1、1微生物限度检测原始记录文件编号 R07-028-产品名称 规 格产品批号 检验日期检品来源 报告日期检验依据 中国药典2010 年版二部细菌、霉菌及酵母菌计数检测室净化工作台编号：SB02-020-02 阳性菌室净化工作台编号：SB02-020-01 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（配制批号： ）温度： 湿度： 供试液制备 ： 称取供试品 10g（液体 10 ml） ，加 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 100ml，混匀，作为 1：10 的供试液。取 1：10 的供试液 10ml，加上述缓冲液至 100ml，混匀，作为 1：100 的供试液。供试品检查： 1平皿法：分别取 1：
2、10、1：100 供试液各 1ml，置无菌平皿中，注入1520ml 温度不超过 45的溶化的营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基，混匀，凝固，倒置于培养箱中培养。阴性对照试验 取试验用的稀释液 1ml，置无菌平皿中，注入培养基，凝固，倒置培养。2薄膜过滤法：取相当于每张滤膜含 1g 供试品的供试液，加 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释至 100ml，混匀，过滤。用 ml pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于琼脂培养基平板上培养。阴性对照试验 取试验用稀释液 1ml，照上述薄膜过滤法操作，作为阴性对照。培养和计数： 细菌 30-35，培养 3 天。培养
3、箱编号：SB02-018-01 设定温度：培养基配制批号：培养时间： 月 日 时- 月 日 时霉菌及酵母菌 23-28，培养 5 天。培养箱编号：SB02-019-01 设定温度：培养基配制批号：培养时间： 月 日 时- 月 日 时1：10 1：100 阴性对照 1：10 1：100 阴性对照观察时间（小时） 1 2 1 2 1 2培养温度 观察时间 1 2 1 2 1 2 培养温度24 小时 24 小时48 小时 48 小时72 小时 72 小时96 小时 96 小时120 小时 120 小时平 均结 果检验人： 复核人：2微生物限度检测原始记录文件编号 R07-028-产品名称 规 格产品
4、批号 检验日期控制菌检查 ： 大肠埃希菌大肠埃希菌批号： 营养肉汤培养基配制批号： 胆盐乳糖培养基配制批号： MUG 培养基（配制批号： ）培养箱编号： 培养温度： 实际温度： 供试品的检查 ：菌悬液的制备：接种大肠埃希菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，培养 18-24 小时。用 0.9%无菌氯化钠溶液 10 倍递增稀释制成每 1ml 含菌数为 10-100cfu 的菌悬液，备用。阴性对照试验：取稀释液 10ml 照相应供试品的控制菌检查，作为阴性对照。阳性对照试验：阳性对照试验方法同供试品的控制菌检查，对照菌加菌量为 10-100cfu。1直接接种法：取 1：10 的供试液
5、 10ml（相当于供试品 1g、1ml、10cm 2） ，直接接种至100ml 的胆盐乳糖培养基中，培养 小时。2薄膜过滤法：取相当于每张滤膜含 1g 供试品的供试液，加 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液适量，混匀，过滤。用 ml pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，冲洗后取出滤膜，接种至 100ml 的胆盐乳糖培养基中，培养 小时。取上述培养物 0.2ml，接种至含 5 ml MUG 培养基的试管内，培养，于 5 小时、24 小时在366nm 紫外线下观察，同时用未接种的 MUG 培养基作本底对照，观察结果 。观察后，沿培养管的管壁加入数滴靛基质试液，液面呈 色。若 MUG 阴
6、性、靛基质阳性，或 MUG 阳性、靛基质阴性，取胆盐乳糖培养基的培养物划线接种于曙红亚甲蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基的平板上，培养 18-24 小时，观察结果为 。检验人： 复核人：3微生物限度检测原始记录文件编号 R07-028-产品名称 规 格产品批号 检验日期结论： 。活螨检验：供试品 用直接检查法， 活螨 。结论： 。结果试验方法 培养箱编号 培养温度培养时间 供试品 阳性对照 阴性对照BL编号：SB02-018-01MUG编号：SB02-018-01I -EMB 或 MacC编号：SB02-018-014检验人： 复核人：微生物限度检测原始记录文件编号 R07-028-产品名称 规
7、 格产品批号 检验日期5控制菌检查 阳性对照菌 取沙门菌 新鲜营养肉汤（配制批号： ）培养物1ml, 9ml0.9%无菌 NaCl 溶液 10 倍递增稀释取供试品 10g 直接接种至 300ml 的营养肉汤（配制批号： ）中，混匀，培养 1824 小时。取上述培养物 1ml，接种于 10ml 四硫磺酸钠亮绿培养基（配制批号： ）中，培养 1824 小时后，分别划线接种于胆盐硫乳琼脂培养基（或沙门、志贺菌属琼脂培养基）和麦康凯琼脂培养基（配制批号： ） （或曙红亚甲蓝琼脂培养基）的平板上，培养 1824 小时（必要时可延长至 40-48 小时） 。若平板上生长的菌落与下表所列的菌落形态特征相符或
8、疑似，用接种针挑选 2-3 个菌落分别于三糖铁琼脂培养基高层斜面上进行斜面和高层穿刺接种，培养 1824 小时。阳性对照试验 阳性对照试验方法同供试品的检查，对照菌加菌量为 10-100cfu。阴性对照试验 取稀释液 10ml 照控制菌检查法检查。结果试验方法 培养箱编号 培养温度 培养时间供试品 阳性对照 阴性对照营养肉汤 编号：SB02-018-01TTB 编号：SB02-018-01DHL 编号：SB02-018-01MacC 编号：SB02-018-01TSI 斜面 编号：SB02-018-01结论: 检验人： 复核人：微生物限度检测原始记录文件编号 R07-028-产品名称 规 格产
9、品批号 检验日期6检品来源 报告日期检验依据 中国药典2010 年版二部细菌、霉菌及酵母菌计数检测室净化工作台编号：SB02-020-02 阳性菌室净化工作台编号：SB02-020-01 供试液制备 ：取本品用开孔面积为 20cm2的消毒过的金属模板压在内层面上，将无菌棉签用09无菌氯化钠溶液，稍沾湿，在板孔范围内擦抹 5 次，换 1 支棉签再擦抹 5 次，每个位置用 2 支棉签共擦抹 10 次，共擦抹 5 个位置 100cm2。每支棉签抹完后立即剪断(或烧断)，投入盛有 30ml 0.9无菌氯化钠溶液的锥型瓶(或大试管)中。全部擦抹棉签投入瓶中后，将瓶迅速摇晃 1 分钟，即得供试液。供试品检
10、查： 平皿法：分别取 100cm2：30 ml、100cm 2：300 ml 供试液各 1ml，置无菌平皿中，注入 1520ml 温度不超过 45的溶化的营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基，混匀，凝固，倒置于培养箱中培养。阴性对照试验 取试验用的稀释液 1ml，置无菌平皿中，注入培养基，凝固，倒置培养。培养和计数： 细菌 30-35，培养 3 天。培养箱编号：SB02-018-01 设定温度：培养基配制批号：培养时间： 月 日 时- 月 日 时霉菌及酵母菌 23-28，培养 5 天。培养箱编号：SB02-019-01 设定温度：培养基配制批号：培养时间： 月 日 时- 月 日 时100cm2：
11、30 ml100cm2：300 ml 阴性对照100cm2：30 ml100cm2：300 ml 阴性对照观察时间（小时）1 2 1 2 1 2培养温度 观察时间1 2 1 2 1 2培养温度24 小时 24 小时48 小时 48 小时72 小时 72 小时96 小时 96 小时120 小时 120 小时平 均结 果检验人： 复核人：微生物限度检测原始记录文件编号 R07-028-产品名称 规 格产品批号 检验日期7控制菌检查 ： 大肠埃希菌大肠埃希菌批号： 营养肉汤培养基配制批号： 胆盐乳糖培养基配制批号： MUG 培养基（配制批号： ）培养箱编号： 培养温度： 实际温度： 供试品的检查 ：
12、菌悬液的制备：接种大肠埃希菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，培养 18-24 小时。用 0.9%无菌氯化钠溶液 10 倍递增稀释制成每 1ml 含菌数为 10-100cfu 的菌悬液，备用。阴性对照试验：取稀释液 10ml 照相应供试品的控制菌检查，作为阴性对照。阳性对照试验：阳性对照试验方法同供试品的控制菌检查，对照菌加菌量为 10-100cfu。直接接种法：取 100cm2：30 ml 的供试液 10ml，直接接种至 100ml 的胆盐乳糖培养基中，培养 小时。取上述培养物 0.2ml，接种至含 5 ml MUG 培养基的试管内，培养，于 5 小时、24 小时在366nm
13、 紫外线下观察，同时用未接种的 MUG 培养基作本底对照，观察结果 。观察后，沿培养管的管壁加入数滴靛基质试液，液面呈 色。若 MUG 阴性、靛基质阳性，或 MUG 阳性、靛基质阴性，取胆盐乳糖培养基的培养物划线接种于曙红亚甲蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基的平板上，培养 18-24 小时，观察结果为 。检验人： 复核人：微生物限度检测原始记录文件编号 R07-028-产品名称 规 格8产品批号 检验日期结论： 。结果试验方法 培养箱编号 培养温度培养时间 供试品 阳性对照 阴性对照BL编号：SB02-018-01MUG编号：SB02-018-01I -EMB 或 MacC编号：SB02-018-01检验人： 复核人：
