1、药物分析学,2014.10.26,2014.10.26,更多医学精品 尽在医学吧,http:/ 学科的性质和任务第二节 药物分析与质量标准第三节 药物分析学的主要内容第四节 最新进展,2014.10.26,1、明确药物分析学在药学领域中的重要地位； 2、熟悉药品质量检验与标准，初步建立药品质量管理概念； 3、了解原料药与各类制剂的常规检验项目与一般分析方法； 4、初步了解新药药品质量标准研究一般方法与技术要求； 5、初步了解药物分析的最新进展。,2014.10.26,学科的性质与地位 与相关学科的关系 药物分析工作的基本任务,第一节 药物分析学的性质和任务,2014.10.26,药品，指用于预
2、防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应证、用法和用量的物质，包括药材、中药饮片、中成药、化学原料及其制剂，抗生素、生化药品、放射性药品、血清制品和诊断药品等。,2014.10.26,凡从事药品生产、经营、使用的 单位均应配备相应的执业药师，并以 此作为开办药品生产、经营、使用单 位的必备条件之一。,2014.10.26,研究药物质量控制方法与技术 “方法”学科。运用化学、物理化学或生物学的方法和技术研究化学结构已经明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量控制方法，也研究有代表性的中药制剂和生化制剂的质量控制方法。,药物分析学,2014.10.26,用药的安全、合理、有效；在
3、药品的研制、生产、供应以及临床使用过程中对药品进行严格的分析检验；从各个环节全面保证、控制与研究提高药品的质量，实现药品的全面质量控制。,药品质量的重要性,2014.10.26,地位,2014.10.26,数学与 计算机,药物分析学,有机化学 无机化学,药理学,分析化学,药剂学,生理学,药物化学,生物工程,提供数学方法,结构与性质,提供分析方法,体内药物分析,工艺考察,生物利用度,体内外相关,质量控制,作用机理,体内药物分析,提供体内环境,药动与药代,合成工艺,2014.10.26,数 数 物 无 有 分 物 生 微 药 生 药 药学 理 理 机 机 析 理 物 生 物 理 理 剂统 学 化
4、化 化 化 化 物 化 学 学 学计 学 学 学 学 学 学 学,涉及的相关学科,2014.10.26,重量分析法 酸碱滴定配位滴定容量分析法沉淀滴定分 氧化还原滴定 纸色谱析 电化学分析 平面色谱化 经典色谱 薄层色谱学 色谱分析 柱色谱现代色谱 GC*HPLC(包括毛细管电泳)UV-Vis光谱分析 IR或波谱分析 NMRMS,2014.10.26,1.药品的常规检验以“药品质量全面监控”为中心,开展药品质量检验（鉴别、检查和含量测定） 成品药检验（西药、天然药、中药、生化药物等原料、制剂） 生产过程中质量控制（中间体）优化工艺 贮藏过程中的质量控制（稳定性考察）,2014.10.26,2.
5、为新药研究开发提供科学的质量控制方法 新药开发及新剂型药物质量及稳定性研究 天然产物活性成分的化学结构确证 现代生物技术所研制的生化药物和基因工程药物质量标准研究.,2014.10.26,3.临床药物分析研究药物进入体内后的动态变化开展临床研究,研究药物进入体内的吸收、分布、代谢、排泄等过程,研究药物作用机制,将为临床合理用药提供科学指导,以提高药物疗效,降低其毒副作用.,2014.10.26,4.分析新技术的研究应用追踪国际分析新技术的发展前沿,改进或自主开发质量控制平台和分析技术,建立准确、灵敏、专属、快速、自动化、最优化和智能化的分析方法,以使我国药品质量研究与世界同步.进而达到药品标准
6、的国际化.,2014.10.26,我国药品质量标准体系 中国药典与主要国外药典 全面控制药品质量的科学管理,第二节 药物分析与药品质量标准,2014.10.26,药品质量标准是国家对药品质量、规格及检验方法所作的技术规定，是药品生产、供应、使用、检验和药政管理部门共同遵循的法定依据。 组织生产提高质量的手段 科学管理和技术监督的组成部分 联系科研、生产、供应、使用和检验的技术纽带,概 述,2014.10.26,我国制定药品质量标准的指导思想：中药标准立足于特色，西药标准立足于赶超。,2014.10.26,标 准 体 系,2014.10.26,Pharmacopoeia：是一个国家记载药品标准、
7、规格的法典。是国家管理药品生产与质量的依据，和其他法令一样具有约束力. 特点: 由国家药典委员会编辑出版，由国家政府颁布执行，具有法律的约束力; 所收载的品种是疗效确切、副作用小、质量稳定的常用药品及其制剂; 需要不断修订。,2014.10.26,在一定程度上反映出国家在药品生产和医药科技方面的水平。药典在制剂的研究和生产上有积极的促进作用，其最终目的是保证临床用药的安全与有效。,2014.10.26,中国药典-沿革1953年 收载品种 531种1963年 1310种1977年 1925种1985年 1489种1990年 1751种1995年 2375种2000年 2691种 2005年 32
8、14种Chinese Pharmacopeia，缩写为ChP（2000）。,2014.10.26,中国药典（2000年版）分为一、二两部。另专门出版了：药品红外光谱集中国药典英文版临床用药需知各年的增补本药典注释（一部、二部）药品检验操作规程中华人民共和国医药行业标准,2014.10.26,中国药典-基本结构和内容：一般分为凡例、正文、附录和索引四部分。 1.凡例（General Notices）把一些与标准有关的、共性的、需要明确的问题，以及采用的计量单位、符号与专门术语等，用条文加以规定，以避免在全书中重复说明。 凡例是标准的一部分，同样具有法律约束力。 2. 正文（Monographs）
9、是药典的主要内容，为所收载药品或制剂的质量标准。 正文主要包括：名称、性状-,2014.10.26,3. 附录（Appendix）附录部分记载了制剂通则、生物制品通则；一般杂质检查方法、一般鉴别试验、有关物理常数测定法、试剂配制法以及色谱法、光谱法；指导原则。 4.索引（Index）中文索引（汉语拼音索引）和英文名称索引。 附录不是标准的正式内容-,2014.10.26,2014.10.26,2014.10.26,2014.10.26,2014.10.26,2014.10.26,2014.10.26,进出口药品检验或仿制国外药品标准时，可供参考的国外药典有： 1美国药典与美国国家处方集美国药典
10、The United States Pharmacopoeia，目前为24版，即USP（24）美国国家处方集The National Formulary，目前为19 版，即NF（19）二者合并为一册，缩写为 USP(24)-NF(19)，通常简写为USP（24）， 37777种,2014.10.26,2英国药典 British Pharmacopoeia，缩写BP，目前为2000 年版，即BP（2000）收载 2663种. 3日本药局方 缩写JP，目前为14 版，即JP（14）,2014.10.26,4欧洲药典 European Pharmacopoeia，缩写Ph.Eup，目前为第三版，20
11、00年增补本。 欧洲药典对其成员国，与本国药典具有同样约束力，并且互为补充。 5 .国际药典 The International Pharmacopoeia ，缩写Ph.Int，目前为第三版，由世界卫生组织（WHO）组织编撰并颁布。,2014.10.26,药品非临床研究质量管理规范 GLPGood Laboratory Practice 药品生产质量管理规范 GMPGood Manufacture Practice 药品经营质量管理规范 GSPGood Supply Practice 药品临床试验管理规范 GCPGood Clinical Practice,2014.10.26,GLP 药品非
12、临床研究质量管理规范(1999.11.1)科研单位研制安全有效药物必须按照GLP规定开展工作.严格控制药物研制的质量,确保实验数据的准确可靠；,GMP 药品生产质量管理规范(1999.8.1)生产企业生产出全面符合药品标准的药物,必须按GMP规定组织生产、严格把关.,2014.10.26,GSP 药品经营质量管理规范(2000.7.1)药品供应部门为了保证药品运输、贮存、销售过程中药品的质量和效力，必须按照GSP进行.,GCP 药品临床试验管理规范（1999.9.1)在新药研究中保护受试者和病人的安全和权利；新药临床研究人员保证药品临床试验资料的科学性、可靠性、重视性.,2014.10.26,
13、第三节 药物分析学的主要内容,药品检验工作的基本内容 生物药物的分析 药品质量标准的制定,2014.10.26,药品检验工作的根本目的就是保证人民用药安全、有效.,一般原则,药物分析工作者应具备：高度的责任感、严谨的科学作风、求实和一丝不苟的工作态度、熟练、正确的操作技能,2014.10.26,5. 检验报告,工 作 程 序,2014.10.26,取样科学性、真实性、代表性,1 取 样,根据药物性质、不同剂型,采用不同的取样方法及不同的取样量.,取样程序先进行外观检查包括：品名、 剂型、批号、保质期及包装情况等.,2014.10.26,1 取 样,当n 3时，每件取样；当n 300 时,按 +
14、 1当n 300时,按 /2 + 1,原料取样,制剂分析,片剂、胶囊剂（非均匀制剂）每批至少1020 片 注射剂（均匀制剂）一般35支（测定次）,2014.10.26,2 性 状,性状包括颜色、臭味等应有的外观以及溶解度和物理常数.,是质量重要表征之一,在一定程度上反映药品的纯度及疗效.,2014.10.26,3 鉴 别,依据药物的化学结构和理化性质进行某些化学反应,测定某些物理常数或光谱特征,判断药物及其制剂的真伪.,鉴别方法要求: 专属性强、 再现性好、灵敏度高、简便快速,2014.10.26,一般鉴别试验（general identification test）是依据某一类药物的物理化学
15、性质为依据,通过化学反应来鉴别药物真伪. 无机药物: 根据阴、阳离子（钠盐、钙盐、硫酸盐、氯化物）的特殊反应,并以药典附录项下的一般鉴别试验为依据； 有机药物: 多采用典型的官能团反应（芳香第一胺、水杨酸盐）.,3 鉴 别,2014.10.26,一般鉴别试验通过一般鉴别试验只能证实是某一类药物,而不能证实是哪一种药物. 例如:钠盐的焰色试验,不能辨认是氯化钠、苯钾酸钠或者是其它某一种钠盐药物.必须在一般鉴别试验的基础上,再进行专属鉴别试验,方可确认.,3 鉴 别,2014.10.26,专属鉴别试验(specific identification test）,证实某一种药物的依据它根据每一种药物
16、化学结构的差异及其引起的物理化学性质不同,选用某些灵敏的定性反应,来鉴别药物真伪.,3 鉴 别,2014.10.26,苯巴比妥,司可巴比妥钠,巴比妥,2014.10.26,化学鉴别法,色谱鉴别法,光谱鉴别法,3 鉴 别,2014.10.26,化学鉴别法,干 法 将供试品直接加热或加适当试剂在规定的温度下进行实验,观测此时所发生的特异现象.,类型：(1)呈色反应鉴别法 (2)沉淀生成反应鉴别法 (3)荧光反应鉴别法 (4)气体生成鉴别法,2014.10.26,例1 钠的焰色实验 铂丝用盐酸湿润后,蘸取供试品,在无色火焰中燃烧,使火焰显出特殊的颜色. 例2 适当温度下加热供试品,生成特殊气味的气体
17、.,舒林酸,化学鉴别法,2014.10.26,湿法 将供试品和试剂在适当的溶剂中,于一定条件下进行反应,发生易于观测的化学变化.,化学鉴别法,2014.10.26, 三氯化铁呈色反应,对乙酰氨基酚, 异羟肟酸铁反应,化学鉴别法,2014.10.26, 茚三酮呈色反应, 重氮化-偶合呈色反应,左旋多巴,对乙酰氨基酚,化学鉴别法,2014.10.26, 氧化还原呈色反应,盐酸氯丙嗪,化学鉴别法,2014.10.26, 与金属离子的沉淀反应, 与碘化铋钾的沉淀反应, 其它沉淀反应,化学鉴别法,2014.10.26,(3)气体生成反应鉴别法,大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某些酰胺类药物,可经强碱处
18、理后加热产生氨气., 化学结构含硫药物,可经强酸处理后加热产生硫化氢气体.,硫鸟嘌呤,巴比妥类药物,化学鉴别法,2014.10.26,(3)气体生成反应鉴别法,化学鉴别法,2014.10.26,化学鉴别法,2014.10.26,1 紫外光谱鉴别法, 测定最大吸收波长,或同时测定最小吸收波长.,乙胺嘧啶 供试品在0.1mol/L盐酸介质 中的紫外吸收在272nm处为峰,216nm处 为谷.,光谱鉴别法,2014.10.26, 规定吸收波长和吸收度比值法,两性霉素在362nm、381nm、405nm波长处有最大吸收.规定362nm与381nm处吸收度比值不大于0.6、 381nm与405nm波长比
19、值不大于0.9.,光谱鉴别法,2014.10.26,己稀雌酚注射液用供试品溶液250450nm波长吸收光谱与对照品是否一致鉴别., 与对照品比较,对比吸收光谱的一致性,光谱鉴别法,2014.10.26, 经化学处理后,测定其反应产物的吸收光谱特性., 规定一定浓度供试品在最大吸收波长处的吸收度.,光谱鉴别法,2014.10.26,中国药典采用标准图谱对照法 BP 采用标准图谱对照法、对照品法 USP 采用对照品法 JP 规定条件下测定一定波长处特征吸收峰.,光谱鉴别法,2014.10.26,色谱谱鉴别法,适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别,具有分离、分析同时进行的特点. 高效液相色谱法(H
20、PLC)供试品和对照品色谱峰保留时间一致. 气相色谱法 (GC)同HPLC要求 薄层扫描法(TLC)对照品比较法， 供试品斑点与对照品的Rf值及斑点的颜色应一致.,色谱法（ HPLC GC TLC),2014.10.26, 化学法和仪器法相结合,每种药品一般选用24种方法进行鉴别试验,相互取长补短., 方法要有一定的专属性、灵敏 性、且便于推广., 尽可能采用药典中收载的方法.,鉴别法小结,2014.10.26,（2）在维生素C的分子中具有烯二醇的结构，这个结构具有很强的还原性,可以和一些氧化剂作用.,鉴别法小结,2014.10.26,4 检 查,药物在不影响疗效及人体健康的原则下,可以允许生
21、产过程和贮藏期间引入的微量杂质的存在.检查是判断药品纯度是否符合限量规定的要求.,2014.10.26,药典中规定阿斯匹林中：游离水杨酸不得超过0.1%.,阿斯匹林,如阿斯匹林中游离水杨酸的检查,水杨酸,4 检 查,2014.10.26,5含 量 测 定,含量测定测定药品的含量是评定药品质量,保证药品疗效的重要手段.含量测定方法化学分析法、光谱法、色谱法 原料药含量测定方法 着眼于方法的准确性 制剂的含量测定方法 特别重视方法专属性、准确性可稍差,2014.10.26,化 学 分 析 法,容量分析法 原料药含量测定首选方法,重量分析法,光谱法,紫外分光光度法可见分光光度法,5含 量 测 定,2
22、014.10.26,5含 量 测 定,2014.10.26,5含 量 测 定,2014.10.26,5含 量 测 定,2014.10.26,判断一个药物的质量是否合格要以药品的鉴别、检查、含量测定等各项的检查结果综合评价.,5含 量 测 定,2014.10.26,6记录及检验报告,记录完整、无缺页损脚；内容必须真实、简明、具体；宜用钢笔或特种圆珠笔书写；字迹清晰、色调一致,不得涂抹（写错时,划上单线或双线，再在旁边改正重写,并签名或盖章）,(1)原始记录,2014.10.26,(2) 检验报告内容,a 供试品的名称、批号、规格、数量、来源；取样方法、取样日期；外观性状、包装情况. b 检验目的
23、、项目、方法与依据；检验数据. c 结论及处理意见； d 检验者签名盖章、复核者签名盖章.,6记录及检验报告,2014.10.26,品名 包装规格 批号 厂牌来源 数量 取样日期 取样数量 报告日期 检验依据 检验记录结论 检验人 复核人 负责人,检验报告书,2014.10.26,检验报告书(省略上半页),例,溶液颜色 A440 0.07 A440 =0.02 符合规定,负责人 罗红 复核人 罗红 检验人 张杰,结论本品经检验符合(中国药典2000年版)规定,含量 99.0 99.8% 符合规定,炽灼残渣 0.1% 0.03% 符合规定,检查,鉴别 应生成黑色 生成黑 符合规定,性状 应为白色
24、粉末 白色粉末 符合规定,检验项目 标准规定 检验结果 结论,2014.10.26,上述检验及其结果必须有完整的原始记录，实验数据必须真实，不得涂改。,全部检验完毕后，应写出检验报告，并根据检验结果作出明确的结论。,2014.10.26,例：苯甲酸性状 本品为白色有丝光的鳞片或针状结晶或结晶性粉末；质轻；无臭或微臭；在热空气中微有挥发性；水溶液显酸性反应。本品在乙醇、氯仿或乙醚中易溶，在沸水中溶解，在水中微溶。熔点 本品的熔点（附录 C）为121.0124.5。 鉴别（1）取本品约0.2g，加4%氢氧化钠溶液15ml，振摇，滤过，滤液中加三氯化铁试液2滴，即生成赭色沉淀。 （2）本品的红外光吸
25、收图谱应与对照的图谱(光谱集233图)一致。,2014.10.26,1.全面检验均符合质量标准 如：本品为“维生素C”，符合中国药典（2000年版）的各项规定。 2.全面检验后有个别项目不符合规定 本品为“葡萄糖”,乙醇溶液的澄清度项不符合规定，其他各项检验均符合中国药典（2000年版）的规定。可改作“口服葡萄糖”用，但不得供制备注射剂用。,检验的几种可能结论,2014.10.26,3. 全面检验后不符合标准规定，或虽未全面检验、但主要项目不符合规定，可作“不得供药用”处理。如：本品为“葡萄糖注射液”，其热原检查不符合中国药典（2000年版）的规定，不得供药用。 4.根据送检者要求，仅作个别项
26、目检验者.如：本品（维生素B12注射液）的pH值为5.5，“pH值”项符合中国药典（2000年版）的规定（pH值 应为4.06.0),检验的几种可能结论,2014.10.26,药物制剂：1）可以更好的发挥疗效 2）降低药物毒副作用 3）方便使用、贮存和运输 原料 制剂 加入赋形剂、稀释剂、附加剂（稳定剂、抗氧剂、防腐剂、着色剂等），并经过适当的工艺流程。,2014.10.26,药物制剂赋形剂,2014.10.26,1 制剂分析的复杂性（阿托品 原料 非水碱量法；片剂、注射剂酸性染料比色法） 2 分析项目要求不同（用合格原料投料配制,故原料检验项目在制剂分析中一般不再重复检验，按制剂通则要求检查
27、。考虑杂质） 3 对分析方法的要求不同（盐酸氟奋乃静原料药-非水滴定法 片剂-紫外分光光度法） 4 结果表示与限度要求不同,2014.10.26,2014.10.26,检查（杂质检查、重量差异、崩解时限、溶出度、释放度、含量均匀度等）,片 剂,2014.10.26,注 射 剂,2014.10.26,1.制剂方面：组成极其复杂,有效成分含量较低; 2.分析方法：需采用提取、纯化等预处理，采取较高灵敏度的测定方法； 3.质量检验程序：与一般的化学药物制剂相同。,2014.10.26,2014.10.26,中药的鉴别：通过确认所含药味的存在与否达到鉴别的目的。 意义：是中药制剂质量控制和检验的重要环
28、节。 鉴别原则：遵循处方的原则。首选君药与臣药；贵重药和毒、剧药 。,2014.10.26,1）显微鉴别通过动、植物组织细胞或其内含物质的形态来鉴别真伪的方法；,2）化学鉴别通过中药材中的特定成分与试剂发生化学反应来进行的方法。,3）色谱鉴别效能高、灵敏 ，特别适合中药类物质。,2014.10.26,橙皮苷,薯蓣皂苷元,-香附酮,乳腺清胶囊（柴胡、青皮、重楼、瓜蒌皮、香附、当归、夏枯草等13 味药组成）,薄 层 色 谱,2014.10.26,项目有：水分、总灰分、酸不溶性灰分、砷盐、重金属和农药残留量等； 有毒组分需要检查；,农药残留量采用氧瓶燃烧法测定总有机氯和总有机磷，气相色谱法检查各相关
29、的农药。,2014.10.26,2014.10.26,指纹图谱的含义指同时记录中药制剂中所含各类化学成分（无论已知与否）的图谱。单方制剂绘制一张指纹图谱；复方制剂绘制多张图谱。中药制剂应具有相对稳定的指纹图谱。,2014.10.26,西青果的指纹图谱,2014.10.26,西青果的指纹图谱,2014.10.26,西青果的指纹图谱,2014.10.26,指从动物、植物、微生物中提取的，亦可用生物-化学半合成或用现代生物技术制得的生命基本物质，如氨基酸、多肽、蛋白质、酶、辅酶、多糖、核苷酸和脂类等，以及它们的衍生物、降解物及大分子的结构修饰物等。,2014.10.26,1）分子量不是定值 2）需检
30、查生物活性 3）需做安全性检查 4）需做效价测定 5）结构确证难,2014.10.26,2014.10.26,利用化学法、物理法、生物学方法来确证生化药物的真伪。 1）化学法：如溶菌酶的鉴别 2）酶法：如尿激酶和链激酶 3）电泳法：如肝素 4）生物法：如胰岛素 5）紫外光谱法：如三磷酸腺苷二钠,2014.10.26,2014.10.26,生化药物的含量有两种表示-一种用百分含量；一种是用生物效价或酶活力单位表示。,酶法测定有两种酶活力测定法、酶分析法。,2014.10.26,酶活力测定法：是以酶为测定对象的测定方法，目的是测定样品中某种酶的含量或活性；,酶分析法：是以酶为测定工具或测定试剂的测
31、定方法，目的测定样品中除酶以外的其他物质的含量。,2014.10.26,共同点：原理和方法相同，以酶的专一高效催化某化学反应为基础，通过测定酶反应的速率或生成物浓度来检测相应物质的含量。,2014.10.26,2014.10.26,2014.10.26,概 念,药房制剂分析: 根据药房工作的特点和要求，运用化学的、物理的或物理化学的分析方法对药房的制剂和配方进行鉴别和含量测定。,2014.10.26,医院快速检验的特点,2014.10.26,医院快速检验的任务,2014.10.26,快速定性分析,和药典的鉴别反应类似,选择12个较可靠且简单又具有明显外观变化的化学反应,如颜色改变、沉淀的生成与
32、否、结晶的析出、气体的产生等现象,以鉴别药物的真伪或存在与否。,2014.10.26,采用滴定分析法，但它与常量分析又有所不同。,取样量不同一般固体药物取0.05 0.15g;液体药物取0.5 2.0ml；油膏类药物不超过1.0g。,快速定量分析,2014.10.26,快速定量分析,（）滴定液的浓度及用量不同快速定量分析中,所用的滴定液浓度为 基数值,即一般应调整到浓度校正因素为1，如0.5000mol/L，0.1000mol/L或0.01000mol/L等。一般消耗的滴定液体积以1 5ml为好。在剩余滴定时，标准溶液的可用量超过5ml，但一般不超过10ml。,2014.10.26,快速定量分
33、析,（3）含量测定为限度检查在药房调配允许误差内，利用事先计算出滴定的高低限，证明滴定液消耗量是在误差范围之内即可。此即近似值的含量测定法，与“限度检查“相似。 设调配该方剂所允许的误差范围为5%，则：,2014.10.26,第一法 取两份供试品溶液分别置两个大试管（一般规格为2.5cm10cm）（或小锥形）中，各按相同的操作步骤，一管中加入低限量的滴定液，反应应显明显的阴性，说明未达到化学计量点，另一管中加入高限量的滴定液，则反应应显明显的阳性，说明已超过化学计量点，由两管中的不同反应，便可测出制剂中原药的含量限度。,2014.10.26,第二法 取一定量的供试品溶液置于小锥形瓶中，加入试剂
34、及指示剂，用标准溶液滴定至终点。读取消耗滴定液的数值，即可计算出供试品的百分含量。或从已制好的百分含量与消耗滴定液毫升数对应值表，查出供试品的百分含量。,2014.10.26,二 生物药物分析,2.1常用样品的种类、采集和贮藏,2.2生物样品的预处理,2014.10.26,药物进入体内后经过吸收、分布、代谢和排泄等动力学过程化学结构和存在状态都可能发生变化（游离型、缀合物、结合物）在不同个体中存在差异（个体差异）进而直接影响到药物在不同个体中的治疗效应和毒副作用。药物存在“化学上等价而生物学上不等价”,概 述,2014.10.26,生物药物分析也叫体内药物分析是指对生物样品中的药物及其代谢物的
35、分析。 具体检材：生物体的各种器官、组织和体液等。,生 物 药 物 分 析,概 述,2014.10.26,生物药物分析的特点,4药物浓度监测和药物滥用要求分析方法简便、快速。,概 述,1干扰物质多生物样品中含有大量的内源性物；样品一般均需经过分离、净化后才能进行分析,2样品量少、不能重复取样生物样品多数在特定条件下采集，无法再次取样，且浓度低、变化幅度大,3被测成分浓度低在测定前需浓缩、富集以适应分析方法要求；对分析方法的灵敏度及专属性要求较高,2014.10.26,生物样品的种类,生物样本：生物体的任何脏器、组织、体液均可作为生物样本. 常用样本:血液（血浆、血清或全血）、尿液、唾液、毛发,
36、2014.10.26,血液样品的采集和贮藏,包括血浆plasma，血清serum,全血whole blood,其中，血浆和血清是最常用的生物样品.,适用：有机药物药动学研究、生 物利用度测定、治疗药物检测等.采集：动物直接从动脉、心脏取血；人采取静脉血。,2014.10.26,血浆制备：血样置于含有抗凝剂（肝素、草酸盐、EDTA等）的试管中，混合后在25003000r/min离心5min使与血细胞分离，上清液为血浆. 血清制备：血样在室温放置0.51h待凝血后，剥离血块，以20003000r/min离心分离510min，取上清液即为血清. 国外一般专用血清来测定药物浓度,血液样品的采集和贮藏,
37、2014.10.26,取样时间间隔随测定目的不同 如测定药物动力学c-t曲线,如进行治疗药物浓度监测，则应在血中药物浓度达到稳定态后才有意义。,血液样品的采集和贮藏,2014.10.26,保存: 血浆或血清样品，须置硬质玻璃试管中完全密封后保存。短时间可置冰箱中4保存；长期需冷冻20或80保存。,血液样品的采集和贮藏,2014.10.26,尿液适用：药物剂量回收、肾清除率和生物利用度测定、药物代谢研究 毛发适用：微量元素测定,血液样品的采集和贮藏,2014.10.26,生物样品种类 被测药物性质 测定方法,预处理方法考虑,2014.10.26,目的:使药物释放出来，且防止对仪器的玷污. 方法:
38、 加入与水混溶的有机溶剂蛋白质脱水沉淀.甲醇、乙醇、丙酮、四氢呋喃等。 加入中性盐“盐析”沉淀蛋白质.饱和硫酸铵、硫酸钠、磷酸盐及枸橼酸盐等.V(盐溶液):V(血浆)=2:1,去 蛋 白 质,2014.10.26, 加入强酸与蛋白质阳离子(铵基)形成不溶性盐沉淀.适用于在酸性下不分解的药物。 10%CCl3COOH、6%HClO4、5%HPO3等 用量:V（血浆）：V（酸液）=1：0.6。 加入重金属盐与蛋白质阴离子(羧基)形成不溶性盐沉淀. CuSO4-NaWO4, ZnSO4-NaOH等,去 蛋 白 质,2014.10.26,酶水解法蛋白分解酶(枯草菌溶素)分解蛋白质 优点对酸不稳定、对热
39、不稳定的药物适宜。 超滤法半透膜滤除可溶性生物大分子 加热法蛋白质变性凝固,去 蛋 白 质,2014.10.26,尿中药物多数呈缀合状态,缀合物的水解,2014.10.26,为测定尿液中药物总量,需将缀合物中药物释出. 酸水解（HCl） 酶水解（葡萄糖醛酸苷酶或硫酸酯酶）,缀合物的水解,2014.10.26,分离纯化与浓集,液-液萃取法：乙醚或氯仿等有机溶剂提取亲脂性药物。 固-液萃取：亲水性的硅藻土、或疏水性的活性炭、聚苯乙烯、C18等吸附后，用有机溶剂洗脱。 被测组分浓集,2014.10.26,化学衍生化,目的： 使药物变成具有被分离的性 提高检测灵敏度 增强药物的稳定性 提高对光学异构体
40、分离能力,2014.10.26,化学衍生化,药物分子中活泼的H均可被衍生化。COOH、-OH、-NH2、-NH-、-SH等官能团。 GC：烷基化、酰化、硅烷化等以降低药物的沸点； HLPC：提高药物的检测灵敏度。一般是柱分离后衍生化，试剂有邻苯二醛、荧胺等。,2014.10.26,1. 药品检验程序一般分为、 、 、 、 ，并写出和. 2.选择氧瓶燃烧法所必备的实验物品包括： 磨口硬质玻璃锥形瓶 B. 铂丝 C. 氢气 D. 无灰滤纸 E.凯氏烧瓶 3. 氧瓶燃烧法常用吸收液A.水氢氧化钠 B.氢氧化钠 C.水 D.硝酸 E.硫酸 4.氧瓶燃烧法测定双碘喹啉片的含量时，其燃烧产物是什么？吸收液
41、是什么？加溴-醋酸的目的是什么？又为什么加甲酸？,2014.10.26,三 药品质量标准的制定,2014.10.26,1.药品质量标准的定义：国家对药品质量、规格及检验方法所做的技术规定.药品生产、供应、使用、检验和药政管理部门共同遵循的法定依据.,2.目的：加强对药品质量的控制及行政管理。,2014.10.26,3.意义：对我国的医药科学技术、生产管理、经济效益和社会效益产生良好的影响与促进作用。有利于促进药品国际技术交流和推动进出口贸易的发展。与新药的研制密切相关,2014.10.26,2014.10.26,自学！,2014.10.26,名 称,性 状,鉴 别,检 查,含 量 测 定,贮
42、藏,2014.10.26,1.药品名称应科学、明确、简短,名 称,3.外文名应尽量采用世界卫生组织编订的国际非专利药名（INN）. 4.中文名尽量与外文名相对应，一般以音对应为主。,2.避免采用可能给患者以暗示有关药理学,治疗学或病理学的药品名称.,2014.10.26,性 状,嗅味指药品本身固有的.,外观性状是对药品的色泽和外表的感观规定.,1.外观与嗅味,2014.10.26,性 状理化常数,通过理化常数的测定可对药品进行鉴别及纯度检查. 溶解度、熔点、比旋度、晶型、吸收系数、馏程、凝点、折射率、粘度、相对密度、酸值、羟值、皂化值等。,2.理化常数,2014.10.26,鉴 别可选用的方法
43、,化学法UV IR TLC HPLC GC 生物法,2014.10.26,鉴 别,a.专属性,灵敏性,便于推广 b.选用药典法 c.化学法仪器法相结合,鉴别法选取原则,2014.10.26,检 查,1.一般杂质检查 2.特殊杂质检查,检查内容,2014.10.26,检查检查方法要求与选取原则,要求 原则,针对性,灵敏性,专属性,合理性,2014.10.26,含 量 测 定 方 法,容量分析法,重量分析法,分光光度法,色谱法,含量测定-常用的法定方法及其特点,2014.10.26,含量测定分析法的认证,实验室应符合GLP要求；所用仪器均应按法定标准校对；所用试剂应符合有关规定；色谱法应进行色谱系
44、统适用性试验试验操作者应有良好的专业素质.,一、对实验室等内容的要求,2014.10.26,含量测定含量测定中分析法的认证,1 精密度：RSD0.2% (n=5) 2 准确度：以回收率表示. 回收率一般99.7%100.3%（n=5）,容 量 分 析,二、分析方法的效能指标,2014.10.26,含量测定含量测定中分析法的认证,紫外分光光度法,1 精密度：RSD1%(n=3-5),2 准确度：制剂按处方比例配置的辅料中加入高、中、低不同浓度的对照品,回收率在98102%（ n=9）.,第七章,2014.10.26,含量测定含量测定中分析法的认证,3 线性关系：对照品系列溶液(n=5-7)A为0
45、.20.7，A=ax+b (r0.999),b应接近零.,4 灵敏度：以本法实际的最低检测浓度表示.,第七章,2014.10.26,1 精密度：RSD 2%,含量测定含量测定中分析法的认证,高效液相色谱法,2 准确度：制剂按处方比例配置的辅料中加入高、中、低不同浓度的对照品(n=9),回收率应在98102%范围.,第七章,2014.10.26,含量测定含量测定中分析法的认证,3 线性范围：对照品系列溶液A=ax+b (r0.999),高效液相色谱法,第七章,5 专属性：考察除主药之外的辅料、有关物质、降解产物的干扰.,4 灵敏度：以S/N=3时检测限表示.,2014.10.26,含量测定含量限
46、度的确定,（1）根据不同的剂型 （2）根据生产的实际水平 （3）根据主药含量的多少,第七章,综 合 考 虑,2014.10.26,含量测定含量限度的确定,例VB1- 原料：99.0%,第七章,制剂：片剂 标示量 90.0%-110.0注射剂 标示量 93.0%-107.0,（1）根据不同的剂型,2014.10.26,含量测定含量限度的确定,植物中提取原料药,因干扰成分复杂,药品的纯度要由提取分离水平而定.,第七章,（2）根据生产的实际水平,2014.10.26,含量测定含量限度的确定,主药含量最小 5g （炔雌片） 主药含量最大0.5g（阿司匹林）,第七章,主药含量较大： 95.0%105.0
47、% 主药含量居中： 93.0%107.0% 主药含量小： 90.0%110.0%,（3）根据主药含量的多少,2014.10.26,贮藏,药品的贮藏条件及有效期的确定， 都是通过药品稳定性试验来确定的。,2014.10.26,（1）概况 （2）生产工艺 （3）标准制订的意见或理由 （4）对本标准的水平进行评价 （5）列出起草单位和复核单位对 本标准的意见 （6）主要的参考文献,药品质量标准起草说明,一原料药,2014.10.26,（1） 处方 （2） 制法 （3） 标准制订的意见或理由,7.3药品质量标准起草说明,一制 剂,2014.10.26,含量测定-常见的定量方法,4.药品质量标准的主要内容,2014.10.26,4.药品质量标准的主要内容,含量测定-定量分析方法的选择,2014.10.26,剂型不同限度不同,如VB,1,，口服用原料 含量98.5%,
