1、1 实验目的学习试管凝集试验的操作与观察结果的方法 了解其临床意义 掌握血清凝集效价的定义 实验五 试管凝集试验 2 实验原理 颗粒性抗原在适当的电解质条件下与一定比例的抗体可以发生特异性的结合 即凝集试验 抗原与不同稀释度的抗体在试管内直接结合而出现的凝集现象称为试管凝集试验 该方法多用于半定量试验 原则上是用定量抗原悬液与一系列递倍稀释的受检血清混合 在保温静置后观察结果 以判定受检血清中有无相应抗体及其效价 3 实验器材 略 4 实验方法 1 所有试管各加入0 5ml生理盐水 取第1支试管加入0 5ml抗体 溶血素 混匀 吸取0 5ml混合液加入到第2管 混匀再吸取0 5ml混合液加入到
2、第3管 依次类推至第5管 弃去0 5ml混合液 第6管不加抗体 2 加一定量的已知抗原 0 5ml 2 SRBC 3 37 孵育12h 使抗原和抗体充分反应 4 观察每支试管内抗原的凝集程度 通常以产生明显凝集 现象的最高血清稀释度为血清中抗体的效价 结果分析 凝集分5级 强弱判定以 号表示如下 很强 抗原全部凝集 液体澄清 轻摇有大片凝集块 强 抗原绝大部分凝集 液体有轻度混浊 凝集块较小 中等强度 抗原部分凝集于管底 液体半澄清 凝集块小 弱 抗原仅少量凝集 液体混浊 不凝集 液体混浊与对照管相似 5 注意事项 1 试管凝集试验敏感性不高 特异性受检抗原不稳定 易自凝的影响 如果电解质浓度和pH不适当 也可引起非特异性凝集 出现假阳性 2 临床上 试管凝集试验主要用已知抗原测定受检血清中有无某种特异性抗体及其含量 效价 以辅助临床诊断疾病或流行病学研究
