1、凝集 沉淀反应 实验目的 1掌握直接凝集反应的原理意义及操作方法2了解双向琼脂扩散试验的原理意义及操作方法 实验内容 1直接凝集反应玻片法2双向琼脂扩散试验 实验原理 直接凝集反应 颗粒性抗原悬液与其相应抗体 在有适量电解质的环境中 两者直接特异性结合 进一步凝集成肉眼可见的凝集块 沉淀反应 可溶性抗原与相应抗体特异性结合 两者比例适当并有电解质存在及其一定的温度条件下 经一定的时间 可形成肉眼可见的沉淀物 在琼脂板上双方结合出现白色沉淀线 实验用品 琼脂板 打孔器 酒精灯 毛细吸管 诊断血清 对照抗原 待检血清 湿盒 37 温箱 双凹玻片 伤寒诊断血清 生理盐水 待检菌液等 实验方法 直接凝
2、集反应玻片法1先标记双凹玻片 两侧分别为1 2号 在1号凹内加入伤寒诊断血清1滴 在2号凹内加入生理盐水1滴 2分别加入待检菌液于两凹内各1滴3摇动混匀2分钟 观察结果 双向琼脂扩散试验 1铺板 将溶化之1 琼脂5ml铺于洁净玻片上 2打孔 在琼脂板上打7个孔 3封底 把琼脂板通过火焰三次 4加样 把抗体1滴加于中央孔 把对照抗原加于上下两孔 6点 12点 把待检血清 肝癌病人血清 加于右侧孔内 左侧孔留作空白对照 5孵育 将加样后的琼脂板放在湿盒内 放入37 温箱孵育24h 取出观察结果 实验结果与分析 1直接凝集反应玻片法 1号凹内出现凝集颗粒 2号凹内均匀混浊不出现颗粒 2双向琼脂扩散试验 两对照抗原孔和抗体孔之间出现白色沉淀线 待检血清孔 2点 4点 和中央抗体孔之间亦出现白色沉淀线为阳性反应 实验注意事项 1直接凝集反应玻片法摇动玻片时不要把两凹内液体混在一起 2双向琼脂扩散试验要注意加样要加满而不溢出为止 作业 1写出实验报告2分析凝集反应的结果和意义3绘出双向琼脂扩散试验结果图
