基酚,2018/10/5,pharmaceutical analysis,23,（三）与重金属离子反应,与铜离子反应,芳酰胺,2018/10/5,pharmaceutical analysis,24,盐酸利多卡因，在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色的Co盐沉淀 盐酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化，再加硝酸汞试液煮沸，显
8、黄色；对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色，可与之区别,2018/10/5,pharmaceutical analysis,25,二乙氨基乙醇,红石蕊试纸变蓝,（四）水解产物的反应,2018/10/5,pharmaceutical analysis,26,盐酸普鲁卡因 ChP（2000）,鉴别 （2）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。,2018/10/5,pharmaceutical analysis,27,苯佐卡因 ChP（20
9、00）,鉴别 （2）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。,2018/10/5,pharmaceutical analysis,28,（五）制备衍生物测熔点,三硝基苯酚衍生物,盐酸利多卡因 ChP（2000）三硝基苯酚利多卡因黄色沉淀，熔点为228232，熔融时同时分解。 盐酸布比卡因 ChP（2000）衍生物熔点为194,2018/10/5,pharmaceutical analysis,29,硫氰酸盐衍生物,盐酸丁卡因 ChP（2000）其衍生物熔点约为131,2018/10/5,pharmaceutical anal
10、ysis,30,（六）UV,对于R COX型化合物的吸收光谱 当X=-OH或-OR时 max基本值为230nm，p-NH2+58nm, p-NHCH3+73nm,具有芳环 取代有发色团-C=O，助色团-OH、-NHR,2018/10/5,pharmaceutical analysis,31,（七）IR,普鲁卡因 普鲁卡因胺 COO(CH2)2NEt2 CONH(CH2)2NEt2 C=0 1692 1640 酯 C-0 1271、1170 、1115 酰胺II吸收带N-H 1645（胺基） 1540 酰胺III吸收带 C-N 1280 二乙胺盐 N+-H 2585 2645 伯胺、酰胺NH2
11、3315、3200 31003500,2018/10/5,pharmaceutical analysis,32,典型化学键的红外特征吸收峰,峰位（cm-1） 归属基团或化学键,3750-3000 羟基 氨 （胺）基,3300-3000 苯环 烯 炔,1900-1650 羰基,1670-1500 苯环,1300-1000 酯 羧酸,1000-650 苯环,2018/10/5,pharmaceutical analysis,33,第三节 杂质检查（ Detection Impurities ）,盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,2018/10/5,pharmaceutical analysi
12、s,34,五、含量测定 （ Assay ）,亚硝酸钠滴定法 非水溶液滴定法 紫外分光光度法 比色法 荧光法 HPLC,2018/10/5,pharmaceutical analysis,35,1.原理 具芳伯氨基的药物（具游离芳伯氨基的药物和具潜在芳伯氨基的药物）,在酸性溶液中与亚硝酸钠定量反应，生成重氮盐，用永停法或外指示剂法指示反应终点,（一）亚硝酸钠滴定法,1 : 2,2018/10/5,pharmaceutical analysis,36,具潜在芳伯氨基的药物水解或还原,2018/10/5,pharmaceutical analysis,37,（1）加入适量KBr加速反应,在盐酸存在下
13、，重氮化反应的机理为：,2. 主要测定条件,2018/10/5,pharmaceutical analysis,38,2018/10/5,pharmaceutical analysis,39,（1）K1,（2）K2, K1 300 K2加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度,2018/10/5,pharmaceutical analysis,40,（2）酸的种类及其浓度,在不同酸中重氮化反应的速度为： HBrHCl H2SO4 HNO3,综合考虑，采用盐酸（过量）,2018/10/5,pharmaceutical analysis,41, 重氮化反应速度加快； 重氮
14、盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果,加入过量盐酸：,2018/10/5,pharmaceutical analysis,42,盐酸量也不能过多 芳伯胺/盐酸 1:2.5-6 (摩尔比),偶氮氨基化合物,2018/10/5,pharmaceutical analysis,43,（3）室温条件下滴定,高温下，重氮反应快 1030 温度过高，重氮盐分解,2018/10/5,pharmaceutical analysis,44,滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定，将管尖提出液面再缓缓滴定至终点,（4）滴定速度：先快后慢,快速滴定法,20
15、18/10/5,pharmaceutical analysis,45,（1）永停滴定法ChP（2000）、BP（1998）,3. 指示终点的方法,2018/10/5,pharmaceutical analysis,46,永停滴定法（附录A）用作重氮化法的终点指示时，调节R1使加于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（12）15ml，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端
16、提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。,2018/10/5,pharmaceutical analysis,47,KI淀粉糊剂或试纸 2NaNO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O,原理：滴定到达终点后，稍过量的NaNO2在酸性溶液中氧化KI，析出的I2，遇淀粉即显蓝色,（2）外指示剂法,2018/10/5,pharmaceutical analysis,48,脂烃胺侧链、芳氨基，具弱碱性,直接在水溶液中滴定有困难，但在非水溶剂中滴定 滴定终点突跃明显,（二）非水溶液滴定法,原理,适用对象： 盐酸利
17、多卡因盐酸丁卡因肾上腺素类,2018/10/5,pharmaceutical analysis,49,滴定液 高氯酸滴定液 溶剂 冰醋酸冰醋酸 + 醋酐醋酐 指示剂 结晶紫指示液,条件,消除HX干扰,加入Ac2O 增加碱性，终点突跃明显, 否则改用电位法指示终点,2018/10/5,pharmaceutical analysis,50,对乙酰氨基酚在稀碱溶液中，于257nm处有最大吸收，在CH3OH-H2O混合溶剂中max 244nm其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。,USP多采用标准对照法 而ChP则采用吸收系数法 715 max257,（三）紫外分光光度法,2018/10
18、/5,pharmaceutical analysis,51,对乙酰氨基酚 USP（24） 对照法,标准品 溶剂溶解 稀释 供试品 溶剂溶解 以溶剂为空白在max处测A，计算即得,Ax/ARCR,2018/10/5,pharmaceutical analysis,52,盐酸普鲁卡因注射液 ChP（2000）,可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸离子抑制色谱法 内标法定量,（四）HPLC法,2018/10/5,pharmaceutical analysis,53,*方法与含量计算 : 对照品溶液(浓度C对) + 内标 进样(图1)供试品溶液(浓度C样) + 内标 进样(图2),f =,A对,A内,A样,A内,f =,2018/10/5,pharmaceutical analysis,54,HPLC法测定盐酸利多卡因含量（USP） 色谱条件色谱柱：C18 、3003.9mm流动相：少量冰HAc-乙腈-H2O pH为3.4流速：1.5ml/min，检测波长254nm，柱温：2025 系统适应性试验（？） RSD3.0 分析时间 tR46min,2018/10/5,pharmaceutical analysis,55,血浆样品 清液 乙醚液HPLC分析,样品前处理,血浆中对乙酰氨基酚的HPLC检测分析,测定标准曲线、回收率、精密度,
