1、高效液相色谱法测定盐酸左氧氟沙星胶囊中左氧氟沙星含量2009 年第 18 卷第 2O 期药物鉴定高效液相色谱法测定盐酸左氧氟沙星胶囊中左氧氟沙星含量丁燕,安瑜(宁夏回族自治区固原市药品检验所,宁夏固原 756000)摘要:目的建立测定盐酸左氧氟沙星胶囊中左氧氟沙星含量的高效液相色谱(HPLC)法.方法色谱柱为 PhenomenexLunaCs 柱(250mm4.6mm,5“m),流动相为 0.05mol/L 枸橼酸溶液一 lmol/L 醋酸铵溶液一乙腈(77:l:14),流速为 1.0mL/min,检测波长为 293nm,进样量 10L,柱温为 30.结果左氧氟沙星检测质量浓度的线性范围为10
2、.44104.4tzg/mL(r=0.9999),平均回收率为 99.50%,RSD=0.45%(n=6).结论该方法快速,准确,重现性好,可用于该制剂的含量测定.关键词:左氧氟沙星;含量测定;高效液相色谱法.中图分类号:R927.2:R978.69 文献标识码:A 文章编号:10064931(2009)20003702DeterminationofLevofloxacinHydr0chIorideinLevofloxacinHydrochlOrideCapsulesbyHPLCDingYah,AnYufGuyuanImthuforDrugControl,Guyuan,Ningxia,Chin
3、a756000)Abstract:0bjectiveToestablishamethodforthedeterminationoflevofloxaeinhydrochlorideinLevofloxacineHydrochlorideCapsulesbyHPLC.MethodsPhenomenexLunaC18column(250mmx4.6mm,5m)wasused,themobilephaseconsistedof0.05mol/Lcitricacid 一 1mol/Lammoniumacetateacetonitrile(77:1:14).Theflowratewas1.0mL/min
4、withthetemperatureof30,thedetect ingwavelengthwasat293nm.thesamplevolumewasl0txL.ResultsTherewasthegoodlinearrelationshipbetweentheconcentrationoflevofloxaeinhydrochlorideandpeakareawithintherangeof10.44104.4tzg/mL(,=0.9999).Theaveragerecoveryratewas99.50%,RSD=0.45%(n:6).ConclusionThemethodisrapid,a
5、ccurateandreproducible.Keywords:levofloxacin;contentdetermination;HPLC左氧氟沙星系氧氟沙星的光学 S(一)异构体,作用于细菌DNA 旋转酶,具有抗菌谱广,抗菌作用强的特点,被临床广泛应用于各种感染性疾病的治疗.其胶囊剂的含量测定方法为紫外分光光度(uv)法 .为提高方法选择性,笔者参考文献(24】采用高效液相色谱(HPLC)法测定盐酸左氧氟沙星胶囊中左氧氟沙星的含量,报道如下.1 仪器与试药1100 型高效液相色谱仪,包括 G1311A 四元泵,G1379A 脱气机,G1313 自动进样器等(美国 Aglient 公司).
6、左氧氟沙星对照品(中国药品生物制品检定所,批号为 130455200604);盐酸左氧氟沙星胶囊(济南利民制药有限责任公司,批号为 0703215,0710201,0712207);乙腈为色谱纯,枸橼酸,醋酸铵为分析纯,水为超纯水 .25h 内稳定.重复性试验:取同一批号的样品 5 份,按 2.2 项下方法制成供试品溶液,分别进样测定.结果峰面积的 RSD=1.65%(n=5).加样回收试验:分别取 1.0mL 己知含量(苦杏仁苷含量为1.3456mg/g)的同一批样品,共 6 份,分别准确加入对照品贮备液适量,按 2.1 项下色谱条件进样测定,计算回收率.结果见表 1.表 1 苦杏仁苷加样回
7、收试验结果(n=6)24 样品含量测定取 3 批样品,依法制备供试品溶液,进样测定含量.结果 3 批样品中苦杏仁苷含量分别为 1.3456,1.3055,1.4214mg/mL(n=3),平均 1.3575mg/mL.中国药业 ChinaPharmaceuticals2 方法与结果2.1 色谱条件及系统适用性试验色谱柱:PbenomenexLunaCl8 柱(250mm4.6mm,5txm); 流动相:0.05mol/L 枸橼酸溶液一 1mol/L 醋酸铵溶液一乙腈(77:1:14);流速:1.0mL/min;柱温:30;检测波长:293nm;进样量 :10.在此色谱条件下,左氧氟沙星峰的理论
8、塔板数大于 2500,分离度符合要求.高效液相色谱图见图 1.2.2 溶液制备精密称取样品适量(约相当于左氧氟沙星 25mg),置 50mL量瓶中,加 0.1mol/LHCL 溶液稀释至刻度,摇匀,精取 1mL,置10mL 量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀滤过,即得供试品溶液.取左氧氟沙星对照品约 25mg,精密称定,置 50mL 量瓶中,加3 讨论苦杏仁苷在苦杏仁酶的作用下会水解破坏,故原药材苦杏仁中苦杏仁苷的含量与苦杏仁酶密切相关 l3J,传统方法是以加热除去苦杏仁酶来保证苦杏仁的质量.不同炮制方法制得的苦杏仁所生产的麻杏定喘合剂中,苦杏仁苷的含量差异较大 l4l.因此,曾用水甲醇作为流动
9、相,但苦杏仁苷的峰拖尾;增大甲醇比例并加入适量乙腈后 ,色谱图得到了明显改善,且与其他峰的分离良好.以苦杏仁苷作为定量控制指标,采用 HPLC 法测定 ,方法简便可靠,专属性强,重现性好,能够较全面地反映该制剂的内在质量,可进一步提高质量标准.参考文献:【1张宏安 ,朱素芳,上东友.中药苦杏仁的炮制研究【J.现代中药,2004,(2):68.2】杨玲玲 ,常军民,姚军.HPLC 测定天山花楸中的苦杏仁苷 J】.华西药学杂志,2007,22(5):589 590.3】税丕先 ,孙琴,庄元春,等.HPLC 测定止嗽定喘片中苦杏仁苷的含量J. 中成药 ,2007,29(12):1870.41 肖培根
10、 .新编中药志M】.北京:化学工业出版社,2002:607.(收稿日期:20090619)?37?药物鉴定?t/rain-=-一一,一 tt/rain012200l220ABCA.对照品溶液 B.供试品溶液 C.阴性对照品溶液图 1 高效液相色谱图0.1mol/LHCL 溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取 1mL,置10mL 量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液.2.3 方法学考察空白干扰试验:按处方制备不含盐酸左氧氟沙星的阴性样品 ,按供试品溶液制备方法制得阴性对照品溶液.精密吸取供试品溶液,对照品溶液,阴性对照品溶液各 10L,依法进样.结果表明制剂中其他成分对测定无干扰(见
11、图 1).线性关系考察:取左氧氟沙星对照品约 52.2mg,精密称定,置100mL 量瓶中,加 0.1mol/LHCL 溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,配成贮备液,再分别精密量取 1,2,4,6,8,10mL,置 50mL 量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀.精密量取该溶液 1O 注入液相色谱仪并按选定的色谱条件测定,以质量浓度(C)为横坐标,峰面积(A)为纵坐标进行线性回归.回归方程为 4:52.296C+21.899,r=0.9999(n=6).结果表明左氧氟沙星的质量浓度在 lO.44104.4g/mL 范围内与峰面积呈良好的线性关系.精密度试验:取对照品溶液,按上述色谱条件进样 10,连续进
12、样 5 次,依法测定.结果峰面积的 RSD 为 0.45%(n=5),表明仪器精密度良好.重现性试验:取同一批号(批号为 0703215)样品,依法测定.结果左氧氟沙星的平均含量为 97.2%,RSD 为 0.52%(/7,=5),表明方法重现性良好.稳定性试验:取同一供试品溶液,于 0,1,3,5,7,10h 时, 分别进样测定.结果峰面积的 RSD 为 0.62%(n=6),表明供试品溶液在 10h 内稳定.加样回收试验:精密吸取对照品溶液1.0,2.0,3.0mL 各2 份,分别置 6 个 100mL 的量瓶中,按处方比例加入其他组分,加2009 年第 l8 卷第 20 期流动相溶解并稀
13、释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液依法测定,计算回收率.结果见表 1.表 1 左氧氟沙星加样回收试验结果24 样品含量测定精密称取样品(约相当于左氧氟沙星 25mg),依法制备供试品溶液.分别取对照品溶液及供表 2 样品含量测定结果(n:3)试品溶液各 10L 进样,按外标法计算含量,同时与uV 法测定结果比较.结果见表 2.3 讨论批号含量(标示量的%)HPLC 法 UV 法以枸橼酸和乙腈为流动相时,会出现拖尾现象,在流动相中加人 1mol/L 醋酸铵溶液一定比例,对左氧氟沙星的峰形有显着改变】,且峰形较好.HPLC 法及 uv 法测定的含量基本一致,但 uv 法误差较大.HPLC 法测定结果灵
14、敏度高,回收率好,方法可靠,可用于该产品的质量控制.参考文献:1WS 一(X 一 042)一 2002Z,国家药品标准【s.2贾淑杰,张蓉 ,刘美欣,等.RPHPLC 法测定复方氧氟沙星滴眼液中氧氟沙星的含量【J】.中国药房,2002,13(2):109.3胡正波,李航 .HPLC 法测定盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液的含量 J.中国药师,2008,11(1):108.4】王儒强 .HPLC 法测定盐酸左氧氟沙星血浓度J】.中国药师,2006,9(9):833.(收稿日期:20090507)复方磺胺甲口恶唑致包皮阴囊水肿 2 例何江,林建群(浙江省台州医院泌尿外科,浙江台州 317000)中图分类
15、号:R969.3;R978.2 文献标识码:D 文章编号:10064931(2009)20003801患者一,男,35 岁,因受凉出现咳嗽,咽痛 3d,自服复方磺胺甲嗯唑片 2 片及三九感冒冲剂 1 包.次 13 晨起床后,自觉阴茎及阴囊红肿疼痛,并伴皮肤瘙痒,尿道烧灼感,来院就诊.体格检查示体温37,呼吸 18 次/min,脉搏 80 次/rain,血压 110/75nlnlHg;包皮及阴囊高度水肿,龟头微红,未见分泌物溢出;其他部位未见异常体征.疑是服用复方磺胺甲嗯唑所致药物过敏反应,故立即停用并予扑尔敏,地塞米松抗过敏处理.次日,上述症状减轻,继续治疗 3d后症状消失.患者二,男,6O
16、岁,因良性前列腺增症(BPH)伴尿路感染,服用特拉唑嗪每晚 2mg,保列治每天 5mg,复方磺胺甲嗯唑片每次 2 片,每天 2 次.次日晨起床后,自觉包皮及阴囊水肿胀痛,伴皮肤瘙痒,来院就诊.体格检查示体温 37.3qC,呼吸 l8 次/rain,脉搏 80 次/rain,?38?血压 115/75filmHg;双肺呼吸音粗;包皮及阴囊高度水肿 ,龟头稍红肿,未见分泌物溢出.疑是服用复方磺胺甲嗯唑片所致药物过敏反应,故立即停用,更换抗生素,并予扑尔敏,地塞米松抗过敏处理.次日,包皮及阴囊水肿稍减轻,继续治疗 4d 后,症状完全消失.讨论:复方磺胺甲嗯唑片的主要不良反应为产生结晶尿 ,血尿等泌尿系损害,药热,皮疹等过敏反应也较常见,但致包皮及阴囊水肿的报道罕见.2 例患者均在服药后次日晨出现相同症状,经停药和抗过敏,激素治疗有效,且无导致阴茎水肿的其他因素,可以认定是该药所致过敏反应.2 例个案提示,包皮及阴囊水肿患者就诊时,应考虑到复方磺胺甲嗯唑可致包皮及阴囊水肿,要详细追问其用药史.(收稿 Et 期:20090219)中国药业 ChinaPharmaceuticals
