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某区域3~6月份肉鸡群中呼吸道病原感染情况调查.doc

上传人:无敌 文档编号:183688 上传时间:2018-03-23 格式:DOC 页数:3 大小:48KB
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1、某区域 36 月份肉鸡群中呼吸道病原感染情况调查 卢国民 韩明宝 陈公武 天津瑞普生物股份技术有限公司 石家庄市农林科学研究院 摘 要: 本文章对某集团呼吸道病原感染情况进行调查, 为肉鸡呼吸道疾病的防控提供思路。从某集团采集有呼吸道症状的病鸡血清、肺脏、气管、脾脏对其进行H5H9 亚型禽流感病毒、新城疫病毒 (NDV) 、传染性支气管炎病毒 (IBV) 等病毒感染情况调查。10 份发病鸡组织中 H9N2AIV、NDV、IBV、aMPV 的检出率分别为 60%, 10%, 30%, 20%, 且存在共感染现象, 多数为双重感染H9AIV+IBV、NDV+H9AIV 分别为 30%, 10%,

2、血清与病原检出率存在差异。关键词: 呼吸道病; 病原; 血清; 安全体系; 作者简介:卢国民, 男, 潍坊人, 主要从事微生物学研究。近年来鸡呼吸道病愈演愈烈, 呼吸道病可以导致鸡的生产性能降低、严重者导致鸡只死亡, 给养殖业造成严重的危害。导致鸡呼吸道的病原主要有 H9 亚型禽流感病毒、新城疫病毒 (NDV) 、传染性支气管炎病毒 (IBV) 、支原体1等, 这些病原单独感染往往影响不大, 当一种或几种病原混合感染时可以造成鸡只大规模死亡。防控呼吸道病应建立良好的生物安全体系, 包括优质的环境控制、合理的免疫程序、规范的用药程序。同时做好鸡群健康监测。2017 年第 2 季度鸡呼吸道病严重,

3、 本文通过血清学及病原学检测, 对该地区能够导致呼吸道病的病原进行分析统计, 为该集团提供防控思路, 为其他病原学监控提供理论依据。1 材料与方法1.1 样品来源10 份样品采自河北大型养殖公司的自养场。1.2 主要试剂ND、H9、H5 凝集抗原购自青岛易邦生物工程有限公司;IBV 抗体试剂盒购自德士元亨生物科技有限公司;Trizol 提取试剂购自天隆科技;引物由宝生物工程大连有限公司合成。1.3 样品的采集同时取呼吸道严重的病鸡肺脏、气管、脾脏、血清等送回实验室检测。1.4 核酸提取及基因扩增1.4.1 总 RNA 提取取 200L 组织上清液, 加 1 m LTrizol 充分混匀, 室温

4、静置 10min, 加入 200L氯仿, 剧烈混匀, 室温静置 10 min。之后于 4离心机, 12000r/min 离心 10 min 上层水相 (500L) 转移至另一个 1.5 m L EP 管中, 加入等体积预冷后的异丙醇, 颠倒混匀后 4静置 10 min。于 4离心机, 12000r/min 离心 10 min以沉淀 RNA 弃上清, 加入 1 m L 预冷后的无水乙醇, 4, 7500r/min 离心 5 min。弃上清, 室温干燥 35 min。加入 40L DEPC 水溶解 RNA 沉淀, -80保存或直接进行逆转录。1.4.2 逆转录反应 (RT) 以总 RNA 为模板,

5、 Random Primer (6mer) 为引物, 在 M-MLV 反转录酶作用下合成第一链 c DNA。反应程序为 3010 min, 421 h, 7215 min, 冷却至室温, -20保存。1.4.3 目的基因扩增10L 扩增体系, 依次加入各个试剂, 全部加完后混匀, 瞬时离心, 使液体都沉降到 PCR 管底, 之后置于 PCR 仪中进行扩增。1.5 血清抗体检测同时对 ND、H9、H5、IB 进行抗体检测。2 结果与分析病原检测显示 H9 亚型禽流感检出率最高为 60%, 成为主要病原, 其次为传染性支气管炎病毒, 新城疫相对检出率较低。血清结果 H9 亚型禽流感抗体异常与传染性

6、支气管炎抗体最高达到 50%, 与病原学检测结果相近, 但并不是完全相符, 建议以后检测病料时血清跟组织同时取样检测, 减少误差, 有利于疾病的分析与。病原结果显示存在共感染现象, 且 H9AIV+IBV 共感染率最高达到 30%, NDV+H9AIV 与 H9AIV+a MPV 感染率为 10%。结论:该集团近期呼吸道严重主要是由于 H9 AIV 与 IBV 感染所导致。并存在H9AIV+IBV 共感染现象。3 讨论近几年肉鸡呼吸道严重, 并且混合感染的病例时有发生2, 研究表明支原体在呼吸道疾病的发展过程中起到重要的作用, 支原体可以作为致病因子, 由种鸡传到种蛋进而感染雏鸡, 支原体感染

7、的雏鸡可以使气管纤毛脱落, 黏膜免疫作用降低3;同时早期的喷雾的免疫对于防控鸡呼吸道病至关重要, 孙静4等对鸡呼吸道混合感染的病原进行调查显示我国重要的抗原主要为 H9AIV、NDV、MG等与本研究结果基本一致。防控鸡呼吸道病做好疫苗控制至关重要可以根据当地情况进行免疫, 推荐免疫程序为 1 日龄进行新支妥 (新城疫、传染性支气管炎活疫苗) 喷雾, 7 日龄新支妥点眼、滴鼻免疫, 21 日龄锐必新 (新城疫四系) 饮水, 对于已经有呼吸道症状的鸡群可以选用敏感抗生素如枝力清 (替米考星) 、立本康 (氟苯尼考) 、福欣 (四环素) 配合中草药如麻杏石甘、双黄连口服液进行治疗。参考文献1朱金华.鸡呼吸道疾病的病因与治疗体会J.当代畜禽养殖业, 2016, (11) :7-8. 2李先明.鸡呼吸道疾病的诊断与防制J.畜牧兽医科技信息, 2016, (10) :118-120. 3张海燕.鸡呼吸道疾病发病特点及防治J.畜牧兽医科技信息, 2016, (07) :103-104. 4孙静, 刁有祥, 刘霞, 孙杰, 李建侠.肉鸡群中呼吸道病原体共感染情况调查J.西北农林科技大学学报 (自然科学版) , 2011, (09) :29-34.

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