1、中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B 5 0 0 9.2 2 62 0 1 6食 品 安 全 国 家 标 准食 品 中 过 氧 化 氢 残 留 量 的 测 定2 0 1 6-0 8-3 1发 布2 0 1 7-0 3-0 1实 施中 华 人 民 共 和 国国 家 卫 生 和 计 划 生 育 委 员 会发 布G B 5 0 0 9.2 2 62 0 1 6 前 言 本 标 准 代 替GB/T234992009 食 品 中 残 留 过 氧 化 氢 的 测 定 方 法。本 标 准 与GB/T234992009相 比,主 要 变 化 如 下:标 准 名 称 修 改 为“食 品 安 全 国
2、家 标 准 食 品 中 过 氧 化 氢 残 留 量 的 测 定”;修 改 了 标 准 的 适 用 范 围;修 改 了 碘 量 法 中 的 计 算 公 式;修 改 了 钛 盐 比 色 法 的 定 量 限。G B 5 0 0 9.2 2 62 0 1 61 食 品 安 全 国 家 标 准食 品 中 过 氧 化 氢 残 留 量 的 测 定1 范 围本 标 准 规 定 了 食 品 中 过 氧 化 氢 残 留 量 的 测 定 方 法。本 标 准 适 用 于 预 包 装 牛 奶、饮 料、豆 制 品、水 发 产 品、鸡 爪 等 食 品 中 过 氧 化 氢 残 留 量 的 测 定。第 一 法 碘 量 法2 原
3、 理食 品 中 的 强 氧 化 物 在 稀 硫 酸 中 使 碘 化 钾 氧 化,产 生 定 量 的 碘,生 成 的 碘 以 淀 粉 作 指 示 剂,用 硫 代 硫酸 钠 标 准 溶 液 滴 定 得 到 强 氧 化 物 总 量。加 入 过 氧 化 氢 酶 分 解 去 除 试 样 中 的 过 氧 化 氢,用 硫 代 硫 酸 钠 标准 溶 液 滴 定 去 除 过 氧 化 氢 后 的 其 他 氧 化 物 含 量。两 次 滴 定 结 果 之 差 可 计 算 得 到 样 品 中 过 氧 化 氢 的含 量。3 试 剂 和 材 料除 非 另 有 说 明,本 方 法 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯,水 为G
4、B/T6682规 定 的 三 级 水。3.1 试 剂3.1.1 硫 代 硫 酸 钠(Na 2S 2O3)。3.1.2 可 溶 性 淀 粉(C 6H10O5)n。3.1.3 碘 化 钾(KI)。3.1.4 硫 酸(H2SO4)。3.1.5 钼 酸 铵(NH4)6Mo 7O244H2O。3.1.6 过 氧 化 氢 酶(单 位 活 力 大 于200000U/mL):置 于-20保 存。3.1.7 亚 铁 氰 化 钾K4Fe(CN)63H2O。3.1.8 乙 酸 锌(C 4H6O4Zn2H2O)。3.1.9 乙 酸(C 2H4O2)。3.1.1 0 活 性 炭。3.2 试 剂 配 制3.2.1 淀 粉
5、 指 示 剂(10g/L):称 取 可 溶 性 淀 粉0.50g,加 少 许 水,调 成 糊 状,倒 入50mL沸 水 中 调 匀,煮沸。临 用 时 现 配。3.2.2 碘 化 钾 溶 液(100g/L):称 取10.00g碘 化 钾,加 水 溶 解,定 容 至100mL,贮 于 棕 色 瓶 中。临 用 时现 配。3.3.3 10%硫 酸 溶 液(质 量 分 数):量 取60mL硫 酸,缓 缓 注 入 约700mL水 中,冷 却,稀 释 至1000mL。G B 5 0 0 9.2 2 62 0 1 62 3.3.4 3%钼 酸 铵 溶 液:称 取3.00g钼 酸 铵,加100mL水 溶 解。3
6、.3.5 0.1%过 氧 化 氢 酶 溶 液:称0.10g过 氧 化 氢 酶,用100mL蒸 馏 水 分 多 次 将 其 溶 解,冷 藏 可 保 存两 个 月。3.3.6 亚 铁 氰 化 钾 溶 液:称 取106.0g亚 铁 氰 化 钾,用 水 溶 解,并 稀 释 至1000mL。3.3.7 乙 酸 锌 溶 液:称 取220.0g乙 酸 锌,加30mL乙 酸,用 水 溶 解,稀 释 至1000mL。3.3.8 活 性 炭:将100g活 性 炭 加 至750mL1mo l/L盐 酸 中,回 流1h2h,过 滤,用 水 洗 数 次,至 滤 液中 无 铁 离 子(Fe3+)为 止,然 后 置 于11
7、0烘 箱 中 烘 干。注:检 验 铁 离 子 方 法:利 用 普 鲁 士 蓝 反 应。将20g/L亚 铁 氰 化 钾 与1%盐 酸 等 量 混 合,将3.3.8洗 出 滤 液 滴 入,如 有铁 离 子 则 产 生 蓝 色 沉 淀。3.3 标 准 溶 液 配 制3.3.1 0.1mo l/L硫 代 硫 酸 钠 标 准 储 备 液:按GB/T601规 定 的 方 法 配 制 和 标 定。3.3.2 0.0020mo l/L硫 代 硫 酸 钠 标 准 使 用 液:临 用 时 用 标 准 储 备 液 稀 释。4 仪 器 和 设 备4.1 电 子 天 平:感 量 为0.01g。4.2 高 速 捣 碎 机
8、。5 分 析 步 骤5.1 试 样 制 备5.1.1 固 体 样 品称 取 粉 碎 均 匀 的 试 样 可 食 部 分10g(精 确 到0.01g),加 适 量 水 溶 解,转 移 入100mL容 量 瓶 中,对 蛋白 质、脂 肪 含 量 较 高 的 样 品 可 加 入 乙 酸 锌 溶 液5mL、亚 铁 氰 化 钾 溶 液5mL,加 水 定 容 至 刻 度(V1),摇匀。浸 泡30mi n,用 滤 纸 过 滤,滤 液 作 为 试 样 液 备 用。5.1.2 液 体 样 品称 取25g(精 确 到0.01g)试 样 于100mL容 量 瓶 中,对 蛋 白 质、脂 肪 含 量 较 高 的 样 品
9、可 加 入 乙 酸 锌溶 液5mL、亚 铁 氰 化 钾 溶 液5mL,加 水 定 容 至 刻 度(V1),摇 匀,用 滤 纸 过 滤,滤 液 作 为 试 样 液 备 用。如样 品 滤 液 有 颜 色,加 入1g活 性 炭,振 摇1mi n,用 干 燥 滤 纸 过 滤,弃 去 初 滤 液,滤 液 待 用。5.2 测 定分 别 吸 取 滤 液25.0mL(V2),置 于A、B两 个250mL碘 量 瓶 中,A瓶 中 加 入0.1%过 氧 化 氢 酶 溶 液0.5mL,加 盖 混 匀,放 置10mi n(放 置 过 程 中 摇 动 数 次)。在A、B两 瓶 中 各 加 入10%硫 酸 溶 液5.0m
10、L、碘 化 钾 溶 液5.0mL、3%钼 酸 铵 溶 液3滴,混 匀,置 暗 处 放 置10mi n,各 加 水50mL,分 别 用 硫 代 硫 酸 钠标 准 溶 液 滴 定,待 滴 至 微 黄 色 时,加 淀 粉 指 示 剂0.5mL,继 续 滴 至 蓝 色 消 失,分 别 记 录A、B两 瓶 消 耗 硫代 硫 酸 钠 标 准 溶 液 的 毫 升 数。6 分 析 结 果 的 表 述试 样 中 过 氧 化 氢 的 含 量,按 式(1)计 算:G B 5 0 0 9.2 2 62 0 1 63 X=(VB-VA)c V1 17.01m V21000(1)式 中:X 样 品 中 过 氧 化 氢 的
11、 含 量,单 位 为 毫 克 每 千 克(mg/kg);VBB瓶 中 消 耗 硫 代 硫 酸 钠 标 准 滴 定 溶 液 的 体 积,单 位 为 毫 升(mL);VAA瓶 中 消 耗 硫 代 硫 酸 钠 标 准 滴 定 溶 液 的 体 积,单 位 为 毫 升(mL);c 硫 代 硫 酸 钠 标 准 滴 定 溶 液 的 浓 度,单 位 为 摩 尔 每 升(mo l/L);V1 试 样 处 理 液 总 体 积,单 位 为 毫 升(mL);17.01 与1.00mL硫 代 硫 酸 钠 标 准 溶 液c(Na 2S 2O3)=1.000mo l/L 相 当 的 过 氧 化 氢 的 质 量,单 位 为
12、毫 克(mg);m 试 样 质 量,单 位 为 克(g);V2 测 定 用 样 液 体 积,单 位 为 毫 升(mL);1000 换 算 系 数。计 算 结 果 以 重 复 性 条 件 下 获 得 的 两 次 独 立 测 定 结 果 的 算 术 平 均 值 表 示,结 果 保 留 三 位 有 效 数 字。7 精 密 度在 重 复 性 条 件 下 获 得 的 两 次 独 立 测 定 结 果 的 绝 对 差 值 不 得 超 过 算 术 平 均 值 的10%。8 其 他本 方 法 定 量 限 为3mg/kg。第 二 法 钛 盐 比 色 法9 原 理过 氧 化 氢 在 酸 性 溶 液 中,与 钛 离
13、子 生 成 稳 定 的 橙 色 络 合 物。在430nm下,吸 光 度 与 样 品 中 过 氧 化氢 含 量 成 正 比,用 比 色 法 测 定 样 品 中 过 氧 化 氢 的 含 量。1 0 试 剂 和 材 料除 非 另 有 说 明,本 方 法 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯,水 为GB/T6682规 定 的 三 级 水。1 0.1 试 剂1 0.1.1 高 锰 酸 钾(KMnO4)。1 0.1.2 30%过 氧 化 氢 溶 液(H2O2)。1 0.1.3 硫 酸(H2SO4)。1 0.1.4 二 氧 化 钛(TiO2)。1 0.1.5 硫 酸 铵(NH4)2SO4。1 0.1.6 盐
14、酸(HCl)。1 0.2 试 剂 配 制1 0.2.1 钛 溶 液:称 取1.00g二 氧 化 钛(TiO2)、4.00g硫 酸 铵 于250mL锥 形 瓶,加 入100mL浓 硫 酸,G B 5 0 0 9.2 2 62 0 1 64 上 面 放 置 一 小 漏 斗,置 于 可 控 温 电 热 套 中150保 温15h16h,冷 却 后 以400mL水 稀 释,最 后 用 滤纸 过 滤,清 液 备 用。1 0.2.2 1mo l/L盐 酸 溶 液:量 取90mL盐 酸,加 入1000mL水 中。1 0.2.3 硫 酸 溶 液(1+4):量 取10mL硫 酸,加 入40mL水 中。1 0.3
15、标 准 溶 液 配 制1 0.3.1 高 锰 酸 钾 标 准 溶 液c(15KMnO4)=0.100mo l/L:按GB/T601规 定 的 方 法 配 制 和 标 定。1 0.3.2 过 氧 化 氢 标 准 储 备 液:吸 取30%过 氧 化 氢 溶 液1mL于100mL容 量 瓶 中,加 水 至 刻 度,混 匀。吸 取20.00mL过 氧 化 氢 标 准 储 备 液 于250mL锥 形 瓶 中,加 入10%硫 酸 溶 液(3.2.3)25mL,用 高锰 酸 钾 标 准 溶 液c(15KMnO4)=0.100mo l/L 滴 定 至 微 红 色。过 氧 化 氢 标 准 储 备 液 的 浓 度
16、,按 式(2)计 算:X=17.01 c V20.00(2)式 中:X 过 氧 化 氢 标 准 储 备 液 浓 度,单 位 为 毫 克 每 毫 升(mg/mL);17.01 每 毫 升 高 锰 酸 钾c(15KMnO4)=0.100mo l/L 标 准 溶 液 相 当 于 过 氧 化 氢 的 质 量,单 位 为毫 克(mg);c 高 锰 酸 钾c(15KMnO4)=0.100mo l/L 标 准 溶 液 的 浓 度,单 位 为 摩 尔 每 升(mo l/L);V 滴 定 所 用 高 锰 酸 钾 标 准 溶 液c(15KMnO4)=0.100mo l/L 的 体 积,单 位 为 毫 升(mL)。
17、1 0.3.3 过 氧 化 氢 标 准 使 用 液:根 据10.3.2的 标 定 结 果 将 过 氧 化 氢 标 准 储 备 液 稀 释 成20g/mL。1 1 仪 器 和 设 备1 1.1 电 子 天 平:感 量 为0.01g。1 1.2 高 速 捣 碎 机。1 1.3 分 光 光 度 计:配5cm比 色 皿。1 2 分 析 步 骤1 2.1 试 样 制 备同5.1。1 2.2 标 准 曲 线 的 制 作吸 取0.00mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL、7.50mL、10.0mL过 氧 化 氢 标 准 使用 液(相 当 于0g、5g、10g、20g、5
18、0g、100g、150g、200g过 氧 化 氢),分 别 置 于25mL带 塞比 色 管 中。各 加 入 钛 溶 液5.0mL,用 水 定 容 至25mL,摇 匀,放 置10mi n。用5cm比 色 皿,以 空 白 管 调节 零 点,于 波 长430nm处 测 吸 光 度。以 标 准 系 列 的 过 氧 化 氢 浓 度(g/mL)对 吸 光 度 绘 制 标 准 曲 线。G B 5 0 0 9.2 2 62 0 1 65 1 2.3 试 样 溶 液 的 测 定吸 取10.00mL(V2)试 样 液 于25mL带 塞 比 色 管 中,各 加 入 钛 溶 液5.0mL,用 水 定 容 至25mL,
19、摇匀,放 置10mi n。用5cm比 色 皿,以 空 白 管 调 节 零 点,于 波 长430nm处 测 吸 光 度。同 时 做 试 剂 空 白试 验。如 果 经 过 活 性 炭 吸 附 后 试 样 液 仍 有 颜 色 干 扰,应 扣 除 试 样 液 的 本 底 色,即 用5.0mL硫 酸 溶 液(1+4)代 替 钛 溶 液,其 他 按 上 述 方 法 操 作。1 3 分 析 结 果 的 表 述试 样 中 过 氧 化 氢 的 含 量,按 式(3)计 算:X=c V1m V2(3)式 中:X 样 品 中 过 氧 化 氢 含 量,单 位 为 毫 克 每 千 克(mg/kg);c 试 样 测 定 液
20、 中 过 氧 化 氢 的 质 量,单 位 为 微 克(g);V1 试 样 处 理 液 总 体 积,单 位 为 毫 升(mL);m 试 样 质 量,单 位 为 克(g);V2 测 定 用 样 液 体 积,单 位 为 毫 升(mL)。计 算 结 果 以 重 复 性 条 件 下 获 得 的 两 次 独 立 测 定 结 果 的 算 术 平 均 值 表 示,结 果 保 留 三 位 有 效 数 字。1 4 精 密 度在 重 复 性 条 件 下 获 得 的 两 次 独 立 测 定 结 果 的 绝 对 差 值 不 得 超 过 算 术 平 均 值 的10%。1 5 其 他本 方 法 检 出 限 为0.5mg/kg,定 量 限 为3mg/kg。
