1、实验二 血乳酸的测定及其应用,通过实验使学生掌握体内血乳酸的测定方法及 掌握血乳酸指标在运动实践中的应用和意义,为体育教学和运动训练提供指导。 巩固离心机、可调微量移液器等仪器的基本操作。掌握实验对象取材、标本处理的方法与生化分析仪的操作方法。,一、 实验目的,以NAD+为氢受体,LDH催化乳酸 脱氢生成丙酮酸,使NAD+转化成NADH。其中PMS递氢使NBT还原为紫色呈色物,呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。,二、实验原理,三、实验器材与试剂,3 实验器材与试剂实验仪器,1. 实验仪器 采血针、吸血管、移液管、水浴锅、离心机、生化分析仪等 2. 试剂盒(南京建成生物工程研究所
2、),四、实验步骤,采血制备上清液: 指尖采血40l,全血加入0.24ml的蛋白沉淀剂 混匀,3500400转/分,离心10分钟,取上清待测。,运动方案: 用功率自行车进行大强度运动训练建立运动实验模型(自行设计)。,计算公式:,测定 OD值空白管OD值 标准浓度 血乳酸(mmol/L) = - (3 mmol/L) 稀释倍数(7倍) 标准 OD值空白管OD值,五、实验结果,六、注意事项,6 注意事项,1、设计运动方案时,应注意检索文献资料,注意运动 时间与强度的关系,注意研究对象的物种差异。 2、严格按照实验方法与步骤进行操作。 3、做好实验数据的统计分析。,1、实验目的 2、实验步骤 3、实验结果:公式计算 4、实验结果分析:乳酸是糖酵解供能系统的终产物,又是有氧代谢系统的重要氧化物质,运动时乳酸主要在骨骼肌中生成,可在肝内经糖异生途径转变为葡萄糖,在供能体系中占有重要地位,可直接用运动后血乳酸的浓度来评定无氧代谢的能力。如400 m跑后,血乳酸低于10 mmol/L表明无氧代谢能力差;达到14-15 mmol/L表明无氧酵解能力强。,七、实验报告,