DNA琼脂糖凝胶电泳 实验原理 琼脂糖为链状多糖 绳状琼脂糖束 大网孔型凝胶 分离 鉴定 纯化DNA影响DNA迁移率的因素 DNA分子的大小 构象 凝胶浓度 电压 电泳缓冲液的组成缓冲液pH DNAPi DNA带负电荷 迁移率与分子量对数成反比DNA分子构象影响迁移率 共价闭环DNA 线状DNA 开环DNA 不同浓度琼脂糖分离DNA分子的范围 琼脂糖浓度 分离范围 kb 0 35 600 61 200 70 8 100 90 5 71 20 4 61 50 2 42 00 1 3 琼脂糖凝胶中DNA的观察 溴化乙锭 EB DNA 紫外光下红色荧光 主要实验器材 电泳槽结构 操作步骤 琼脂糖凝胶的制备 溶化 冷却 EB凝胶板的制备 加梳子 倒胶样品的制备 样品 1 5体积溴酚蓝加样 加样端为负极 黑 电泳 5V cm观察 紫外灯下观察 照相 溶胶 准备胶槽 凝胶冷却至50 C 加EB至终浓度0 5 g ml 铺胶 凝胶凝固后取出梳子 加缓冲液 准备样品 点样 电泳 注意观察溴酚蓝染液的迁移 紫外灯下观察电泳结果 照相
