1、Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 1 of 13Protocol Approval/方案批准:本方案适用于罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法的验证。批准意味着本方案已经被审核并且是完整和可接受的。PROTOCOL REVIEW/APPROVAL SIGNATURES方案审核/批准签字Date日期Drafted by/起草人Reviewed by/审核人Approved by/批准人Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素
2、片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 2 of 13Table of content目录1Signature of Validation Group Member / 验证小组签名 .32Abbreviation and Definition / 缩写和定义 33References / 参考文件 34Introduction / 介绍 .35Purpose / 目的 .56Scope / 范围 67Responsibility And Validation Plan / 职责和验证计划.68Deviation And Change/ 验证偏差和变更 .79Trai
3、ning/培训 .810Instrument Calibration / 仪器校准 .811Documentation / 文件 812Operation Process / 操作程序 813Deviation Records Summary/ 偏差记录汇总 . 1314Attachments/ 附件 .131Signature of validation group member/验证小组签名Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 3 of 13在本验证过程中涉及的所有人员必须
4、在下表中完成签名，并作为在该文件中所有签名的识别。职责范围 姓名（打印） 所在部门 签名确认/日期组长 QC组员 QC组员 QA2Abbreviation and definition / 缩写和定义2.1 RSD:相对标准偏差，nn2i ii=1i=1RSD(X-)/3References/参考文件3.1. GMP 规程3.2. 公司相关文件3.2.1 TM-40061-01 罗红霉素片 150mg 检验3.2.2 SOP01806/01 检验方法的验证3.2.3 SOP01806/03 验证的组织与实施4Introduction/ 介绍4.1 本检验方法为首次验证，验证的项目包括：专属性、
5、准确度、精密度(系统重复性、分析重复性、中间精密度) 、线性及范围、耐用性(滤膜吸附性)。4.2 方法描述4.2.1 仪器D-800LS 智能溶出仪 、紫外分光光度计 SHIMADZU UV2450。4.2.2 试液 溶出介质（ 盐酸溶液：11000）：量取盐酸 7ml，加水稀释至 7000ml，脱气，即得。 自身对照溶液：取供试品 10 片，研细，精密称取适量（相当于平均片重），置 100ml 量瓶中，加乙醇 30ml 溶解，用溶出介质稀释至刻度，摇匀，用 0.80m 的水相滤膜滤过，取续滤液 5ml，置 100ml 量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀，再取上述溶液 5ml，加硫酸溶液（75
6、100）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却， 即得。 空白溶液：取溶出介质适量，用 0.80m 的水相滤膜滤过，取续滤液 5ml，加硫酸溶液（75100）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得。4.2.3 操作Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 4 of 13在溶出仪水浴池中加入水至刻度，放入 6 个干净的溶出杯，调节篮杆高度，使篮下端距杯底 25mm2mm，分别量取经脱气的溶出介质 900ml 置于 6 个溶出杯中，盖上溶出杯盖，调节转速为 100 转 /分；加热水浴
7、池水的温度使 6 个溶出杯中介质的温度为 370.5时，取供试品 6 片分别于每个溶出杯中各加入一片，立即开始计时，至 45 分钟时，用带有取样针的注射器在液面与桨上端的中心距溶出杯内壁不少于 10mm 处迅速取样 10ml，立即用 0.80m 的水相滤膜滤过，精密移取续滤液 5ml 置 10ml 量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀，再取上述溶液 5ml，加硫酸溶液（75100）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却即得。取上述对照品溶液和供试品溶液，在 482nm 的波长处分别测定吸收度，并用空白溶液调零。按下式计算每粒的溶出度。A 样 m 对 0.9溶出度（%）=A 对 m 平 100%A对
8、 ：供试品吸光度m对 ：自身对照的称样量， mgm平 ：平均片重，mgA 对 ：自身对照溶液的吸光度 。4.2.4 标准规定45min 后溶出度应不少于 80。4.2.7 结果判定(1) 供试品6片溶出度中，每片溶出度不少于80%时，判定符合规定。(2) 供试品6片溶出度中，溶出度少于80%的不多于 2片，无任何1片溶出度少于70%，且溶出度的平均值不少于80%时，判定符合规定。(3) 供试品 6 片溶出度中，如果溶出度少于 80%的不多于 2 片，其中少于 70%且不低于 60%不多于一片，且溶出度的平均值不少于 80%时，应另取供试品 6 片复测；如果 12 片溶出度少于 80%的不多于
9、3 片，并且溶出度中少于 70%且不低于 60%的不得多于 1 片，且溶出度的平均值不少于 80%时，则判定符合规定。5. Purpose / 目的对罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法进行验证，以确认本方法在本实验室能对本产品的溶出度进行准确和可靠的检验，从而保证产品的质量。Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 5 of 136Scope / 范围本方案适用于罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法的验证。7Responsibility And Validation Plan
10、 / 职责和验证计划7.1 验证小组职责7.1.1 验证小组组长职责 保证验证方案及检查表的起草。 保证在执行前完成对验证方案及检查表的审核和批准。 负责对验证小组成员进行本方案的培训。 保证完全按照验证方案实施。 确保能及时发现偏差，并按照已经达成一致偏差处理方法对其进行记录、纠正、调查和最终确认。 验证过程中，如有变更，保证按变更控制执行 确保验证报告的生成、审核和批准，以便对该方案进行最终批准。7.1.2 验证小组成员职责7.1.2.1 QA 职责 执行前完成对方案及检查表的审核。 负责验证过程的监控和检查，保证验证方案的实施，参与验证结果评价。 参与验证偏差的调查、处理、和评估。 验证
11、过程中，如有变更，保证按变更控制执行。7.1.2.2 QC 职责 执行前确认方案已批准，并经过培训。 准备验证所需各种文件、试剂、仪表等。 按验证方案实施验证，收集、整理验证数据，完成验证记录和报告。 参与验证偏差的调查和处理，确认通过偏差修订和解决方案。 确认验证过程中的变更在实施前已经批准。7.2 验证计划本次验证计划于 2007 年 11 月 22 日-2007 年 12 月 25 日实施。Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 6 of 138. Deviation An
12、d Change/ 验证偏差和变更8.1 验证偏差8.1.1 当该方案的某一部分无法实施或实际情况无法达到可接受标准时，需要进行偏差报告。当偏差出现时，首先要进行全面调查以确定该偏差是由什么引起的，之后再确定相应的解决措施。8.1.2 表格包括以下 3 个部分 偏差描述本部分对于偏差和测量结果与规定的可接受标准不符的情况作一个简要描述说明。本部分不涉及该偏差出现的可能原因。 调查、实施和解决本部分提供调查偏差原因报告的简述、偏差处理实施计划、该偏差处理计划的负责人以及该处理实施的时间表。本部分也提供所有支持该偏差处理方案的参考文件。 结论& 建议 提供该偏差如何解决的简要说明、检查过程并证明该
13、偏差已经得到圆满解决达到了可接受标准的要求。在方案执行过程中遇到的所有偏差必须单独用偏差表格的形式来完成。 每个部分的偏差必须在该部分的验证工作结束之前得以解决。也可能出现测试失败而无法解决偏差的情况，在这种情况下要对测试进行修正，且该系统的验证暂停直到方案正确修正完毕为止。QA 部门必须负责监督所有的偏差解决过程。8.1.3 偏差报告记录本偏差记录是用来记录所有偏差报告的数据并提供一个专栏以证明所有的偏差以经被解决并核准。报告记录也提供了一个跟踪实施项目的机制，作为偏差解决的一部分以确保所有的项目都按时间表完成并经核准。8.1.4 在所有验证都完成后，该报告记录必须作为最终报告的一部分。偏差
14、报告汇总表作为相应附录五。8.2 变更控制所有在验证过程中产生的变更都要按照 SOP变更控制 的要求执行，确保所有的变更得到评估和批准，验证的结果达到预定的目的和要求。9. Training/培训Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 7 of 13验证小组成员都必须经本方案和相关检验 SOP 的培训，培训记录见附录一。10. Instrument Calibration / 仪器校准所有验证过程中使用的设备，需要校验的均应经过校验，并且在校验有效期内，相关内容检查填于附录二 。
15、11. Documentation / 文件检查验证所需要的文件都存在、最新并适用，并将检查结果填于附录三12.Operation Process/ 操作程序本次验证进行以下几个项目：专属性、准确度、精密度(系统重复性、分析重复性、中间精密度) 、线性及范围、耐用性(滤膜吸附性)。 供试品：罗红霉素片 150mg，批号： 0014006 对照品：罗红霉素对照品，来源：中国药品生物制品检定所，批号：130557-200502。 仪器：溶出度测试仪： D-800LS 智能溶出仪，编号：02001分光光度计：SHIMADZU UV2450（ 石英玻璃比色皿，1cm 厚度），编号：0201412.1
16、专属性12.1.1 程序空白辅料溶液的制备：按处方比例配制空白辅料，混匀，称取约一片中应含的辅料量的1/9 至 100ml 的量瓶中，加入适量溶出介质，超声 15min，冷却至室温后用溶出介质稀释至刻度，取适量溶液用 0.80m 的水相滤膜过滤，取续滤液 5ml 至 10ml 的量瓶，用溶出介质稀释至刻度。再取上述溶液 5ml，加硫酸溶液（75100 ）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得。对照溶液的制备：称取罗红霉素对照品 50mg，和辅料按处方比例混合，称取混合后的粉末约片重的 1/9 至 100ml 的量瓶中，加入适量溶出介质，超声 15min，冷却至室温后用溶出介质稀释至刻度，取
17、适量溶液用 0.80m 的水相滤膜 过滤，取续滤液 5ml 至 10ml 的量瓶，用溶出介质稀释至刻度。再取上述溶液 5ml，加硫酸溶液（75100）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得。空白溶液的制备：取溶出介质适量，用 0.80m 的水相滤膜滤过，取续滤液 5ml，加硫酸溶液（75100 ）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得。Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 8 of 13用紫外分光光度计在 400nm600nm 波长处用空白溶液扫描基线，然后扫描对照品溶
18、液和空白辅料溶液，并记录扫描图谱。将结果记录于附录四。12.1.2 可接受标准：对照溶液在 482nm 处应有明显吸收，且空白辅料溶液在 482nm2nm 处的吸光度应不超过对照溶液吸光度的 1%。12.1.3 原始记录检查的原始数据记录于附录四。12.2 准确度12.2.1 程序供试品溶液的制备：按处方比例配制空白辅料，混匀。分别取 13.6mg、16.7mg 和20.0mg 的罗红霉素对照品，精密称定，分别加入每片中应含的空白辅料的 1/9 的量 ，将三份样品分别转移至 100ml 的量瓶中，加入适量溶出介质，超声 15min，冷却至室温后用溶出介质稀释至刻度，用 0.80m 的水相滤膜过
19、滤，取续滤液 5ml 至 10ml 的量瓶，用溶出介质稀释并稀释至刻度，再取上述溶液 5ml，加硫酸溶液（75100）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得。同法制备 3 次，共得到 9 份供试品溶液。对照品溶液的制备：取罗红霉素对照品 16.7mg，精密称定，置 100ml 的量瓶中，加入乙醇 30ml 使溶解，用溶出介质稀释至刻度，用 0.80m 的水相滤膜过滤，取续滤液 5ml 至 10ml的量瓶，用溶出介质稀释并稀释至刻度，再取上述溶液 5ml，加硫酸溶液（75100）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得。平行制备 2 份，共得到 2 份对照品溶液。空白溶液的制备：取溶出介质
20、适量，用 0.80m 的水相滤膜滤过，取续滤液 5ml，加硫酸溶液（75100 ）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得。用紫外分光光度计在 482nm 处用空白溶液调零，测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度，将结果记录于附录四。先根据公式计算校正因子 f，然后按以下公式计算回收率A1/ C1 +A1/ C1公式 f =2 f：校正因子A1：第一份对照品溶液的吸光度A1 ：第二份对照品溶液的吸光度Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 9 of 13C1 ：第一份对照品溶液的浓
21、度，mg/mlC1 ：第二份对照品溶液的浓度，mg/mlA样 V公式 X% =f M 100% X%：回收率A 样 ：供试品溶液的吸光度f：校正因子M：配制供试品溶液时的罗红霉素对照品称样量，mgV：供试品溶液的稀释倍数，10010/512.2.2 可接受标准：回收率范围为:单个值：95.0105.0%，平均值：98%102%， RSD3.0%。12.2.3 原始记录检查的原始数据记录于附录四。12.3 精密度12.3.1 系统重复性12.3.1.1 程序供试品溶液的制备：分别取供试品 10 片，精密称定，研磨 2 分钟，取平均片重的 1/10，精密称定，然后转移至 100ml 的量瓶中，加入
22、乙醇 30ml 使溶解，用溶出介质稀释至刻度。用移液管精密移取 5ml 该溶液至 10ml 的量瓶中，用 溶出介质稀释至刻度，再取上述溶液 5ml，加硫酸溶液（75100）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得 。空白溶液的制备：取溶出介质适量，用 0.80m 的水相滤膜滤过，取续滤液 5ml，加硫酸溶液（75100 ）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得。用紫外分光光度计在 482nm 处用空白溶液调零，测定 供试品溶液的吸光度，平行测定 6次。计算供试品溶液 6 次测得 的吸光度的相对标准偏差（RSD）。12.3.1.2 可接受标准：供试品溶液 6 次测得的吸光度的相对标准偏差应
23、小于 3.0%。12.3.1.3 原始记录Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 10 of 13检查的原始数据记录于附录四。12.3.2 分析重复性12.3.2.1 程序方法：取供试品 20 片，精密称定，由 QC 部同一人员配制溶出介质 并按 4.2 中的方法测试供试品的吸光度，要求每次各同时测定 6 粒，在放进溶出杯之前分别精密称重，并计算平均片重，平行测定两次。12.3.2.2 计算吸光度相对吸光度 =每片称样量12.3.2.3 可接受标准：6 份结果的相对 吸光度和 1
24、2 份结果的相对吸光度的 RSD 均小于 3.0%。12.3.2.4 原始记录检查的原始数据记录于附录四。12.3.3 中间精密度12.3.3.1 程序方法：由 QC 部人员 A 和 B 分别称取供试品 10 片，分别配制溶出介质 按 4.2 中的方法测试供试品的溶出度，要求每个人员各 6 粒在放进溶出杯之前分别精密称重，并计算平均片重。按下列公式计算供试品的校正溶出度。计算：供试品校正溶出度溶出度m 均公式 X% =m样 100% m 均 ：平均片重m 样 ： 片重12.3.3.2 可接受标准每人测得校正溶出度的 RSD 和两人 12 粒的校正溶出度的 RSD 均不得超过 3.0%。12.3
25、.3.3 原始记录检查的原始数据记录于附录四。12.4 线性及范围Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 11 of 1312.4.1 程序对照溶液的制备：精密称定罗红霉素对照品 150mg，置 100ml 量瓶中，加乙醇 30ml 溶解，用溶出介质稀释至刻度，摇匀，分别取上述溶液 2ml，3ml，4ml，4.5 ml ，5 ml，5.5ml 和 6ml分别置 100ml 量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀，用 0.80m 的水相滤膜滤过，再取续滤液 5ml，加硫酸溶液（7510
26、0）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得。空白溶液的制备：取溶出介质适量，用 0.80m 的水相滤膜滤过，取续滤液 5ml，加硫酸溶液（75100 ）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得。用紫外分光光度计在 482nm 处，用空白溶液调零 ，测定以上溶液的吸光度。用测得的吸光度值对应浓度绘制直线，将结果记录于附录四。12.4.2 可接受标准：各点的相关系数 r 应大于 0.999。12.4.3 原始记录检查的原始数据记录于附录四。12.5 耐用性12.5.1 滤膜吸附性12.5.1.1 程序方法：取罗红霉素对照品 16.7mg，精密称定，置 100ml 的量瓶中，加乙醇 30ml
27、溶解，用溶出介质稀释至刻度，取上述溶液分别用不同 0.80m 水相滤膜(至少两种滤膜)过滤，分别弃去初滤液 1ml、2ml、3ml 、4ml 、5ml，取未过滤溶液和续滤液各 5ml 至 10ml 量瓶 ，用溶出介质稀释至刻度，再取上述溶液各 5ml，加硫酸溶液（75100）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，共得到 6 份供试品溶液。空白溶液的制备：取溶出介质适量，用 0.80m 的水相滤膜滤过，取续滤液 5ml，加硫酸溶液（75100 ）5ml，摇匀，放置 30 分钟，冷却，即得。用紫外分光光度计在 482nm 波长处用空白溶液调零，测定 6 份供试品溶液的吸光度，并各测定吸光度 1 次
28、并计算结果。计算：续滤液的吸光度滤前的吸光度吸光度变化=滤前的吸光度100%Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 12 of 1312.5.1.2 可接受标准续滤液与对照品溶液滤前的吸光度变化不超过1%。12.5.1.3 原始记录检查的原始数据记录于附录四。13. Deviation Records Summary/ 偏差记录汇总偏差记录汇总记录于附录五。Name and NO of deviation report偏差报告名称及编号Reporter/date记录人/日期14. Attachments / 附件Document No：文 件 编 号： TMVP-40061-5.3.2-001罗红霉素片 150mg 溶出度检验方法验证方案 Page No： 页 码 13 of 13序号 名称附录一 培训记录附录二 仪器校准附录三 文件检查附录四 数据记录附录五 偏差记录汇总
