1、质 量 技 术 监 督 局 ICSDB36江 西 省 地 方 标 准DB 36/ XXXXXXXXX十字花科蔬菜品种抗根肿病鉴定技术规范The technique standards of evaluate the clubroot resistance of Cruciferae vegetable（征求意见稿）XXXX - XX - XX 发布 XXXX - XX - XX 实施江 西 省 发 布DB36/ XXXXXXXXXI目 次前言 II1 范围 12 规 范 性 引 用 文 件 13 术 语 和 定 义 14 鉴定方法 15 调查 26 抗 病 性 评 价 3附录 A（ 资 料 性
2、 附 录 ） 十字花科蔬菜根肿病症状与发生规律 .4附录 B（ 规 范 性 附 录 ） 根肿病接种体制备、蔬菜根肿病严重度分级标准、病情指数计算方法 .5DB36/ XXXXXXXXXII前 言本 标 准 按 照 GB/T 1.1-2009给 出 的 规 则 起 草 。 本标准由江西省农科院提出 本标准起草单位：江西省农业科学院植物保护研究所 本标准主要起草人：黄瑞荣、黄蓉、华菊玲、胡建坤。DB36/ XXXXXXXXX1十 字 花 科 蔬 菜 品 种 抗 根 肿 病 鉴 定 技 术 规 范1 范 围本标准规定了十字花科蔬菜品种抗根肿病鉴定和评价方法的术语和定义、 鉴定方法、 抗性评价分级 及
3、鉴定结果有效性判断。2 规 范 性 引 用 文 件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 4285 农 药 安 全 使 用 标 准GB/T 8321(所 有 部 分 ) 农 药 合 理 使 用 准 则GB 16715.2-2010 瓜 菜 类 作 物 种 子 ， 白 菜 类 。3 术 语 和 定 义下列术语和定义适用于本文件。3.1自 然 诱 发 (natural induce)在适宜病害发生的环境和病原物存在的条件下， 病原物借自然因素直接或间接传播到寄主植物或器
4、 官上，使其发病。3.2人 工 接 种 (artificial inoculation)采用人工方法将病原物直接或间接接种到寄主植物的种子或根部， 使其发病， 并依据相关的抗性评 价标准，来区分品种的抗病性。3.3对 照 品 种 (control variety)为了保证抗性鉴定结果的准确性、 可靠性， 减少年度间和环境条件差异， 选择抗性水平较稳定的品 种作为抗性鉴定试验的对照品种。4 鉴 定 方 法4.1 田 间 病 圃 鉴 定4.1.1 病 圃 设 置DB36/ XXXXXXXXX2在江西省十字花科作物栽培的根肿病常发区， 选择地势平坦方正、 土壤肥沃、 肥力均匀、 排灌方便、 土 壤
5、pH值 5.0-6.5的 根 肿 病 连 年 发 生 的 田 块 。4.1.2 对 照 品 种以江西省常规栽培小白菜品种“苏州青”和大白菜品种“青杂改良3号”为田间病圃和人工接种鉴 定抗病性的感病对照品种，以每批次鉴定的对照品种的抗性结果来评判各参鉴品种的相对抗性。4.1.3 整 地 、 播 种 与 定 苗整地 采用人 工或化学除草技术清除田间杂草。 施足基肥， 亩施腐熟厩肥1000-1500千克， 蔬菜专 用 复合肥40千 克， 机耕翻地， 辅助人工精细整地。 开沟做畦 （垄） ， 畦宽1.4m。 畦 沟底宽0.30m， 沟深0.25m。播种 苗期鉴定，播种时间在每年的4月/中下旬5月/中下
6、旬和8月下旬10月上旬，以8月下旬 10月上旬播种鉴定时机最好。分小区，按畦播种，随机区组排列。各品种每小区播2行，每行播10穴， 每 穴 播 3-5粒 种 子 ， 按 畦 面 的 宽 度 方 向 条 播 ， 重 复 3次 。 播 种 后 在 畦 面 上 撒 1 厚 的 田 间 病 土 盖 种 。定苗 参 鉴 菜 苗 长 出 1-2片 真 叶 后 定 苗 ， 每 穴 保 留 菜 苗 3株 ；4.1.4 病 圃 管 理水、 肥管理 种子出苗后， 如晴天日最高气温28 以上， 可在11:00-15:00采 用遮阴网铺在防虫网罩 上遮阴。前期苗床用洒水壶或喷雾器喷水保湿，中后期沟灌沟排，保持床土湿润
7、。菜苗长至25-30天， 亩 施 尿 素 3千 克 。害虫管理： 用矩形防虫网罩预防猿叶甲、 黄曲条跳甲和菜青虫等害虫危害菜苗， 辅助化学杀虫剂除 虫。菜苗不使用任何杀菌剂防病。4.2 人 工 接 种 鉴 定4.2.1 床 土 制 作取 根 肿 病 常 发 、 重 发 田 块 的 带 菌 土 壤 ， 按 2/3的 带 菌 土 壤 与 1/3含 蛭 石 的 营 养 土 ， 加 适 量 的 清 水 混 配均匀，调节土壤含水量至60%。4.2.2 床 土 装 盘将床土置入规格： 60cm40cm15cm的塑料秧盘 中， 以装平秧盘为准。 每盘加入20克尿素， 30克蔬 菜复合肥，搅拌均匀。4.2.3
8、 接种用 直 径 3cm的 试 管 底 部 竖 直 插 入 秧 盘 内 的 床 土 中 ， 制 作 深 3cm孔 穴 ， 每 盘 等 距 离 打 孔 8排 ， 每 排 5穴 ， 计40穴。 穴内 填充满含菌量110 6孢子 /克的菌土(附录B)。 供鉴 种子在孢子浓度2.510 6孢子/ml的菌 液 (附 录 B)中 浸 种 5小 时 后 播 种 到 菌 土 内 。 喷 清 水 保 持 盘 中 土 壤 湿 润 。4.2.4 苗 盘 管 理种 子 发 芽 出 苗 后 ， 保 持 秧 盘 土 壤 湿 润 。 出 苗 5-7天 定 苗 ， 每 穴 保 留 菜 苗 2-3株 ， 苗 龄 25天 ， 每
9、 盘 追 施 尿 素 2克 （ 兑 水 配 成 溶 液 ） 。 矩 形 防 虫 网 罩 防 虫 。 可 使 用 杀 虫 剂 防 虫 ， 但 不 使 用 杀 菌 剂 杀 菌 。5 调 查DB36/ XXXXXXXXX35.1 调 查 时 间以 苗 龄 40-45天 进 行 病 圃 鉴 定 与 人 工 接 种 鉴 定 病 情 调 查 。5.2 调 查 方 法 与 数 据 处 理调 查 各 参 鉴 品 种 的 所 有 菜 苗 ， 检 查 每 株 菜 苗 根 部 病 情 （ 症 状 识 别 见 附 录 A） ， 按 “0-9级 ”分 级 标 准（ 见 附 录 B） 记 载 病 情 ,统 计 株 发 病
10、 率 和 病 情 指 数 （ 见 附 录 B） 。6 抗 病 性 评 价6.1 评 价 标 准蔬菜品种的抗病性以田间病圃和人工接种两种方法鉴定的结果进行综合评价； 以田间病圃单一方式 鉴 定 品 种 的 抗 性 ， 判 定 抗 病 品 种 应 有 不 少 于 2次 或 不 同 年 份 的 田 间 鉴 定 结 果 。以 对 照 品 种 的 发 病 株 率 不 低 于 50%， 且 5级 以 上 的 病 株 占 总 病 株 数 的 50%以 上 ， 为 病 圃 和 人 工 接 种 鉴 定结果有效性标准。6.2 抗 性 表 型 划 分根 据 调 查 统 计 的 各 品 种 的 病 情 指 数 ， 按
11、 照 表 1评 定 各 参 鉴 品 种 对 根 肿 病 的 抗 性 结 果 。表 1 蔬 菜 品 种 抗 根 肿 病 评 价 标 准抗性表型 病情指数高 抗 （ HR） x=0抗（R） 0 X 10中抗（MR） 10 X 25中 感 （ MS） 25 X 35感 （ S） 35 X 50高 感 （ HS） X 50DB36/ XXXXXXXXX4附 录 A（资料性附录） 十字花科蔬菜根肿病症状与发生规律A.1 根 肿 病 症 状蔬菜根肿病因病菌危害蔬菜根部导致主根、 侧根肿瘤而影响植株正常生长。 条件适宜时， 蔬菜整个 生长期均可发生。 苗期感 染， 病害初始 ， 植株地上部 无明显症状， 但
12、植株生长逐渐减缓， 新 叶生长迟 滞 ， 植株矮小，基部叶片常在中午时出现萎蔫，早晚恢复正常；病害后期，植株生长不良，基部叶片变黄、 萎 蔫 成 失 水 状 ， 严 重 时 全 株 枯 死 。感病植株地下部分的根部形成肿瘤， 肿瘤的形状、 大小因着生部位不同而有较大差异。 一般主根上 的 肿 瘤 个 体 大 而 数 量 少 ， 肿 瘤 多 靠 近 上 部 ， 甚 至 露 出 土 表 ， 球 形 或 近 球 形 ； 侧 根 上 的 瘤 多 呈 圆 筒 形 、 手 指 状 ； 须 根 上 的 瘤 多 串 生 ， 数 量 可 多 达 20余 个 。 肿 瘤 初 期 表 面 光 滑 ， 后 期 常 发
13、 生 龟 裂 、 粗 糙 ， 易 被 其 它 杂菌侵入而引起根部组织腐烂。A.2 根 肿 病 发 生 基 本 规 律病 原 菌 为 芸 薹 根 肿 菌 （ Plasmodiophora brassicae Woronin） ， 在 分 类 上 属 于 根 肿 菌 目 、 薹 根 肿 菌 属真菌。土传病害，借雨水、灌溉水、农事操作和种子、菜苗调运等方式扩散蔓延。病原菌专性寄生， 寄主范围广，几乎为害所有十字花科植物。病菌以休眠孢子在土壤中或附着在种子表面度过不良环境， 在有自由水的条件下萌发产生游动孢子， 由根毛侵入寄主细胞内， 刺激薄壁细胞分裂、 膨大， 致根系形 成肿瘤，影响根的正常生理功能
14、，导致根系生长和吸收能力下降，植株生长发育受阻，甚至枯萎死亡。 条件适宜时该病可四季发生。 干旱年份发病轻， 十字花科作物连作田及酸性土壤发病重。 病组织因腐生 菌的作用腐烂破裂， 并放出休眠孢子囊进入土壤中度过不良环境。 软腐病细菌的乘虚而人， 可使软腐病 相伴发生DB36/ XXXXXXXXX5附 录 B（规范性附录） 根肿病接种体制备、蔬菜根肿病严重度分级标准、病情指数计算方法B.1 根 肿 病 接 种 体 制 备B.1.1 菌土把保存于-20冰柜中的根瘤取出，解冻后置入捣碎机中加适量清水捣碎。两层纱布过滤，除去根 部纤维组织， 离心机离心浓缩， 用水稀释配制成悬浮液， 于显微镜下采用血
15、球计数板法计数， 调节孢子 浓 度 至 2.5106孢 子 /ml， 配 成 含 水 量 60%、 孢 子 量 为 1106孢 子 /克 的 接 种 体 “菌 土 ”， 密 封 48 h备 用 。B.1.2 菌液把保存于-20冰柜中的根瘤取出，解冻后置入捣碎机中加适量清水捣碎。两层纱布过滤，除去根 部纤维组织， 离心机离心浓缩， 用水稀释配制成悬浮液， 于显微镜下采用血球计数板法计数， 调节孢子 浓 度 至 2.5106孢 子 /ml备 用 。B.2 病 害 严 重 度 分 级 标 准0级 ： 根 系 正 常 ， 无 肿 瘤 ；1级 ： 侧 根 有 小 肿 瘤 ；3级 ： 主 根 肿 大 ， 其 直 径 小 于 2 倍 茎 基 部 ；5级 ： 主 根 肿 大 ， 其 直 径 是 茎 基 部 的 2-3倍 ；7级 ： 主 根 肿 大 ， 其 直 径 是 茎 基 部 的 3-4 倍；9级 ： 主 根 肿 大 ， 其 直 径 是 茎 基 部 的 4倍 以 上 或 肿 大 的 根 部 出 现 变 黑 。B.3 病 情 指 数 计 算 方 法病 情 指 数 = (各 级 病 株 数 相 对 病 级 数 值 )/调 查 总 株 数 最 高 病 级 数 值 100
