1、NFBp65 和 ICAM1 在甲状腺肿瘤中的表达及相关性分析 (1)作者：余红梅蔡俊伟陈世清朱大菊【摘要】 探讨 NFBp65 和 ICAM1 在甲状腺肿瘤中的表达及相关性分析。方法：收集武汉大学人民医院及十堰市太和医院病理科 1999 年至 XX 年存档蜡块 40 例,均为手术切除后诊断明确的甲状腺肿瘤,其中,男 20 例,女20 例,年龄 2371 岁；按照 WHO 标准组织学分类:乳头状腺癌 12 例,滤泡性腺癌 10 例,髓样癌 10 例,未分化癌 8 例;按照 AJCC 标准临床病理分期:期 12 例,期 10 例,期 11例,期 7 例。同时取甲状腺瘤旁组织 15 例及正常甲状腺
2、组织 5 例作对照。患者术前均未行放疗或化疗。采用组织学及免疫组织化学 SP 法,分别对乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌、甲状腺瘤旁组织及正常甲状腺组织的组织学结构变化、相关 NFBp65 因子和 ICAM1 进行了观察，利用 HPIASXX 图像分析系统测定了NFBp65 和 ICAM1 在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果：NFvBp65 和 ICAM1 在乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌细胞胞浆内表达强；NFBp65 和 ICAM1 在甲状腺瘤旁组织中表达极弱或无表达；NFBp65 和 ICAM1 在正常甲状腺组织中表达极弱或无表达。经单因素方差分析，各组间
3、的差异有显著性意义。经 q 检验，乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌与甲状腺瘤旁组织、正常甲状腺组织之间平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义；甲状腺瘤旁组织与正常甲状腺组织之间平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义。结论：NFBP65 具有调控 ICAM1 的表达作用；NFBp65 和 ICAM1 与甲状腺肿瘤的发生、发展有密切的联系。【关键词】NFBp65 ICAM1 甲状腺肿瘤 免疫组织化学甲状腺肿瘤作为一种较常见的内分泌肿瘤，其中大部分为良性,但约有 5%为恶性,即各种甲状腺癌。由于甲状腺肿瘤起病较隐匿,生物学特性多变,故鉴别诊断困难,容易误诊。目前随着分子和蛋白质水平研究的
4、不断进展,已发现许多与肿瘤的发生、发展、转移及预后有关的分子标志物，其中 NFB 和 ICAM1 是近几年来研究较多的，NFB和 ICAM1 不仅可以作为用于诊断甲状腺肿瘤的因子，并可以利用 NFB 抑制物的研究为肿瘤的治疗开辟一条新路。本研究应用免疫组织化学方法研究了 NFB 和ICAM1 在甲状腺肿瘤中的表达并进行了相关性分析，探讨NFBp65 和 ICAM1 与甲状腺肿瘤的发生、发展的联系。1 材料与方法材料来源收集武汉大学人民医院及十堰市太和医院病理科 1999年至 XX 年存档蜡块 40 例,均为手术切除后诊断明确的甲状腺肿瘤。其中,男 20 例,女 20 例,年龄 2371 岁；按
5、照 WHO标准组织学分类:乳头状腺癌 12 例,滤泡性腺癌 10 例,髓样癌 10 例,未分化癌 8 例；按照 AJCC 标准临床病理分期:期 12 例,期 10 例,期 11 例,期 7 例。同时取甲状腺瘤旁组织 15 例及正常甲状腺组织 5 例作对照。患者术前均未行放疗或化疗。主要试剂和仪器主要试剂浓缩型鼠抗人 NFBp65 单克隆抗体（北京中山生物技术有限公司） ；浓缩型鼠抗人 ICAM1 单克隆抗体（北京中山生物技术有限公司） ；超敏即用型 SP 通用型免疫组织化学试剂盒（福州迈新公司） ；DAB 显色试盒及多聚赖氨酸（北京中山生物技术有限公司） 。实验方法常规 HE 染色实验标本经常
6、规石蜡包埋、切片、HE 染色。免疫组织化学染色 SP 法检测NFBp65 和 ICAM1 抗原，具体步骤如下：组织切片 5m，常规脱蜡至水，蒸馏水洗；3%过氧化氢，37孵育 10min 以抑制内源性过氧化物酶活性，PBS 洗 45min；NFB 、ICAM1 采用微波抗原修复（3 档，10min） ，PBS 洗 45min；正常羊血清 37孵育 10min 以减少非特异性反应；一抗 37孵育 1h，PBS 洗 45min；生物素标记的二抗，37孵育 10min，PBS 洗45min；链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶复合物 37孵育10min，PBS 洗 45min；DAB 显色液显色，自来水冲洗
7、终止反应；苏木精复染，脱水，透明，封片。用 PBS 代替一抗作为阴性对照组。免疫组织化学结果判断NFBp65 以胞核和胞浆出现棕黄色颗粒为阳性反应，ICAM1 以胞膜和胞浆出现棕黄色颗粒为阳性反应。阴性对照组除细胞核染成蓝色外，应无棕黄色反应物。采用 HPIAS1000 高清晰度彩色病理图文报告管理系统对NFBp65 和 ICAM1 的表达进行定量分析，每张切片随机选取 5 个高倍镜视野，测定每个视野下阳性反应的平均光密度、阳性反应面积和所有细胞总面积，计算阳性面积率。以每例 5 个视野的平均光密度、阳性面积率的平均值作为该例的测量值。统计学处理对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性
8、面积率做单因素方差分析和 q 检验，检验水准 为。2 结果NFBp65 的表达乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌细胞胞浆内有较多棕黄色颗粒，NFBp65 表达强；甲状腺瘤旁组织细胞胞浆内有少许或无棕黄色颗粒沉积，NFBp65表达极弱或无表达；正常甲状腺组织细胞胞浆内有少许或无棕黄色颗粒沉积，NFBp65 表达极弱或无表达。经单因素方差分析，各组间的差异有显著性意义。经 q 检验，乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌与甲状腺瘤旁组织、正常甲状腺组织之间平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义；甲状腺瘤旁组织与正常甲状腺组织之间平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义。见表 1。表 1 甲状腺癌、甲状腺瘤旁组织及正常甲状腺组织NFBp65 表达的平均光密度和阳性面积率注：*乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌与瘤旁组织比较，P；#正常甲状腺组织与乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌比较，P；*瘤旁组织与正常甲状腺组织比较，P。（作者：3COME 未知本文来源于爬虫自动抓取，如有侵犯权益请联系 service立即删除）
