1、1、双毁髓法处死蟾蜍；2、血涂片的制作；3、洗涤方法（标本片的冲洗）；4、染色方法（整个染色过程的规范化）；5、显微观察技术（显微镜的正确使用）。,上次实验所涉及的理论知识：,1、细胞化学法 2、线粒体,上次实验所涉及的基本操作技能：,回顾,第二次实验,1、细胞膜的通透性观察 P34 2、小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察 P38,I 细胞膜的通透性观察 P34,一、实验目的掌握细胞膜对不同性质和不同分子量大小的物质的通透性。,正常红细胞 红细胞溶血,三、实验观察,1.观察10兔红细胞悬液 2.观察溶血现象：取一支试管加入4.5ml蒸馏水，再加入0.5ml兔红细胞悬液混匀，观察溶液颜色变化。,0
2、.5ml兔红细胞悬液,浓度： 0.17mol/L 4.5ml,3.观察兔红细胞膜对不同等渗溶液的通透性,0.5ml兔红细胞悬液,浓度：0.32mol/L 4.5ml,四、注意事项,1、两人一组，一人观察，一人记时,10min 为限； 2、观察完一种溶质后，将试管洗 净，并尽量控干水分； 3、滴管不能混用。, 小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察 P38,一、实验目的 了解巨噬细胞的吞噬活动。,二、实验原理 巨噬细胞(macrophage)在机体的非特异性免疫中具有重要作用，当它接触到病原体等异物时，伸出伪足将其包围并吞入细胞，形成吞噬泡，进而与初级溶酶体融合，将异物消化分解。巨噬细胞吞噬异物的能力
3、在一定程度上反映了机体免疫水平的高低。,巨噬细胞(macrophage),三、实验步骤,腹腔注射淀粉肉汤(含台盼蓝),1ml/次/天(3天),诱生巨噬细胞 （已完成）,腹腔注射1鸡RBC悬液,0.51ml,轻揉小鼠腹部,30min,颈椎脱臼处死,腹腔注入生理盐水,0.51ml,取材、滴片 盖片、镜检,四、注意事项1、小白鼠腹腔注射要点； 2、颈椎脱臼法要点；3、滴片时细胞悬液不宜过多；4、剖开腹腔时尽量避免剪破血管；5、两个实验不能交叉做。,示范：小白鼠的抓取颈椎脱臼处死腹腔注射 分组：两人一组（一只小白鼠、一套器械） 操作：学生操作,1、绘制不同阶段巨噬细胞吞噬鸡红细胞图（示吸附、正在吞噬、完全吞入三个阶段） 2、兔红细胞膜对不同溶质的通透性的结果分析,五、作业,小结：,掌握的内容：膜的通透性 掌握的技能：1. 腹腔注射2. 颈椎脱臼处死法3. 正确的显微镜检方法4. 生物学绘图方法,
